毛竹茎竿纤维细胞发育过程中酸性磷酸酶的动态变化

应用磷酸铅沉淀技术对毛竹(Phyllostachys edulis(Carr.)H.De Lehaie)茎竿纤维细胞发育过程中酸性磷酸酶的动态变化进行了研究。结果表明:在纤维原始细胞形成期,酸性磷酸酶主要分布于质膜和细胞核染色质上;在初生壁形成早期,酸性磷酸酶主要分布在质膜、液泡和细胞核染色质上,并在质膜上密集分布;随着初生壁的继续形成,质膜上的酸性磷酸酶逐渐减少呈稀疏分布,而细胞核染色质上的酸性磷酸酶逐渐增多呈密集成团分布;随着次生壁的形成,染色质开始凝聚,细胞核染色质上分布的APase活性有所减弱。但随着液泡膜的裂解,在裂解的液泡膜、降解的线粒体和细胞质上具有APase活性。随着次生壁持续增厚,APase在胞间连丝、质膜、质膜内陷结构、运输小泡和凝聚并边缘化的染色质等部位持续多年保持较强的活性。因此,酸性磷酸酶可能是引起纤维细胞程序性死亡的原因之一,不同的酸性磷酸酶同功酶可能分别参与了毛竹茎秆纤维细胞初生壁和次生壁的形成,以及细胞程序性死亡过程中原生质体的降解。酸性磷酸酶持续保持较高活性与竹子纤维细胞的长寿特性也密切相关。     

莫莫格湿地土壤酶活性特征及其与土壤铁的相关分析

以莫莫格湿地芦苇沼泽(LW)、芦苇-羊草沼泽化草甸(L-Y)和羊草草甸(YC)3种类型湿地土壤为对象,研究了土壤的酶活性特征并对土壤酶与土壤铁进行了相关分析.结果表明:湿地土壤酶活性的垂直变化基本表现为从表层向深层递减的规律,其中Fe2O3还原酶活性和蔗糖酶活性在土壤表层最强.3种类型区土壤Fe2O3还原酶和磷酸酶均表现为LWYCL-Y.土壤酶之间还存在着一定的相关性,Fe2O3还原酶与酸性磷酸酶、过氧化氢酶与中性磷酸酶、蔗糖酶与中性磷酸酶均呈显著相关,蔗糖酶与酸性磷酸酶极显著相关,3种磷酸酶之间也存在极显著的相关关系.从土壤酶与土壤铁的相关分析结果看,湿地土壤Fe2O3还原酶与土壤络合铁、无定形铁和全铁均存在极显著或显著的相关性,土壤游离铁、无定形铁分别与蔗糖酶和中性磷酸酶显著相关.不同土壤环境中土壤铁与各种酶活性之间的相关性有明显差异.LW湿地土壤蔗糖酶与游离铁、无定形铁和全铁均呈极显著或显著正相关;L-Y湿地土壤铁与Fe2O3还原酶、磷酸酶、蔗糖酶之间均有显著的负相关性;YC中无定形铁与Fe2O3还原酶呈显著正相关性,其他土壤铁与酶活性相关均不明显.     

长期饥饿和再投喂对泥鳅不同组织糖原、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的影响

研究长期饥饿和再投喂对泥鳅肝、消化道和肌肉3种组织细胞糖原、酸性和碱性磷酸酶的细胞化学变化.对泥鳅进行饥饿处理,0～28 d不喂养食物,29～35 d恢复正常喂食.分别于0,7,14,21,28和35 d取材,利用显微石蜡切片、组织化学染色的方法检测其肝、消化道和肌肉细胞糖原、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(ALP)细胞化学特征.结果表明,随着饥饿程度的加深,糖原的量减少,碱性磷酸酶活性下降,酸性磷酸酶活性则增强,投喂后,糖原量、酸性和碱性磷酸酶活性都有不同程度的恢复.整个过程中,它们的变化存在组织差异.泥鳅中酸性和碱性磷酸酶均与长期饥饿条件下机体的应激反应有关.     

