胀果甘草细胞悬浮培养体系的非结构动力学分析

在建立了稳定的胀果甘草细胞悬浮培养体系的基础上,分析了体系中细胞生长、基质消耗及产物合成的动态变化,利用Excel 2013和Origin Pro 8.0软件处理实验数据,拟合出模型参数,建立了相应的非结构动力学模型.模型模拟值与试验值的拟合度良好,相关系数分别为0.968 46、0.964 17、0.975 64,表明建立的动力学模型能很好地预测甘草细胞的悬浮培养过程,对指导反应器放大培养甘草细胞具有重要意义,同时为植物细胞生物反应器的设计提供理论依据.     

红豆杉细胞在反应器中培养动力学的研究

应用气升式生物反应器及搅拌式生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,得到细胞生长和紫杉醇合成动力学曲线.经过反应器动力学的比较,结果表明红豆杉细胞较适于在机械搅拌式反应器中培养.     

不同培养基对羌活植物细胞悬浮培养的影响

探究不同培养基基质对羌活植物细胞悬浮培养的影响,为建立羌活植物细胞悬浮培养体系摸索条件.通过比较不同基础培养基种类、蔗糖浓度、硝态氮与铵态氮的比值和总氮含量等因素对羌活植物悬浮细胞生长的影响,以确定羌活植物细胞悬浮培养的最佳培养基条件.实验结果显示,以MS为基本培养基,当蔗糖浓度为30g/L,NH4^+/NO3^-=1∶2,总氮量为1/2N时,最有利于羌活植物细胞的悬浮培养.实验结果表明,确定的羌活植物细胞悬浮培养的最佳培养基条件,可为后续的羌活植物细胞悬浮培养体系的建立提供依据.     

BHK21细胞悬浮培养的驯化和质量评价

目的:将贴壁培养型BHK21细胞驯化成适合口蹄疫疫苗生产的无血清全悬浮培养型细胞.方法:引进贴壁培养型BHK21细胞,通过改变培养液和降低血清的方法进行悬浮培养的驯化,对驯化得到的悬浮培养型细胞进行生物学检定.结果:引进的BHK21细胞低血清驯化培养22代可悬浮生长,用无血清培养基培养10代后形态趋于稳定生长变快.贴壁和悬浮细胞均有致瘤性,对口蹄疫病毒敏感,适应生物反应器高密度培养,且没有外源物污染.结论:驯化的BHK21细胞可用于口蹄疫疫苗的研究和生产.     

气升式反应器中红豆杉细胞培养动力学的研究

设计了８Ｌ规模的气升式生物反应器,应用该生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,经３０ｄ培养,细胞鲜重达２６ｇ／Ｌ,干重细胞紫杉醇含量达１．１７×１０＾３ｇ／ｇ。建立了细胞生长动力学模型,结果表明该生物反应器适合红豆杉细胞的生长、代谢和产物合成。     

气升式反应器中红豆杉细胞培养动力学的研究

设计了８Ｌ规模的气升式生物反应器,应用该生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,经３０ｄ培养,细胞鲜重达２６ｇ／Ｌ,干重细胞紫杉醇含量达１．１７×１０－３ｇ／ｇ,建立了细胞生长动力学模型．结果表明该生物反应器适合红豆杉细胞的生长、代谢和产物合成．     

电导率法监测红豆杉细胞的生长

对红豆杉细胞在２５０ｍＬ和２Ｌ摇瓶及１０Ｌ反应器中的生长情况进行了研究。应用电导率法监测红豆杉细胞的生长,得出在红豆杉细胞悬浮培养的细胞生物与培养液电导率变化的相关性。     

东北红豆杉细胞悬浮培养研究

东北红豆杉（Taxus cuspidata sieb et zucc)幼茎诱导的愈伤组织经多次继代培养，选择生长旺盛，紫杉醇含量高的愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织继代培养及细胞悬浮培养的条件进行了研究，确定了适合愈伤组织生长的条件以及影响细胞悬浮培养的主要因素。     

香荚兰细胞悬浮培养产生香兰素的研究

研究了香荚兰细胞悬浮培养的生长周期，呆溶性糖浓度、ＰＨ变化及植物生长调节剂对细胞生长与香兰素产生的影响，发现细胞悬浮培养生长周期以１４ｄ为宜，ＮＡＡ比２，４－Ｄ理我适合细胞生长及香兰素形成。     

昆虫细胞Sf9在四种生物反应器中的培养

昆虫细胞表达系统已广泛的应用于表达各种重组蛋白,研究昆虫细胞Sf9分别在4种生物反应器:转瓶、摇瓶、Bellocell反应器、发酵罐中进行悬浮培养.转瓶、摇瓶、Bellocell和发酵罐的细胞接种密度都是5×102/mL.对细胞数量、葡萄糖浓度以及主要代谢产物乳酸、氨的浓度进行检测.昆虫细胞经转瓶和摇瓶培养,细胞密度达到最高分别为:5.5×106、7.3×106/mL,是起始密度的11倍和14.6倍.昆虫细胞经Bellocell和发酵罐培养,细胞密度达到最高分别为:8.01×106、1.52×107/mL,是起始密度的16.02倍和30.4倍.昆虫细胞经四种生物反应器中的悬浮培养之后,都达到了很高的密度,尤其是经发酵罐培养达到如此高密度,为高效大规模表达药物蛋白,奠定重要的基础.     

