香石竹斑驳病毒的抗血清制备及应用

用自昆明地区香石竹（Ｄｉａｎｔｈｏｕｓｃａｒｙｐｈｙｌｕｓ）植株上分离、提纯的香石竹斑驳病毒（ＣａｒＭＶ）为毒源，进行了腿肌肉、耳静脉、皮下和多方式多部位注射法等免疫家兔制备抗血清的比较实验．结果表明：多方式多部位注射免疫法得到的抗血清效价明显高于其它三种免疫方法所得的抗血清；获得的抗血清试管沉淀效价为１∶４０９６，琼脂糖双扩散效价可达１∶１０２４．将该抗血清用于５万余株香石竹的种苗、扦头的ＣａｒＭＶ检测中，结果如下：８１４２呈阳性结果，其中有６３９８株尚无病毒侵染症状（隐症）．这些隐症种苗隔离种植１２０ｄ后，５９０３株先后表现出病毒侵染症状，即抗血清对隐症带毒株检测的准确率达９２２６％．     

牦牛肝片吸虫四种抗原交叉免疫印迹分析

用牦牛肝片吸虫四种抗原分别制备四种抗血清，其ＥＳＩＳＡ效价 １：８００，１：１６００，１：３２００和１：８００．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳区带组分分别为２５，２４，１８和９条带；免疫印迹结果，各种抗清与相庆抗原作用的主要抗原成份分别为５，１０，７和３；四种抗原中存在的共同抗原为１７．２ｋＤ；特征抗原ＨＡ为２９．９ｋＤ，ＳＡ为２７．２ｋＤ的２４．３ｋＤ；正常兔血清与各个抗原间均未出现免疫反应。     

对虾病原体鳗弧菌抗血清制备及其血清反应

对鳗弧菌抗血清学制备及其血清反应的研究结果表明，应用免疫注射法，先去除鞭毛抗原，可以获得对虾“黄鳃病”鳗弧菌的高效价的抗血清，其血清效价可以达到５１２０，这为对虾病原菌制备抗血清，提供了一个很好的技术和方法．     

对虾病原体鳗弧菌抗血清制血及其血清反应

对鳗弧菌抗血清学制备及其血清反应的研究结果表明，应用免疫清射法，先去除鞭毛抗原，可以获得对虾“黄鳃病”鳗弧菌的高效价的抗血清，其血清效价可达到５１２０，这为对虾病原菌制备抗血清，提供了一个很好的技术和方法。     

杆状病毒表达的hZP3 B细胞表位嵌合肽的免疫活性研究

为研究杆状病毒系统表达的人透明带ZP3的B细胞表位嵌合肽(BCP)的免疫原性及其抗血清与人透明带的免疫交叉反应，重组z3bcp病毒用于感染sf9细胞以表达BCP。Tricine—SDS—PAGE用于分离感染液中的小相对分子质量表达产物，表达产物用于免疫小鼠制备抗血清，免疫细胞化学试验用于检验抗血清与人卵泡透明带的交叉反应性。结果显示，矽细胞被z3bcp病毒感染后，培养液中分离出一条相对分子质量约为6000的特异带，而正常矽细胞中没有等同的带。免疫细胞化学试验结果显示，该特异肽的抗血清能与人透明带特异结合，表明人透明带BCP嵌合肽在杆状病毒系统中成功表达，表达产物具有抗原性，抗血清能与人透明带特异结合。     

示波极谱直接测定溶血素活性方法的改进

用示波极谱直接测定抗血清中溶血素活性的改进方法。１／１５ｍｏｌ／ＬＮａ＿２ＨＰＯ＿４—１／１５ｍｏｌ／Ｌ　ＫＨ＿２ＰＯ＿４－３×１０￣（－８）％十六烷基三甲基溴化铵缓冲溶液（ｐＨ７．４）被用作支持电解质溶液，本方法灵敏度比以前报道方法提高３．５倍，干扰物的允许量也有增加。     

催化杀虫剂西维因水解的抗体酶制备

以杀虫剂西维因酯解反应中间过渡态的结构信息进行分子设计，合成了α－萘基磷酸氢酯半抗原，将其与载体蛋白牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和鸡卵清蛋白（ＣＥＡ）偶联，制得了具有不同抗原价（４－２２）的合成抗原，经小鼠免疫学实验，优选出可产生滴度高，特异性强之抗血清的免疫用抗原（Ｈａｐ－ＢＳＡ）经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定，用该免疫原制得的鼠抗血清滴度可达１：３２０００优选的Ｈａｐ－ＢＳＡ可被用作产生催化相     

