t. of Physics, Jinan University, 510632, Guanzhou, China;

通过原生质体融合技术,在酿酒酵母与扣囊拟,内孢霉属间原生质体融合产物中,获得兼有两亲株遗传特性的融合子Ｐ５０１和Ｐ５１９．对两融合子进了木薯粉液化物的发酵试验,结果显示乙醇含量分别达６．９％（体积比）和７．７％（体积比）,比亲本提高５３．３％和３７．５％,酒精得率分别提高７．４８％和１０．８９％,提示该技术可用于筛选优良菌株。     

前期生长发育受阻育肥猪的补偿生长

以前期生长发育受阻的育肥猪为试验组．正常猪为对照组，两个试验的结果表明，改善饲养条件后，试验组生长速度明显提高，试验１试验组（ｎ＝５）９月龄体重４０．８千克，日增重６８９．１克比对照组提高２３．１％（Ｐ＜０．０１）；试验２试验组（ｎ＝６０）７月龄体重５０．７千克，日增重６５４．８克，比对照组提高１５．６％（Ｐ＜０．０１）；试验组每日采食风干料明显增加，实验１和实验２分别提高２４．６％和１１．８％：试验组每增重１千克耗ＤＥ和ＣＰ实验１减少８．８７％和１１．８％，实验２减少３．７％和４．１％（Ｐ＜０．０１）．体重９０千克左右屠宰，试验组膘厚、后腿比例和脂肪率减少（Ｐ＜０．０５），但瘦肉率提高（Ｐ＜０．０５）．     

链霉菌种间原生质体融合的研究

金霉素链霉菌和龟裂链霉菌分别在含０．７５％，甘氨酸１．５０％的液体培养基中培养，对数生长中后期的菌丝体易于制备原生质体，当聚乙二醇（ＰＥＧ６０００）浓度为４０％，在５０℃下保温５ｍｉｎ，有效地诱导了两种原生质体的融合。用表型标记和间接选择的方法检出融合子，种间融合率为３．０５％。融合重组体与亲本在菌落形态，孢子形态，抗生素产量和抗噬菌体特性有显著的差异，不同重组体之间也表现了这些差异．     

樱桃谷鸭复合添加剂试验研究

采用研制的樱桃谷鸭专用复合添加剂（ＤＳＭ）分别对７００羽樱桃谷鸭父母代种鸭和５００羽商品代肉鸭进行饲喂试验,结果表明：试验组种鸭４０周龄平均产蛋率比对照组提高９．６５％（Ｐ＜０．０１）,受精率提高８．７６（Ｐ＜０．０１）,饲料报酬提高１２．５（Ｐ＜０．０１）;在对商品代肉鸭的饲喂试验中,试验组肉鸭７周龄平均体重比对照组多增９．８２％（Ｐ＜０．０１）,饲料报酬提高９．１％,差异极显著（Ｐ＜０．０１）．     

二氢吡啶对蛋鸡产蛋性能的影响

取３００日龄罗曼蛋鸡１５３６只,随机分为４组（每组设４个重复）,在自由采食,饮水和光照１６ｈ的条件下,分别饲喂添加０ｍｇ／ｋｇ,１０ｍｇ／ｋｇ,１５０ｍｇ／ｋｇ,２００ｍｇ／ｋｇ二氢吡啶 的玉米,豆煌局粮９０ｄ。结果表明：含１５０ｍｇ／ｋｇ,２００ｍｇ／ｋｇ二氢吡啶饲粮,可使日均产蛋率分别提高７．５２％（Ｐ〈０．０１和７．９３％（Ｐ〈０．０１）,料蛋比分别降低５．８１％（Ｐ〈０．０５）和６．２２％     