生物反应器培养细胞组织的机械刺激作用

生物反应器用于组织工程细胞的培养目前已经应用的比较广泛．为了构建与在体组织的结构和力学性能相同的工程组织，人们开始尝试使用一定的机械刺激添加到生物反应器中，这不仅对于人工组织的合成具有重要的意义，而且还可以加深人们对组织和细胞本身性质的了解．综述了国内外一些文献对于生物反应器中机械刺激添加的原理和具体方法的报道，并分析了有刺激添加的反应器未来的发展趋势．     

电导率法监测红豆杉细胞的生长

对红豆杉细胞在 2 5 0mL和 2L摇瓶及 1 0L反应器中的生长情况进行了研究 .应用电导率法监测红豆杉细胞的生长 ,得出在红豆杉细胞悬浮培养的细胞生物量与培养液电导率变化的相关性 .     

斯氏线虫生物反应器液体培养的初步研究

应用气升内环流反应器和机械搅拌通气反应器进行昆虫现原斯氏线虫Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｃａｒ－ｐｏｃａｐｓａｅＡ２４液体培养。研究分析了培养液成分变化、流变学特性和反应器结构对感染期线虫产量的影响。研究结果为反应器大规模培养线虫的商业化学提供有用依据。     

一种简单方法提高原生质体再生植株频率

发展了一种简单有效的方法,提高从灿稻品种Ｐｕｓａ Ｂａｓｍａｔｉ１建立的超过１年龄悬浮细胞系中游离的原生质体再生植株频率。两步再生法,即先将愈伤组织转入含高浓度琼脂糖（１０ｇ／Ｌ）的再生培养基中培养后再转入含低浓度琼脂糖（４ｇ／Ｌ）的再生培养基中培养,有助于植株再生,两步再生法结合使用含高浓度激动素Ｋｉｎｅｔｉｎ（１０ｍｇ／Ｌ）的再生培养基,显著提高植株再生频率,利用此法,可使来源于超过１年龄的悬     

Morphological Transformation of Plant Cells in vitro and Its Effect on Plant Growth

Enhancement of cell growth in suspension cultures is urgently needed in plant cell culture engineering. This study investigates the relationship between morphological transformation and cell growth in callus and suspension cultures of saffron cells belonging to the cell line C96 induced from Crocus safivus L In the suspension culture, an unbalanced osmotic pressure between the intracell and extracell regions induced a large morphological transformation which affected normal division of the saffron cells. An increase in osmotic pressure caused by the addition of sucrose inhibits the vacuolation and shrinkage of cytoplasm in the cells. As the sucrose concentration increases, the total amount of accumulated biomass also increases. Besides the sucrose concentration, increased ionic strength and inoculation ratio also help restrain to a large extent the vacuolation and shrinkage of the cytoplasm in the suspended cells, which results in increased biomass. The conditions for optimal biomass are： Murashige and Skoog＇s （MS） medium with 40 g/L sucrose and 60% （v/v） inoculation ratio.     

薄荷脱毒苗的离体培养及快速繁殖

探讨薄荷(Mentha hoplocalyx Briq)离体培养过程，为优良品种的快速繁殖奠定基础。以薄荷脱毒苗带茎节为外植体，采用MS基本培养基，附加不同激素进行实验。培养基中附加激素6-BA有利芽的发生；适宜的6-BA浓度为1mg／L，出芽率高且出芽数量多；对愈伤组织的增殖以添加2，4-D0．5mg／L、NAA0．5mg／L和6-BAl．Omg／L为最佳。通过薄荷离体培养的研究，获得了较高的植株再生频率，建立有效的组织培养再生体系。     

白花泡桐叶柄愈伤组织再生植株的诱导与培养

为提高白花泡桐繁殖效率,防止丛枝病的传播,保持优良种性,利用愈伤组织再生技术对其增殖.研究表明:叶柄产生愈伤组织最适培养基为MS 2.0 mg/L BA 0.2 mg/L NAA 0.05 mg/L2,4-D;诱导芽分化最适培养基为1/2MS 2 000 mg/L脯氨酸,可使诱导分化率达27%;增殖继代最适培养基为B5 1.0 mg/L BA 0.1 mg/L NAA,增殖系数达6.79;生根最适培养基为1/2MS 0.1 mg/L IBA 0.1 mg/L NAA,生根率达100%.     

生物量对黄花蒿悬浮培养细胞生长的影响

黄花蒿细胞悬浮培养过程中，分别以１０、３０、６０、８０ｇ／Ｌ的接种量进行细胞生长的对比实验．在所述培养条件下的最适起始细胞浓度为鲜重６０ｇ／Ｌ培养基．起始培养的细胞浓度直接影响细胞的生长周期增殖倍数．起始浓度越高，细胞生长周期越短，但细胞的增殖倍数越小．起始细胞浓度对黄花蒿悬浮培养细胞对数生长期的比生长速率影响不大．     

层流剪切力对悬浮培养红豆杉细胞HMGR酶基因转录的影响

以HMGR酶基因为研究对象,采用实时荧光RT-PCR技术,研究了Couette式反应器中0．3 Pa层流剪切力作用后悬浮培养的对数期东北红豆杉细胞HMGR酶基因转录情况．结果显示,在对数生长时期,未经剪切处理的悬浮培养虹豆杉细胞HMGR基因转录水平呈增长趋势,而剪切处理后的悬浮培养红豆杉细胞HMGR基因转录水平则基本保持不变．同时,对相应细胞生物量的测定结果也显示出类似的变化．以上结果说明在对数生长时期施加一定强度的剪切力,将使细胞生长发生停滞,谊生长停滞现象可能与因剪切所引起的HMGR基因转录水平下降有一定相关性．