用瞬态光谱技术研究苯快速反应的微观机理

以激波管作为加栽工具、利用研制的瞬态谱测试技术,对苯在冲击波作用下的快速反应光谱及微观机理进行研究．研究表明：苯在冲击条件下,分子高温分解反应是从C—H键开始的,而不是C—C键．C—H键在温度达到一定值时首先断裂,进行C6H6＋（M）→C6H5＋H＋（M）的反应．此外,苯在冲击条件下及易发生高温分解反应,对此提出了一种防止杂色光误触发的新方法．     

拟南芥对镉胁迫的生理响应

研究拟南芥对不同Cd2+浓度处理（0、20、40、60和80 μM）的生理响应，以探讨Cd2+对植物的毒性效应及植物的耐性机理.结果发现，各浓度Cd2+导致拟南芥过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性显著降低（P<0.05）、植物根部细胞DNA出现明显的损伤，拟南芥生物量及根长也显著降低（P<0.05），表明Cd2+对拟南芥体内的生物大分子产生了严重的胁迫效应.叶片光合色素含量随Cd2+浓度的升高而逐渐下降，在60和80 μM时处理效应达到显著水平（P<0.05），表明高Cd2+抑制植物的光合作用.拟南芥体内丙二醛及可溶性蛋白含量随Cd2+浓度的增加明显上升，在60 μM时处理效应显著（P<0.05），表明Cd2+胁迫导致其膜脂过氧化效应.在全部Cd2+处理下，拟南芥体内谷胱甘肽和植物螯合肽的含量均显著上升（P<0.01）；类黄酮、花色素苷等酚类物质也随Cd2+浓度的增加而上升，并在高Cd2+浓度（60和80 μM）下处理效应达到显著水平（P<0.05），表明拟南芥通过积累具有活性氧抗性的次级代谢产物提高其对Cd2+的耐受性.本研究的结果能够为深入研究Cd2+对植物毒害的分子机制以及植物对Cd2+耐性的分子机制提供实验依据.     

硫苯酰胺对抑郁症大鼠海马区突触素Ⅰ基因表达的影响

利用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组织化学等方法,分别从RNA和蛋白质两方面对硫苯酰胺治疗的和未治疗的抑郁症大鼠海马结构内突触素Ⅰ的表达水平进行对比研究,为临床治疗抑郁症提供分子生物学依据。     

RT—PCR检测草鱼呼肠孤病毒的方法研究

草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus,GCRV）为草鱼出血病的病原．本实验根据GenBank中GCRV和其他水生呼肠孤病毒毒株的第六基因片段,在其保守区设计了一对GCRV特异性引物,建立了快速检测GCRV的逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）方法．该PCR体系中,上下游引物的最适终浓度为120nmol／L,最适退火温度为52℃．PCR特异性试验表明：所设计的引物只能扩增GCRV的核酸,而不能扩增嗜水气单胞菌BSK-10、WSSV以及正常CIK细胞的DNA或RNA．敏感性试验表明,当GCRV的反转录模板稀释至5-7时,PCR结果还为阳性．用所建立的RT—PCR方法对5份样品进行检测,结果表明本研究建立的RT—PCR检测方法可靠且可行．     

牛磺酸对低密度脂蛋白所致大鼠血管内皮损伤的保护作用

目的探讨牛磺酸（Tau）对低密度脂蛋白（LDL）诱导的血管内皮损伤的保护作用与内源件一氧化氮合酶抑制物的关系。方法SD大鼠在乙醚麻醉下，舌下静脉注射人血清LDL（4mg／kg）诱发血管内皮功能损伤。检测血中非对称性二甲基精氨酸（ADMA），丙二醛（MDA）和肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的含量，并观察离体胸主动脉环的内皮依赖性舒张反应。结果单次静注LDL（4mg/kg）显著抑制乙酰胆碱（Ach）诱导的内皮依赖性舒张，增加血液中ADMA，MDA和TNF-α水平。两个剂量牛磺酸（60或180mg/kg）均能显著减轻LDL所致ACh诱导内皮依赖性舒张的损伤，显著抑制ADMA、MDA和TNF-α浓度升高。结论 牛磺酸对LDL诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用，其保护作用与降低ADMA浓度有关。     