BYDV CP基因转化小麦原生质体及转基因植株再生

用原生质体融合技术与ＰＥＧ介导的直接转基因方法相结合，使高频率分裂的小麦济南１７７悬浮细胞系原生质体与具有分化能力的小麦济南１７７胚性意伤组织原生质体融合，形成具有分裂和分化能力的融合细胞；同时，利用ＰＥＧ对原生质体的直接转基因作用，将带有抗病毒基因（ＢＹＤＶＣＹｇｅｎｅ）的质粒Ｐｐｐ１５与带有抗性选择标记基因的质粒严ＰＢｌＡｃｔＳＮ导入融合细胞中．经抗性筛选获得抗潮霉素（Ｈｍ）的阳性克隆并再生植株．对再生植株作ＰＣＲ检测表明，ＣＰ基因已整合到转化植株的基因组中并稳定表达．     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究──Ⅱ53－A_6菌株原生质体形成及再生最佳条件的研究

以地衣状芽孢杆菌５３－Ａ６为出发菌株，考察了各种因素对原生质体形成和再生的影响．在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体，５３－Ａ６菌原生质体形成率和再生率分别达９９．７％和３０．９％。通过光学显微镜和电镜技术，观察了原生质体形成再生和原生质体聚集现象。     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究

以地衣状芽孢杆菌５３－Ａ６为出发菌株，考察了各种因素对原生质体形成和再生的影响，在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体，５３－Ａ６菌原生质体形成率和再生率分别达９９．７％和３０．９％，通过光学显微镜和电镜技术，观察了原生质体形成再生和原生质体聚集现象。     

香菇发酵液对小鼠抗衰老及增强免疫功能的评价

本文以ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠为对象，研究香菇发酵液对小鼠某些衰老和免疫指标的影响。结果表明：香菇发醇液使脑单胺氧化酶活性下降２８．１％（Ｐ＜０．０１）；肝脏超氧化歧化酶活性增强１０．６７％（Ｐ＜０．０５）：心肌脂褐素含量降低２９．７％（Ｐ＜０．０１）．对巨噬细胞吞噬率和吞噬指数分别提高１９２．９％和１０８．７％（Ｐ＜０．０１）；迟发型过敏反应和溶血素的产生分别增强６９．４％和２６５．３％（Ｐ＜０．０１）；对胸腺和脾脏的增重（４９．０％，４５．７％）亦有极显著影响（Ｐ＜０．０１）；以上结果证明，香菇发酵液具有良好的抗衰老和增强免疫力作用，是一种理想的保健食品。     

小诺霉素产生菌棘孢小单孢菌的原生质体诱变育种

通过对菌株产量分布参数的统计学分析，棘抱小单孢菌７４＃被选作原生质体诱变育种的出发菌株．获得小诺霉素含量为８０％的高产突变株的概率以紫外线对原生质体悬液３０秒诱变处理为最高（２２．８％），５株高产突变株的小诺霉素组份与效价平均分别比出发菌株提高３３．３％与５１．２％．初步探讨了甘氨酸对原生质体化的作用机理以及原生质体诱变与再生处理提高小诺霉素产生菌生产能力的机理．     

担子菌LMPQ39与CSP的原生质体融合

本文以有抗菌作用的担子菌ＣＳＰ的高温敏感性为标记，将ＣＳＰ的原生质体与经热灭活的ＬＭＰＱ３９原生质体融合．融合条件为３０％的ＰＥＧ－６０００，３０℃温度下处理２０ｍｉｎ．融合后得稳定融合子１株（Ｆ１），融合频率为１．１×１０－４．对融合子的初步生化分析表明：其抗菌试验呈阳性；ＣＭＣ（按甲基纤维素）酶活为０．３０８Ｕ；玉米粒上生长良好；其酯酶同功酶谱异于双亲但在双亲谱带范围内，并偏近于ＬＭＰＱ３９．对其外观形态、显微结构及超显微结构的观察表明：融合子的形态结构异于亲株但遍近ＬＭＰＱ３９．     

