IM-94增强小鼠免疫功能的实验研究

研究了ＩＭ９４ 对免疫低下小鼠免疫功能的影响．结果显示：ＩＭ９４ 能逆转环磷酰胺所致的免疫低下反应,并进一步提高小鼠的免疫活性,使其巨噬细胞吞噬能力、ＮＫ 细胞自然杀伤活性、淋巴细胞增殖水平、半数溶血值和抗体生成细胞水平均有明显提高,说明ＩＭ９４ 对实验小鼠有正向免疫调节作用．     

粉纹夜蛾5BI细胞的悬浮培养

报道了粉纹夜蛾５ＢＩ细胞在转瓶系统悬浮培养及血清浓度，细胞接种浓度，非离子表面活性剂Ｐｌｕｒｎｉｃ－Ｆ－６８等对细胞生长的影响与作用，实验结果显示：５ＢＩ细胞能够搅拌条件下，在含５％血清培养基中正常生长增殖，当血清浓度降至２％时。细胞生长速率产生较明显变化，ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ－６８对细胞生长有显著的保护作用，５ＢＩ细胞适宜于悬浮培养和进一步放大培养。     

完全体外化牛细胞核移植的研究

本研究探讨了用体外成熟卵母细胞和体外受精胚胎进行核移植的可能性。本研究结果在我国首次获得牛核移植的成功。从屠宰场回收的卵巢中抽取卵球－卵母细胞复合体，采用以前报道的方法（石德顺等，广西农业大学学报’１９９４：１３：１－５）进行体外成熟（ＩＶＭ）和体外受精（ＩＶＦ），获得ＩＶＭ卵母细胞和ＩＶＦ胚胎，体外成熟２３－２４ｈ后，在含０．１％透明质酸酶的无钙镁ＰＢＳ（ＰＢＳ）内，用细管反复吹打去掉卵丘细胞。选择具有明显第一极体的卵母细胞通过显微操作移去第一极体及其附近约一半的细胞质进行去核，去核的卵细胞在成熟液内继续培养到ＩＶＭ３０ｈ．体外发育到８－３２细胞期的ＩＶＦ胚胎用作核供体．供体胚胎用含０．２５％Ｐｒｏｎａｓｅ（溶于ＰＢＳ￣－）溶解透明带，并用细管吹打将其分散成单个卵裂球，在ＩＶＭ３０ｈ将单个卵裂球显微注入去核卵母细胞的卵周隙内，并在ＩＶＭ３１ｈ用８０Ｖ／ｍｍ４０μｓ两次电脉冲（间隔１秒）来诱导卵裂球与去核卵母细胞的融合。融合卵在颗粒细胞单层培养滴内共培养，体外培养２４ｈ后观察卵裂结果，经体外培养５－８天后发育到桑椹和囊胚的核移植胚胎移植到同期发情的受体．２个月后直检妊娠情况．本实验中共操作１９４枚卵母细胞，     

农药生物测定新方法的研究：I.几种有机溶剂对中国棉铃虫

将溶解蓝紫色结晶物的溶剂改为ｐＨ４．５的３％ＳＤＳ异丙醇，实验结果更为准确、可靠用改进的ＭＴＴ方法研究了丙酮、二甲亚砜、Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、乙醇、二甲苯等有机溶剂对中国棉铃虫细胞系（ＢＣＩＲＬ－ＨＡ－ＡＭＩ）生长的影响，结果表明，除二甲苯外，用０．５％浓度（体积比）处理２４ｈ，其细胞存活率与空白对照无显著差异；１％浓度时，其细胞存活率仍在９０％以上，依次为：９５．８％，９２．５％，９４     

Pyrococcus sp.DNA聚合酶内蛋白子突变体的剪切性质

将含麦芽糖结合蛋白－嗜热菌ＤＮＡ聚合酶内蛋白子基因的ｐＭＩ８４、ｐＭＩ９４、ｐＭＩ９５三个重组突变体质粒转入Ｅ．ｃｏｌｉ２４２６经发酵及ＩＰＴＧ低温诱导表达,直链淀粉糖亲和纯化获得ＭＩ８４（ｓｅｒ１／Ｓｅｒ５３８Ｓｔｏｐ）、ＭＩ９４（Ｓｅｒ１→ＣｙｓＨ１／Ｓｅｒ５３８Ｓｔｏｐ）、ＭＩ９５（Ｓｅｒ１→Ａｌａ１／Ｓｅｒ５３８Ｓｔｏｐ）三种蛋白质前体。研究了ＰＨ温度、巯基试剂对内蛋白子Ｎ末端的剪切影响。     