大鼠肝纤维化对TGF—β信号通路的影响

采用CCl4损伤性大鼠肝纤维化模型,观察肝纤维化对TGF—β信号通路的影响。方法20只雄性Wistar大鼠随机分为2组：一组作为正常组（C组,n=6）,另外一组为肝纤维化模型组（M组,n=14）。C组,饲普通饲料及自来水,每次腹腔注射2mL·kg^-1橄榄油,M组于实验第1天腹腔内注射50％CCl4（CCl4：橄榄油=1：1）诱导肝纤维化,每次2mL·kg^-1,每周3次,共6周。实验完备后称重、处死,并用分光光度计测定血清中的ALT和AsT活性,用RT—PCR技术检测：Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、Fibroneetion、PAI-1和TGF—β mRNA转录水平。结果：模型组与对照组相比较,ALT和AST活性显著升高（P〈0．05）,Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、Fibronection、PAI-1、TGF—β转录水平同样显著升高（P〈0．05）。结论：大鼠肝纤雏化与TGF—β信号通路有直接的关系,而且在纤维化肝中表达量明显上调。     

UV—C辐照降解水中2，4，6-三氯酚

采用uV—C辐照降解水中2,4,6-三氯酚（2,4,6-TCP）,考察了UV光强、2,4,6-TCP初始浓度、反应液pH值、水中阴离子和阳离子对降解效果的影响．结果表明：UV—C辐照降解2,4,6-TCP符合拟一级反应动力学,在光强为142“W·cm^（-2）,2,4,6-TCP初始浓度为1mg·L^（-1）条件下,辐照120min后2,4,6-TCP的去除率达到76．89％．通过增大紫外光强和减小2,4,6-TCP初始浓度,可提高反应速率和2,4,6-TCP去除率．碱性条件更利于Uv_c辐照降解2,4,6-TCP．水中各种离子的存在对2,4,6-TCP的光解速率有较大的影响,其中SO。”,HCO3-,CO3^（2-）和Fe^（3＋）对反应起促进作用,Fe^（3＋）促进效果最明显．     

AF-1对内毒素诱导RAW264．7细胞IL-10表达的影响

目的探讨抗炎素-1（Antiflammin-1,AF-1）对脂多糖（LPS）诱导的RAW264．7细胞白细胞介素10（interleuki-10,IL-10）表达的影响。方法采用体外培养巨噬细胞RAW264．7细胞,实验分为正常对照组,LPS组和不同浓度的LPS＋AF-1组。应用逆转录PCR（RT—PCR）技术检测IL-10表达的变化。结果1μg／ml的LPS刺激RAW264．7细胞后IL-10的表达较正常对照组增加（P〈0．05）,LPS＋AF-1组IL-10表达较LPS组表达显著升高（P〈0．05）,并具有剂量依赖性结论AF-1可促进LPS诱导的RAW264．7细胞IL-10表达的增加。     

虫草菌提取物对HL-60细胞的抑制作用及G2/M期阻滞的诱导

对人工培养的虫草菌菌丝体提取物进行了体外抗肿瘤活性及其作用机理的研究．依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇和水提取人工培养的虫草菌菌丝体，分别得到石油醚、乙酸乙酯、乙醇和水提取物．采用MTT比色法检测发现乙酸乙酯提取物显著抑制类前骨髓白血病细胞HL-60的增殖活性，半数抑制质量浓度（IC50）约为25μg／mL．并采用流式细胞术和Western blotting等方法进一步研究虫草菌乙酸乙酯提取物抑制HL-60细胞生长的作用机理．用流式细胞仪检测HL-60细胞DNA含量发现，25μg／mL虫草菌乙酸乙酯提取物作用12～2Ah后，S期细胞减少，而G2／M期细胞增多，表明细胞周期中G2／M检验点被阻滞．Western blotting分析结果表明，在虫草菌乙酸乙酯提取物作用后，HL-60细胞中G2／M检验点相关周期蛋白p34^cdc2表达量降低．     

脂多糖对RAW264.7细胞IL-10分泌及mRNA表达的影响

目的探讨脂多糖（LPS）对RAW264．7细胞白细胞介素10（interleuldn-10，IL-10）分泌及mRNA表达的影响。方法采用体外培养巨噬细胞株RAW264．7细胞，实验分为正常对照组、LPS组。采用ELISA法、逆转录PCR（RT—PCR）技术检测IIJ-10分泌及mRNA表达的变化。结果LPS刺激RAW264．7细胞后IL-10的分泌及mRNA表达较对照组增加（P〈0．05），并具有时间依赖性。结论LPS可刺激RAW264．7细胞IIJ—10分泌及mRNA表达的增加。     