小麦与高冰草原生质体融合及再生能力的恢复

以普通小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ）济南１７７悬浮细胞来源的原生质体与高冰草（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎｅｌｏｎｇａｔｕｍ）愈伤组织来源的原生质体用ＰＥＧ法诱导融合．由于来源材料的长期继代，小麦原生质体的再生能力已很低；高冰草原生质体不能分裂；而融合产物却能高频率的分化出完整植株．融合再生植株的表型类似高冰草，染色体数目和同工酶谱亦然．但它们早期发育的模式与小麦相似．     

单倍体小麦与簇毛麦的不对称体细胞杂交

以小麦杂２４２（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ,ｃｖ．２４２）花药来源的愈伤组织分离原生质体作受体;簇毛麦（Ｈａｙｎａｌｄｉａｖｉｌｏｓａ）幼胚来源的愈伤组织原生质体经２２０μＷ／ｃｍ２紫外线照射３０ｓ作供体,用ＰＥＧ法诱导融合,最后获得再生愈伤组织．对融合再生的４个最先长大的细胞系进行染色体,同工酶和ＲＡＰＤ分析．结果表明,这些细胞系均为体细胞杂种,ＲＡＰＤ技术可作为小麦体细胞杂种早期鉴定的有效方法     

高压静电场对蟆叶秋海棠愈伤组织生长的效应

用＋ １．０ ｋＶ／ｃｍ 场强高压静电处理蟆叶秋海棠愈伤组织３０ ｍ ｉｎ, 处理组愈伤组织生长速率达９０．７ｍ ｇ／ｄ,比对照组高２３％ ,超氧物歧化酶（ＳＯＤ）活性、蛋白质及可溶性糖含量分别为１７９．０ ｕ／ｇ·ＦＷ、１４．４ ｍ ｇ／ｇ·ＦＷ、４９．０ ｍ ｇ／ｇ·ＤＷ, 分别比对照增加１０．６％ 、１０．８％ 、７．７％ 。过氧化物酶 （ＰＯＤ） 和吲哚乙酸（ＩＡＡ） 氧化酶活性分别为５８．０ Ｏ．Ｄ４７０／ｍ ｉｎ·ｇ ＦＷ, １６３．８ μｇ／ｇ·ｈ ＦＷ, 分别比对照下降１２．７％ 和２３．３％ 。     

酵母嗜杀质粒融合转移──Ⅰ．融合转移系统的建立

以嗜杀酵母ＥＲＲ１和啤酒生产酵母ＡＳ２４２０出发菌株，建立了供体菌ＭＫ２－３：Ｋ＋Ｒ＋Ｌｅｕ－ρ＋（ｎ）和受体菌ＡＳ２４２０－１：Ｋ－Ｒ－ｌｅｕ＋ρ°（２ｎ）．对原生质体制备再生条件的研究结果表明两株菌的原生质体制备条件不尽相同；同一菌株原生质体形成与再生的最佳条件也不相同．有利于融合再生的原生质体制备条件是ＭＫ２－３：菌龄３０ｈ，蜗牛酶解量３０ｇ／Ｌ酶解时间３０ｍｉｎ，此时原生质体形成率为８０％，而再生率达１７．１％，这些条件对嗜杀活性无影响，再生菌落的嗜杀活性率达１００％；而ＡＳ２４２０－１；菌龄２４ｈ，蜗牛酶量２０ｇ／Ｌ，酶解时间３０ｍｉｎ，原生质体形成率为８１％，再生率为１８．１％．对四种渗透压稳定剂的再生效果实验表明甘露醇效果最佳，氯化钾次之，考虑到廉价，氯化钾是很好的代用品，在３０％ＰＥＧ６０００及Ｃａ２＋条件下进行原生质体融合，融合率可达８．９×１０－６，对其中的融合子ＭＡＲ４的遗传性状及嗜杀活性的稳定性检测，ＤＮＡ含量及细胞大小测定，ｄｓＲＮＡ质粒的提取及电泳结果分析和发酵性能测定，结果表明融合子ＭＡＲ４具有较高的嗜杀活性并可以稳定遗传，有与供体菌ＭＫ２－３嗜杀质粒ｄｓＲＮＡ相同的电泳行为，     