小鼠金属硫蛋白基因—I在CHO细胞中稳定表达及其在医疗…

将小鼠的ＭＴ－Ｉ基因插入ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ质粒的ＥｃｏＲＩ位点，构建了具有ＳＶ４０和ＭＴ双启动子并正向插入ＭＴ－Ｉ基因的表达载体。用改良的磷酸钙／ＤＮＡ沉淀法将表达载体导入ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＾－细胞内，用不含次黄嘌呤（Ｈ）和胸腺嘧啶（Ｔ）的选择培养基筛选出稳定表达ＭＴ阳性克隆Ｄ－２２，经检测１０＾６细胞的ＭＴ表达量约为１．８μｇ，Ｄ－２２细胞对Ｃｄ＾２＋浓度抗性较之ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＾－细胞高１４倍。     

血清浓度对SMMC—7721细胞DNA合成的影响

以人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞为材料研究了不同血清浓度对ＤＮＡ合成和细胞生长状态的影响，结果表明几乎在所有处理中短时无血清培养都能刺激ＳＭＭＣ－７７２１细胞的ＤＮＡ合成，且＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量与培养液中ＦＣＳ浓度成明显负相关，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量比值最高可达３９．３２倍．１８ｈ内，随培养时间的增加无血清培养对细胞ＤＮＡ合成的刺激作用逐渐下降，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量比值从３９．３２倍下降为３．５３倍，     

CIM—MIS中的销售信息管理与决策子系统

本文对ＣＩＭ－ＭＩＳ中的销售信息管理与决策子系统ＣＩＭ－ＳＩＭＤＳ进行了研究，在对ＳＩＭＤＳ的开发目标，可行性及功能等方面进行分析后，提出了ＣＩＭ－ＳＩＭＤＳ的总体框架，并利用有关开发工具实现了ＳＩＭＤＳ。     

α—干扰素、异搏定协同逆转肾癌细胞药物耐受性

目的：α－干扰素（α－ＩＦＮ）、异博定（ＶＲＰ）对ＲＣＣ－９２５肾癌细胞阿霉素敏感性的影响。方法：（１）将ＲＣＣ－９２５肾癌细胞分别与不同浓度的逆转剂α－干扰素或异搏定或α－干扰素＋异搏定及与不同浓度阿霉素（ＡＤＭ）共同培养;ＭＴＴ法检测肿瘤细胞的存活率。（２）图像分析仪检测逆转前后ＰgP(P-glycoprotein)4表达。结果：单独应用α－干扰素无逆转作用,联合应用α－干扰素、异搏定显著逆转肿瘤细胞的耐药性,效果优于单用异搏定（Ｐ＜０．０５）;２．５mg/L异搏定＋５００pg/mLα－干扰素共同与细胞作用后,PgP表达降低。结论：α-干扰素、异搏定作为逆转剂联合使用,能显逆转RCC－925细胞的耐药性,可望为临床耐药肿瘤的治疗提供一种新的方法。     

高三尖杉酯碱对白血病细胞分化和肿瘤转移的影响

为研究高三尖杉酯碱（Ｈｏｍ）对白血病细胞分化和肿瘤转移的影响．采用四氮唑蓝法检测ＨＬ－６０细胞的分化及测定游离磷含量观测肿瘤细胞Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｍｇ＋＋－ＡＴＰ酶活性．肿瘤转移模型采用小鼠皮下接种Ｌｅｗｉｓ肺癌观测肺转移灶数和小鼠足跖接种Ｐ３８８白血病细胞观察动物生存期,且用γ射线测定法评价１２５Ｉ－纤维蛋白原与肿瘤细胞的结合能力．结果显示Ｈｏｍ１．５～４．５μｇ／Ｌ能诱导ＨＬ－６０细胞分化,Ｈｏｍ０．１μｍｏｌ／Ｌ２４ｈ对Ｆｒｉｅｎｄ白血病细胞Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性抑制,对Ｍｇ＋＋－ＡＴＰ酶活性无影响,Ｈｏｍ０．５～１．５ｍｇ·ｋｇ－１／ｄ剂量下能抑制Ｌｅｗｉｓ癌肺转移和Ｐ３８８白血病细胞淋巴道转移,以及Ｈｏｍ２～１０ｍｇ／Ｌ抑制纤维蛋白原与癌细胞的结合．提示Ｈｏｍ能通过以上途径诱导肿瘤细胞分化和抗肿瘤转移     