硒酸酯多糖和亚硒酸钠抗白血病效应的实验研究

应用ＭＴＴ比色分析法和细胞克隆形成法比较研究了有机硒化物——硒酸酯多糖（Ｋａｐｐａ－ｓｅｌｅｎｏｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ，ＫＳＣ）和无机硒化物——亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）对白血病Ｋ５６２细胞的作用．结果表明：ＫＳＣ和Ｎａ２ＳｅＯ３体外在实验浓度范围内均对Ｋ５６２细胞的增殖具有显著的抑制作用，并有剂量反应关系（ｐ＜０．００１）；Ｋ５６２细胞中具有自我更新能力的细胞群体（克隆形成细胞）对硒的抑制作用更敏感；ＫＳＣ的抗白血病效应明显高于含同样硒量的Ｎａ２ＳｅＯ３，ＫＳＣ的作用约为Ｎａ２ＳｅＯ３的５倍．本研究证明药理剂量的硒可显著抑制白血病细胞的增殖，有机硒比无机硒具有更高的抗白血病活性     

TIMP-1对肝癌细胞BEL-7402的增殖抑制

构建含人组织金属蛋白酶抑制TIMP1基因的表达载体，以磷酸钙沉淀法转染人肝癌细胞系^1BEL－7402，研究过表达TIMP1对肝癌细胞生长的影响，本研究首先从正常流产胎儿组织中提取总RNA，通过RT－PCR扩增获得TIMP1基因，并克隆到pcDNA6表达载体中，经酶切鉴定，序列测定结果正确后，转染入肝癌细胞系BEL－7402，采用MTT（四甲偶氮唑盐微量酶反应比色法）、细胞生长曲线等方法，经数据统计分析发现：TIMP1过表达能够抑制肝癌细胞BEL－7402的增殖。     

一氧化氮供体的合成及其抗菌性能研究

一氧化氮供体S-亚硝基-N-乙酰基-DL-青霉胺（SNAP）对微生物生长具有显著的抑制效果. 为了进一步验证SNAP对微生物抗抑作用，本文通过亚硝化反应制备得到SNAP固体，并基于不同SNAP浓度验证其抗菌性能. 结果表明：（1）通过核磁和紫外表征, 我们成功制备得到SNAP；（2）SNAP对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌（耐药/非耐药）和淋球菌均表现出明显的抑制作用且具有浓度依赖性，表明SNAP具有广谱抗菌特性. SNAP优良的抗菌特性使其及一氧化氮供体在抗抑菌领域有着广阔的应用前景.     

FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析

从嗜热细菌ＦＤ３００９中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ）,逆转录反应在６５℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体ｒＲＮＡ为模板,以与２５５和１８Ｓ ｒＲＮＡ匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物,探明了ＦＤ－ＴＲＴ的最适反应条件： ２５ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ ８．５,２５℃）,２５ ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４,２ ｍｍｏｌ／Ｌ ＭｎＣｌ２,１００ μｇ／ｍｌ明胶．５ ｕｎｉｔ ＲＮａｓｉｎ,２５０ ｍｍｏｌ／Ｌ ４种 ｄＮＴＰ, １μＣｉ３ Ｈ－ｄＣＴＰ, １２ｕｇ ＲＮＡ,２５ ｐｍｏｌ引物,并在此条件下测得 ＦＤ－ＴＲＴ和 Ｔａｑ ＤＮＡ 聚合酶逆转录活力与聚合酶活力的相对比值分别为０．０５６,０．００４５．     

自然老化作用下聚氯乙烯纳米塑料的形成及邻苯二甲酸酯类添加剂的释放

自然老化作用可以促进环境中纳米塑料的形成以及塑料中添加剂的释放,增强了塑料的生态风险以及人体健康风险。本文利用室外模拟实验,以典型的聚氯乙烯（PVC）塑料为研究对象,研究了自然老化作用下PVC塑料表面结构特征的变化,纳米塑料的形成以及邻苯二甲酸酯类添加剂的释放特征。结果表明：老化过程使得PVC发生了脱氯化氢和氧化反应,使得C=C键增多,并且形成了新的—OH和C—O键,显著增加了C=C指数、羟基指数和C—O指数。自然老化作用下,光照50天时,水中纳米颗粒浓度由起始时的7.5 × 106 个/mL增加到9.5 × 107 个/mL;PVC塑料质量由3 200 μg减少到2 000 μg,质量损失率达到37.50%;体系的主导粒径明显降低,由起始时的约219.3 nm减小到约176.6 nm;三种邻苯二甲酸酯类添加剂在水中浸出浓度的大小顺序为邻苯二甲酸二丁酯（DBP,27.40 μg/L） > 邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP,9.69 μg/L） > 邻苯二甲酸丁基苄基酯（BBP,5.68 μg/L）,塑料中添加剂的含量及性质均对其浸出能力具有重要影响。     