桉树高代次连栽对林下植物、土壤肥力和酶活性的影响

深入研究桉树高代次连栽对林下植物、土壤肥力和酶活性的影响,对科学了解桉树人工林的生态环境压力,防范外来植物入侵风险和土壤质量退化,保持桉树人工林的可持续高质量发展具有重要意义。本研究采用空间代替时间的方法,以桉树低代次(第1～2代)、中代次(第3～4代)和高代次(第5～6代)连栽林分为对象,比较研究桉树高代次连栽对林下植物、土壤肥力和酶活性的影响。随着连栽代数的增加,林下植物种类和功能群组成均发生显著变化,低代次林分林下以乡土木本植物红背山麻杆、木姜子和白背桐为优势种,乡土木本植物功能群的重要值占67.46%;在中代次林分中,以乡土草本植物小花露籽草和蔓生莠竹占绝对优势,乡土草本植物功能群的重要值占78.69%;进入高连栽代数,则以入侵植物鬼针草、飞机草和阔叶丰花草占优势,入侵植物功能群的重要值占86.25%。研究发现,中、高代次连栽林分的土壤有机质、全氮、全钾、全磷、铵态氮、硝态氮、速效磷、速效钾等8种肥力指标及土壤酚氧化酶、过氧化物酶、酸性磷酸酶、脲酶、β-1,4-葡糖苷酶、N-乙酰-β氨基葡糖苷酶等6种酶活性显著下降。相关分析表明,桉树人工林林下植物多样性与8个土壤肥力指标和5种酶活性(土壤酸性磷酸酶除外)指标呈极显著的正相关关系(P0.01);除土壤酸性磷酸酶外,酚氧化酶、过氧化物酶、脲酶、β-1,4-葡糖苷酶和N-乙酰-β-氨基葡糖苷酶均与土壤肥力指标呈极显著的正相关关系(P0.01)。桉树高代次连栽导致林下乡土植物种类和功能群组成的显著改变,引起土壤肥力和酶活性降低,导致严重的外来植物入侵。     

人工接种和自然堆肥酶活性变化及其与堆肥腐熟程度的关系

以奶牛粪便为堆肥基质,稻壳为调理剂,采用人工翻堆好氧高温堆肥方式,研究比较了添加NMF菌群堆肥、添加灭活NMF菌群堆肥与自然堆肥腐熟过程中各个阶段酶活性变化;结合油菜种子发芽试验,探讨堆肥酶活性变化与堆肥腐熟程度的关系．结果表明：（1）人工接种堆肥比自然堆肥高温期提前7—10d,堆肥腐熟时间缩短25d;（2）添加NMF菌群堆肥、添加灭活NMF菌群堆肥、自然堆肥过程中过氧化氢酶、脲酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、纤维素酶、多酚氧化酶活性均呈“升高-降低-升高-降低”变化趋势;同一堆肥时期,接种NMF菌群堆肥酶活性高于添加灭活NMF菌群堆肥、自然堆肥酶活性;（3）堆肥腐熟后期碱性磷酸酶、多酚氧化酶酶活性较为稳定,可以作为堆肥腐熟的参考指标．     

饥饿应激对泥鳅3种组织糖原,ACP和ALP的影响

研究了饥饿应激对泥鳅肝、肠和肌肉3种组织细胞糖原、酸性和碱性磷酸酶的细胞化学变化.对泥鳅进行饥饿处理,0~28 d不喂养食物,29~35 d恢复正常喂食.分别于0、7、14、21、28和35 d取材,利用显微石蜡切片、组织化学染色的方法检测其肝、肠和肌肉细胞糖原、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶细胞化学特征.结果表明:随着饥饿程度的加深,糖原的量减少,碱性磷酸酶活性下降,酸性磷酸酶活性则增强.投喂后,糖原量、酸性和碱性磷酸酶活性都有不同程度的恢复.整个过程中,上述变化存在组织差异性.泥鳅中糖原量、酸性和碱性磷酸酶活性均与长期饥饿条件下机体的应激反应有关.     