OA对人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402增殖的影响和对细胞凋亡的诱导作用研究

 以人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402为研究对象,通过MTT法、细胞外部形态观察、Annexin V.FITC&;PI双染法及TUNEL法等方法,研究了腹泻性贝毒的主要组分大田软海绵酸（Okadaic acid, OA）对其增殖的影响及对细胞凋亡的诱导作用。结果表明：OA对人两株细胞的增殖均有显著的抑制作用,24 h IC₅₀分别为65 ng/mL和60 ng/mL,且这种抑制作用呈剂量依赖性。OA导致两株细胞的形态均发生明显变化：细胞变圆,脱壁,细胞膜形成泡状突起,最终形成膜包裹的凋亡小体。Annexin V.FITC和PI双染法及TUNEL法检测均发现：OA能够诱导两株细胞发生不同程度的凋亡,且凋亡细胞的比例与OA的浓度相关。以上结果表明：OA能够通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡而对人肝细胞和肝癌细胞造成影响,且这种影响的程度与OA的浓度和作用时间密切相关。     

藏药抗肝癌活性研究

本实验采用快速溶剂萃取法制备收集100种常用藏药的环己烷、乙酸乙酯和甲醇提取物,并运用MTT法对两个肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721进行各提取物的抗肝癌活性测试,同时选用L-02细胞来评价其体外毒性.抗肝癌活性结果显示100种常用藏药中17种藏药材有良好的抗肝癌活性,其IC50值均小于150 μg/mL,其中马兜铃、蓝翠雀花、甘青青兰、掌叶橐吾的乙酸乙酯提取物显示出显著的抗肝癌活性,其IC50值均小于50 μg/mL,但马兜铃乙酸乙酯提取物对正常肝细胞L-02显示出一定的毒性.在进一步的抗HepG2肝癌活性验证中,结果显示蓝翠雀花乙酸乙酯提取物和甘青青兰乙酸乙酯提取物具有显著的抗肝癌活性,两者在抗HepG2肝癌细胞株活性中皆显示出显著的时效和量效关系.运用倒置显微镜以及Hoechst 33258荧光染色法对经过蓝翠雀花乙酸乙酯提取物或甘青青兰乙酸乙酯提取物作用的HepG2细胞形态进行观察,结果提示蓝翠雀花和甘青青兰乙酸乙酯提取物可能是通过诱导HepG2细胞凋亡而显示抗癌活性.     

DADS对人小细胞肺癌细胞株NCI—H446增殖的影响

目的探讨二烯丙基二硫（diallyldisulfide,DADS）体外抑制人肺癌细胞株NCI—H446细胞增殖作用。方法采用MTT、细胞计数、细胞活力检测DADS对体外培养的人肺癌H446细胞的抑制增殖作用;倒置显微镜观察DADS对体外培养的人肺癌H446细胞的形态学改变。结果IVIqT结果显示,DADS作用H446细胞后,明显抑制细胞增殖且抑制率呈现浓度时间依赖性关系;细胞计数结果表明,DADS作用H446细胞后其细胞群体倍增时间延长;形态学变化观察,随着DADS浓度递增,细胞逐渐稀疏,数量明显减少。结论DADS对人小细胞肺癌H446细胞株具有抗增殖作用,且与药物浓度及作用时间相关。     

H2S对ox-HDL致内皮细胞损伤的保护作用

探讨硫化氢对氧化高密度脂蛋白（ox-HDL）致人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤的保护作用.方法 体外培养HUVECs细胞,应用形态学观察法和噻唑兰（MTT）比色法检测细胞活性,试剂盒测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH) 及丙二醛(MDA)含量.结果 ox-HDL组细胞损伤明显,经硫化氢低、中、高剂量组的干预,受损情况均有较明显改善,细胞存活率增加,且培养液中LDH及MDA含量降低,与对照组比较差异有显著性(P<0.05).结论 硫化氢对ox-HDL所致内皮细胞损伤具有一定的保护作用,其机制可能与降低氧自由基抗氧化作用有关.     

候选药物TW918对K-Ras突变型人肺腺癌A549细胞的体外抑制作用

探讨候选药物TW918对K-Ras突变型人肺腺癌A549细胞的体外抑制作用.以MTT法检测TW918对A549细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测A549细胞周期和凋亡的变化;Western blotting 检测相关蛋白的表达.结果表明:候选药物TW918可以以时间和剂量依赖性地抑制A549细胞的增殖,且作用72 h时抑制效果比吉非替尼高9.93倍;引起细胞周期阻滞于G1期,并诱导细胞发生凋亡;降低A549细胞中p-EGFR的表达,并抑制其下游PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活.TW918对K-Ra     

顺铂与丝裂霉素对体外人胃癌细胞的影响

进行了顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)合用对人胃癌细胞影响的实验研究.用MTT法观察其对体外培养的人胃癌细胞SGC7901,在DDP与MMC合并用药前后对细胞存活率的影响,并通过流式细胞仪检测细胞周期变化,透射电镜观察细胞超微结构变化.DDP与MMC合用与单独应用化疗药相比细胞存活率明显下降,其增效倍数为单独用药的2.52～4.36倍(P＜0.01),细胞生长停止在S期,S期数分数为0.49,抑制细胞有丝分裂及DNA合成,细胞超微结构显示细胞核固缩、空泡形成、微绒毛减少、线粒体及内质网肿胀.结果显示,顺铂与小剂量化疗药物合用,可获得化疗药物单独用药相同疗效,丝裂霉素增加化疗药对肿瘤细胞的细胞毒作用,增加敏感性,减少药物副作用.     