光合细菌种间原生质体融合及融合子鉴定

以浓度为3mg/l的溶菌酶溶液处理对数生长期的光合细菌球形红假单胞菌(丙酸钠~-)和沼泽红假单胞菌(甘露糖醇~-)50min,获得两菌体形成的原生质体,再生率分别为86％和62％。等量的两亲株原生质体在35％聚乙二醇(PEG,MW.6000)诱导下融合5min,融合率为2.1×10~(-4)。经影印法鉴定,生成的融合子可以分别在丙酸钠和甘露糖醇为唯一碳源的培养基上生长。融合子的体积为3.63um~3,约为两亲株的体积之和。融合子菌落形态特征界于两亲株之间,其降解底物中有机物COD_(cr)的能力,优于任一亲本菌株。获得的融合子杂种细胞,存在着高效降解利用机污染物的优势。     

单倍体小麦与簇毛麦的不对称体细胞杂交

以小麦杂２４－２（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ,ｃｖ．２４－２）花药来源的愈伤组织分离原生质体作受体;簇毛麦（Ｈａｙｎａｌｄｉａ ｖｉｌｌｏｓａ）幼胚来源的愈伤组织原生质体经２２０μＷ／ｃｍ＾２紫外线照射３０ｓ作供体,作ＰＥＧ法诱导融合,最后获得再生愈伤组织。以融合再生的４个最先长大的细胞系进行染色体,同工酶和ＲＡＰＤ分析。结果表明,这些细胞系均为体细胞杂种,ＲＡＰＤ技术可作为小麦体细胞杂种     

棘孢小单胞菌原生质体的融合育种

以小诺霉素（Ｍｉｃｒｏｎｏｍｉｃｉｎ,ＭＣＲ）产生棘孢小单胞菌（Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａｅｃｈｉｎｏｓｐｏｒａ）为出发菌株,诱变筛选得到一株链霉素抗性菌株,抗性菌株的原生质体分别用紫外线照射和热处理致死,通过单亲致死原生质体融合,以链霉素为选择条件选出融合株,经摇瓶发酵并结合薄层层析扫描（ＴｈｉｎＬａｙｅｒＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ,ＴＬＣ）分析,筛得４株ＭＣＲ百分含量高于亲株的融合子,ＭＣＲ百分含量达到９０％,效价１０７６ｕ／ｍｌ,分别比亲株提高１５％和１１％,     

5010（5011）预混料对育肥猪饲喂效果试验

采用单因子随机分组试验方法，研究了几种不同生产厂家的添加剂预混料对育肥猪饲喂效果．全期饲养试验结果表明：使用三旺复合预混料的两组日增重分别比两对照组均值提高１１．５８％和１１．２７％，差异极显著（Ｐ＜０．０１），其余各试验与对照组相比，差异不明显（Ｐ＞０．０５）；饲料报酬三旺组每增重１ｋｇ耗料为３．１３ｋｇ，比两对照组节省９．５９％、１０．５７％，每公斤增重饲料成本比两对照组降低０．６６９人民币元、０．８２５人民币元．     

出芽短梗霉的原生质体形成及再生研究

采用多因素实验正交优选法对出芽短梗霉（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍｐｕｌｕｌａｎｓ）的原生质体制备和再生条件进行了研究．发现在用ＹＥＰＤ作生长培养基,菌龄２４ｈ,复合酶处理（含０．２５％（ｗ）蜗牛酶＋０．２５％（ｗ）纤维素酶）,０．６ｍｏｌ／ＬＫＮＯ３作渗透压稳定剂的情况下,原生质体制备率最高,酶解１ｈ,制备率为１００％,再生率为０．３５％．如用ＰＤＡ为再生基础培养基,在添加５０ｍｍｏｌ／ＬＣａＣｌ２,１．０％（ｗ）ＰＥＧ（ＭＷ６０００）等再生促进因子的情况下,再生率可提高到１．２３％