蓖麻蚕磷酸酶研究

磷酸酶普遍存在于脊椎动物上。过去对脊椎动物特别是哺乳类磷酸酶的研究,广泛而深入。无脊椎动物磷酸酶的研穷还较少,昆虫方面虽曾作研究,但对酶的性质和活力变化,了解还少。本试验以蓖麻蚕为材料,用生化方法检查了碱性磷酸酶(以下简称AKP)和酸性磷酸酶(以下简称ACP)在蚕体内各组织中的分布和性质以及在变态期中的活力变化。希望对这两种酶的性质和变化,能有比较清楚的了解,以便在对它更深一层的研究中,提供资料和根据,并为蓖麻蚕变态机制的研究提供资料。     

马尾松×红锥异龄混交林对土壤微生物群落结构和功能的影响

探讨马尾松(Pinus massoniana)纯林改造成马尾松×红锥(Castanopsis hystrix)异龄混交林对土壤微生物群落结构和功能的长期生态效应,为马尾松人工林质量的精准提升提供理论依据。以60 a生的马尾松纯林和改造后的异龄混交林为对象,比较分析纯林和异龄混交林土壤微生物群落结构和功能差异,以及土壤微生物类群与土壤酶活性和土壤性质的相关性。两种林分土壤磷脂脂肪酸(PLFAs)含量均大于0.01 nmol·g-1的标记种类为27种,其中25种PLFAs标记含量均为纯林高于异龄混交林;马尾松纯林土壤微生物群落、细菌、真菌、放线菌、丛枝菌根真菌、革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌的PLFAs均显著或极显著高于异龄混交林;马尾松纯林土壤微生物群落的PLFAs多样性均高于异龄混交林,其中土壤PLFAs丰富度和均匀度指数差异不显著,而香农威纳指数、Simpson指数差异显著;马尾松纯林改造为异龄混交林后,土壤β-1,4-葡萄糖苷酶、N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶、酚氧化酶、过氧化物酶活性均呈现不同程度的降低,而土壤酸性磷酸酶和脲酶活性增加;相关分析表明,不同土壤微生物类群均与β-1,4-葡萄糖苷酶、N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶、酚氧化酶、过氧化物酶呈正相关,与酸性磷酸酶和脲酶呈负相关;与土壤有机质、有效钾呈极显著正相关,而与土壤含水量、土壤微生物生物量氮呈显著负相关。马尾松×红锥异龄混交林对土壤微生物群落结构和功能的长期生态效应不明显,异龄混交林结构简单,物种多样性少,土壤有机质低,以及雨季土壤含水量过高是其土壤微生物群落多样性和土壤酶活性低于纯林的主要原因。     

纳米二氧化钛对小鼠肺部生化指标的影响研究

为研究纳米二氧化钛对小鼠肺部的损伤,将小鼠采用非暴露式气管内注入法注入颗粒悬液建立动物模型,每隔2 d染毒一次,在第10 d处死小鼠,测定肺脏器系数及肺部组织中白蛋白、总蛋白、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的含量.结果显示:纳米TiO2 10 mg·kg-1bw-1组以上指标均高于对照组和其它实验组,且差异显著(P<0.01或P<0.05);纳米TiO2 1 mg·kg-1bw-1组的白蛋白、总蛋白、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶也均高于对照组和微米TiO2实验组,差异显著(P<0.01或P<0.05);微米组除碱性磷酸酶与对照组相比有明显差异(P<0.01),总蛋白、白蛋白和酸性磷酸酶与对照组相比均没有明显差异.在本实验条件下,纳米TiO2颗粒对小鼠肺部损伤比微米级TiO2更严重,引起气血屏障的渗透性改变,肺泡细胞膜损伤或细胞发生死亡和溶解,以及早期纤维化,并表现出计量依赖性.     