大鼠臂旁核内注入去甲肾上腺素及受体阻断剂对迷走—加压反应的影响

采用药物微量注射的方法,研究了２９只大鼠臂旁核（ＰＢＮ）内微量注入去甲肾上腺素（ＮＡ）及受体阻断剂酚妥拉明和心得安对迷走—加压反应的影响．结果表明,ＰＢＮ内注入ＮＡ可显著减弱迷走—加压反应;酚妥拉明可反转由ＮＡ引起的血压反应;心得安无作用．提示,ＰＢＮ参与迷走—加压反应,对此反应的影响是通过α受体实现的     

山苍子油对斜纹夜蛾细胞增殖和凋亡的影响

研究山苍子油对离体培养的斜纹夜蛾（Spodoptera litura，SL）细胞的增殖和凋亡的影响，并初步确定山苍子油主要成分柠檬醛对细胞具有毒杀活性，诱导细胞凋亡. 分别采用CCK、MTT法和流式细胞法研究不同浓度的山苍子油抑制SL细胞的活性，利用流式细胞法验证不同浓度的柠檬醛对SL细胞凋亡的影响. 研究结果表明，山苍子油具有抑制SL细胞的增殖的作用，且随着山苍子油浓度的增大和处理时间的延长，SL细胞的存活率降低，当山苍子油浓度增大至0.015%时，SL细胞的存活率显著降低（P<0.01）；当处理时间达到72 h后，SL细胞的存活率同样呈现显著降低. 柠檬醛作为山苍子油的主要活性成分，对SL细胞亦具有明显的抑制增殖的作用，且成剂量正相关，当柠檬醛浓度大于0.015%时，SL细胞的存活率显著降低（P<0.01）. 山苍子油和柠檬醛均具有明显的促进SL细胞凋亡的作用，并呈剂量依赖关系，初步确定了柠檬醛是山苍子油促进SL细胞凋亡的主要活性成分，为山苍子油基新型植物源农药的开发与利用提供依据.     

棕榈酸果糖单酯的提纯分离

为了得到果糖单酯纯品，需要将果糖单酯与未反应的糖及脂肪酸、催化剂、以及其他残留物进行提纯分离。利用混合溶剂萃取的方法，对固定化脂肪酶（Novazym435）促合成的棕榈酸果糖单酯进行了提纯分离研究。结果表明，混合溶剂环己烷-乙醇-水萃取棕榈酸果糖单酯的纯度可迭93．8％，收率迭到92．5％，同时确定了萃取的最佳等件是V（环己烷）：V（乙醇）：V（水）=2：2：1，棕榈酸果糖单酯的初始质量浓度在0.48—0．60 mg／mL，温度为60℃。     

MNP-端粒酶反义寡核苷酸复合物诱导HL-60细胞凋亡

反义寡核苷酸具有抑制细胞基因表达作用,对于病毒感染及癌症的治疗具有潜在疗效,然而由于其在生物介质中的不稳定性和低穿透率,常需要修饰于一定的载体上,纳米粒子便是其良好的载体,修饰后可提高反义寡核苷酸的稳定性,研究应用FACS,MTT比色法,电子显微镜,原子力显微镜,细胞集落法研究MNP-端粒酶反义寡核苷酸复合物体外诱导HL-60细胞（人急性早幼粒细胞白血病细胞系）细胞凋亡情况,研究结果表明：通过MTT比色法检测可知不同的药物浓度对细胞的生长有明显的抑制影响;实验组细胞在诱导后于流式细胞术检测中产生了亚二倍体峰（凋亡峰）;通过集落形成及电镜观察都有明显的凋亡现象产生,因此认为MNP-端粒酶反义寡核苷酸复合物具有诱导HL-60细胞凋亡的作用。     

FD—TRT耐热逆转录酶的特性分析

从嗜热细菌ＦＤ３００９中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶,逆转录反应在６５℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体ｒＲＮＡ为模板,以与２５Ｓ和１８ＳｒＲＮＡ匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物探明了ＦＤ－ＴＲＴ的最适反应条件：２５ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ,２５ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４,２ｍｍｏｌ／ＬＭｎＣｌ２,１００μｇ／ｍｌ明胶,５ｕｎｉｔ ＲＮａｓｉｎ ２５０ｍｍｏｌ／Ｌ４种ｄ