空间环境及参芪扶正注射液对淋巴细胞的影响

观察淋巴细胞Jurkat在空间环境下的生存状况及形态,探讨参芪扶正注射液对接种低温细胞生存系统中淋巴细胞Jurkat的保护作用,为预防空间环境对宇航员的免疫系统损伤提供线索。将淋巴细胞Jurkat搭载于第22颗返回式卫星,经18d空间飞行,回收卫星返回后的细胞,光镜照相,Giemsa染色;将参芪扶正注射液加入无源搭载的淋巴细胞Jurkat中,MTT,光镜照相,采用快速细胞染色法。无源搭载淋巴细胞Jurkat在空间环境下存活;加入参芪扶正注射液的淋巴细胞于低温生长系统中,其形态上及增殖数目上优于对照组。空间环境有利于淋巴细胞生长,参芪扶正注射液对淋巴细胞具有保护作用。     

磷脂替加氟缀合物抑瘤作用的研究

为探讨ＣＰＬＴ２的抗肿瘤活性和其可能的作用机理,对经ＣＰＬＴ２处理的多种肿瘤细胞和正常人胚肺成纤维细胞的增殖活性进行了测定,并使用ＴＵＮＥＬ法和流式细胞仪对肺癌细胞系（ＰＧ）的凋亡细胞进行了测定,发现ＣＰＬＴ２能抑制多种肿瘤细胞的增殖活性,而且这种作用随着剂量的增加和时间的延长而增强。另外,经ＣＰＬＴ２处理的ＰＧ细胞显示出凋亡的特征。本研究提示ＣＰＬＴ２具有一定的抗癌活性。     

文殊兰弱碱性生物碱的抗肿瘤活性研究

研究文殊兰中弱碱性生物碱对不同肿瘤细胞的抑制作用,并筛选出敏感细胞株,观察凋亡形态;MCF-7细胞株、SMMC7721细胞株、SGC7901细胞株、HepG-2细胞株,MTT溶液,DMSO,Hoechst33258等;利用MTT法检测文殊兰弱碱性生物碱对上述肿瘤细胞的抑制作用以及Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态学变化;文殊兰弱碱性生物碱对上述细胞株均有明显的抑制作用,对HepG-2细胞的抑制作用更为明显,给药72 h后测定IC50=9.374 323μg/mL;Hoechst 33258染色法观察细胞出现凋亡小体,有凋亡现象发生.文殊兰弱碱性生物碱MCF-7细胞株、SMMC7721细胞株、SGC7901细胞株、HepG-2细胞株具有不同程度的抑制作用,且呈现一定的剂量依赖性,对HepG-2细胞的抑制作用最强,表现出良好的抗肿瘤活性.     

河蚬乙酸乙酯提取物的抗氧化活性及其对人胆管癌细胞的抑制作用

作为传统中药的河蚬具有退热、治疗肝病和解酒等功效.以新鲜河蚬 (Corbicula fluminea)肉为原料,经甲醇抽提,乙酸乙酯萃取等方法得到河蚬乙酸乙酯提取物.运用DPPH法检测其清除自由基的能力,通过MTT法和倒置显微镜观察其对人胆管癌细胞QBC939生长的影响,并通过流式细胞术分析其对QBC939细胞周期的影响.结果显示:河蚬乙酸乙酯提取物对DPPH自由基具有一定的清除作用,在较低的浓度下有较高的清除效果,IC50值为0.6 mg/mL,且随其浓度的增加而不断增强;河蚬乙酸乙酯提取物对QBC939细胞有显著的抑制作用,处理48 h,IC50值为250 μg/mL,细胞形态发生明显变化;处理后的QBC939细胞出现明显的凋亡峰.研究表明:河蚬乙酸乙酯提取物不但具有抗氧化活性,且对体外培养的QBC939细胞具有明显的增殖抑制作用,能够改变QBC939细胞周期分布,并诱导QBC939细胞发生凋亡.说明河蚬乙酸乙酯提取物可能具有天然药物开发的潜力,同时也为胆管癌的防治提供新的思路和方法.