叶黄素对破骨细胞分化的影响

研究叶黄素对体外破骨细胞分化的影响.建立由骨保护素配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)共同细胞因子的小鼠破骨细胞骨髓诱导体系,将不同浓度的叶黄素作用于破骨细胞.受试细胞分为对照组、叶黄素低剂量组(10-1mol/L)、叶黄素中剂量组(10-7mol/L)和叶黄素高剂量组(10-6mol/L),并设立空白对照组.7 d后取细胞玻片进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,观察破骨细胞并计数;取骨片进行甲苯胺蓝染色,光镜下统计骨吸收陷窝面积;测量抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性以及破骨细胞表面NF-κB活化受体(RANK)mRNA表达量.诱导培养的破骨细胞形态特征明显;叶黄素中、高剂量组在细胞数量、TRAP活性上与对照组相比有明显统计学差异(P<0.05);叶黄素各剂量组在(RANK)mRNA表达量上与对照组相比有明显统计学差异(P<0.05),且呈量效关系.研究表明叶黄素可以抑制体外培养的破骨细胞分化.     

长毛对虾碱性磷酸酶功能基团的研究

用对－氯汞苯甲酸修饰该酶分子中的巯基，酶活力不受影响，说明该酶不是“巯基酶”．用Ｎ溴代琥珀酰亚胺修饰酶后，活力完全丧失，修饰后的酶在２７５ｎｍ处的紫外吸收峰完全消失，３４０ｎｍ处荧光发射峰也逐渐下降至完全淬灭，说明色氨酸残基是酶活性必需基因之一．用甲醛、醋酸酐修饰氨基，溴代乙酸修饰咪唑基也可以使酶活力完全丧失，说明赖氨酸残基及组氨酸残基也是酶活性功能基因．用乙酰丙酮修饰精氨酸残基，酶活力下降了５０％，精氨酸残基可能与维系酶分子构象有关．     

亚热带基岩海岸防护林土壤的酶活性

研究了我国亚热带基岩海岩主要防护林类型土壤酶活性持征,指出在3种磷酸酶中,酸性磷酸酶活性大于碱性,中性磷酸酶活性。3种磷酸酶与总磷酸酶活性密切相关,但以碱性磷酸酶相关性最高,中性磷酸酶次之,酸性磷酸酸最小。4类土壤酶活性自上而下均逐渐减少。不同森林类型土壤酶活性差异显,林龄越大活性越高,经济林受人为干扰,土壤酶活性居中低水,应采用合理的经营管理措施。     

鸡肝碱性磷酸酶显示方法研究

以鸡肝为材料,利用钙钴法,研究并优化了细胞碱性磷酸酶的显示方法。剪碎鸡肝,低速（500 r/min）离心取得鸡肝细胞悬浮液,制成涂片,在碱性磷酸酶作用液中孵育、染色,在数码互动显微镜下观察鸡肝细胞中碱性磷酸酶的显示与分布。结果表明,在显微镜下能够清楚看到大量黑色沉淀分布,说明细胞中含有大量碱性磷酸酶。     

中国蛤蜊消化系统的组织学与组织化学研究

为探讨中国蛤蜊的消化生理,用组织学和组织化学方法对其消化系统进行了研究.消化道粘膜上皮由纤毛柱状细胞和数量不等的粘液细胞组成.胃和肠纤毛柱状细胞呈现蛋白酶、脂酶、非特异性酯酶和碱性磷酸酶活性.消化腺腺上皮由嗜碱性细胞和消化细胞组成.嗜碱性细胞含丰富的RNA和蛋白质;消化细胞呈现蛋白酶、脂酶、非特异性酯酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性,表明该细胞能进行细胞内消化.     

Effect of E. coli coli on Anti-disease Activities of Scailops: Argopecten irradians

The effect of acute E. coli challenge on the anti-disease activity of scallops Argopecten irra-dians is examined. The treatments of scallop from which hemolymph samples were taken for study included (1) control scallops, (2) sham-injected scallops, (3) PSW-injected scallops and (4) E. coli-injected scallops. From the beginning, the anti-disease activities of scallops are deter -mined at 12 hr and 24 hr.The concentrations of circulating hemocytes, the total serum protein concentrations and the activities of alkaline phosphatase, acid phosphatase and superoxide dismutase in the scallops Argopecten irradians are determined.Injection with E. coli results in a significant elevation in the concentration of circulating hemocytes and in the alkaline phosphatase activity and a significant decline in the total serum protein concentration and in the superoxide dismutase activity at 24 hr postchallenge. It shows that metabolism of bay scallop is expedited to adopt the challenge.     

Evidence that three structural genes code for human alkaline phosphatases.

The number of structural gene loci that code for the different molecular forms of human alkaline phosphatase is unknown. Physical properties of the enzymes, immunological data, chemical inhibition and genetic studies suggest that at least three structural genes are involved: one coding for alkaline phosphatase from placenta, another for the enzyme from intestine, and one or more for the enzymes from liver, kidney and bone. Badger and Sussman have shown that alkaline phosphatases from human liver and placenta are products of different structural genes, and Greene and Sussman have shown that alkaline phosphatase from a metastasised bronchogenic carcinoma was nearly identical to the enzyme from placenta. However, other tumour-associated alkaline phosphatases and the enzymes from normal tissue other than placenta and liver have not been identified by conclusive structural criteria, and thus it is not known whether these onco-alkaline phosphatases represent ectopic production or unusual post-translational modification of the enzymes found in normal tissues. We present here, using a sensitive peptide-mapping technique, structural evidence that the enzyme forms from liver, kidney and serum from a patient with Paget's disease of bone (osteitis deformans) are products of the same structural gene and can be easily distinguished from either the intestinal or placental isoenzymes. The technqiue seems to be useful for the classification of tumour-associated alkaline phosphatases on a structural basis.     

Idealization of the hydrophobic segment of the alkaline phosphatase signal peptide

Proteins secreted by prokaryotic cells are synthesized as precursors containing an amino-terminal extension sequence or signal peptide. Although these signal peptides share little primary sequence homology, recent studies suggest that they function via common pathways during the transport process and that a common element may reside in their secondary structural characteristics. We are investigating the role of an idealized hydrophobic sequence with high potential for alpha-helix formation in the Escherichia coli alkaline phosphatase signal peptide. Here, amino-acid substitutions were made using site-directed mutagenesis to produce a mutant signal sequence containing nine consecutive leucine residues in the hydrophobic core segment. Transport studies with this mutant precursor indicate that mature alkaline phosphatase is correctly targeted to the E. coli periplasm and that processing of the precursor to the mature form of the enzyme is extremely rapid. In contrast, processing is slowed when the mutant signal sequence is lengthened by the insertion of five additional leucine residues and one serine.     

文昌鱼感光细胞中环核苷酸磷酸二酯酶的亚细胞定位

本文用电镜细胞化学的方法,在文昌鱼感光细胞中定位环核苷酸磷酸二酯酶(cNt-PDE).根据反应产物的沉淀颗粒分布特征,很明显该酶主要分布在微绒毛膜、管状结构膜和线粒体膜上;少量散布于细胞质的液相中.用无底物、无碱性磷酸酶或再加抑制剂的反应液作对照,证明所用的方法有特异性.愈远离微绒毛区,酶的反应产物愈少.在靠近微绒毛的色素细胞膜上也有串珠状的沉淀颗粒分布.感光细胞的突触末端也有较强的阳性反应.此外,还讨论了cNt-PDE亚细胞定位和意义.