SPA协凝试验法快速检验肉中沙门氏菌

采用Ａ－Ｆ沙门氏菌多价抗血清致敏金葡萄球菌ＳＰＮ０：１８００株，制备成ＳＰＡ诊断液，直接用凝集法检测肉中沙门氏菌，快速（不超过３０ｈ）、准确（与沙门氏菌常规检验法ＳＮ０１７０－９２行业标准对１００个肉样的检测结果符合率达９５．２４％）、灵敏度高（使用效价达１∶６４）、特异性强（只与沙门氏菌发生凝集反应，强度为“＋＋＋”）、检出率高（比常规检验法高１％）、节省费用（每检测一个样比常规检验法节省费用人民币４０元）．     

人血管能抑素免疫兔抗血清制备及其特性测定

纯化的人血管能抑素包涵体进行SDS-PAGE分离，切胶回收目的蛋白，与弗氏不完全佐剂充分乳化后，进行多点皮下注射免疫新西兰白兔，制备兔抗人血管能抑素抗血清，抗血清去除交叉反应抗体后，进行Western Blotting分析抗血清与人血管能抑素及其N端和C端片段的抗原抗体反应特性。结果表明，经过4次加强免疫后，获得了高效价的兔抗人血管能抑素抗血清。抗血清去除交叉反应抗体后，Western Blotting分析表明，它能与人血管能抑素发生特异的抗原抗体反应，同时还能与人血管能抑素的N端片段和C端片段发生特异性较弱的抗原抗体反应。证明制备的兔抗人血管能抑素抗血清能应用于人血管能抑素及其N端和C端片段免疫学研究中。     

催化杀虫剂西维因水解的抗体酶制备(Ⅰ)抗原的分子设计、合成与优选

以杀虫剂西维因酯解反应中间过渡态的结构信息进行分子设计，合成了α－萘基磷酸氢酯半抗原，将其与载体蛋白牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和鸡卵清蛋白（ＣＥＡ）偶联，制得了具有不同抗原价（４～２２）的合成抗原．经小鼠免疫学实验，优选出了可产生滴度高、特异性强之抗血清的免疫用抗原（Ｈａｐ－ＢＳＡ）．经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定，用该免疫原制得的鼠抗血清滴度可达１∶３２０００．优选抗原Ｈａｐ－ＢＳＡ可被用作产生催化西维因水解之抗体酶的免疫原．     

用蛋白质印迹技术检测马槟榔甜蛋白

从马槟榔（ＣａｐｐａｒｉｓｍａｓａｉｋａｉＬ．）种子中分离纯化了马槟榔甜蛋白，并对其氨基酸组成和紫外吸收光谱等理化性质进行了分析测定。用纯化的马槟榔甜蛋白免疫家兔，获得其抗血清，并利用此抗血清通过蛋白质印迹技术检测马槟榔甜蛋白，为马槟榔甜蛋白的基因工程研究提供了专一和灵敏的检测方法。     

抗人PD-1高亲和力抗血清的制备及其在PD-1免疫印迹分析中的应用

利用纯化的可溶性人PD-1胞外域(sPD-1)蛋白为免疫原免疫小鼠,获得抗血清.免疫印迹显示该抗血清与原核表达的sPD-1有特异性反应,但与某些菌体蛋白存在交叉反应.经菌体蛋白吸附法处理后,交叉反应明显减弱.以商业化抗人PD-1抗体和小鼠sPD-1抗血清分析经亲和层析富集的活化的Jurkat T细胞表达的PD-1,只有自制的抗血清鉴定到特异反应条带,其表观分子质量为49 ku.     

花椰菜天然钙调素抗体的特性及其ELISA定量法的建立

钙调素是一种具有多种调节功能的钙结合蛋白质，其免疫原性很弱，本文采用两次基础免疫和多次加强免疫的方法，获得了免疫花椰菜天然钙调素抗血清，用免疫双扩散法鉴定，其效价为１：３２钙调节不易与固相载体结合，我们先用０．２％戊二醛处理聚苯乙烯板载体，再用于包被钙调素，在上述基础上建立了定量测定植物钙调素的竞争性酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）技术及检测动物血清中抗钙调素抗体的间接ＥＬＩＳＡ技术。     

免疫沉淀法分离纯化感染细胞保的甲肝病毒RNA

本研究采用抗血清（多抗血清）沉淀甲肝病毒，并用盐酸胍－酸性酚，氯仿一生法分离纯化病毒ＲＮＡ。此方法能排除非病毒ＲＮＡ的污染，操作简单，要求条件较低，ＲＮＡ的纯度和完整性都较好。     

催化杀虫剂西维因水解的抗体酶制备(Ⅱ)多克隆催化抗体的制备、纯化及检测

以优选的合成抗原（Ｈ(ａｐ)－ＢＳＡ）免疫动物产生了滴度为１：５５０００（１号兔,Ｒｔ－１）的兔抗多克隆催化抗体．采用盐析和ＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＳｅｐｈａｘｏｓｅＣＬ４Ｂ亲和层析法,从兔抗血清中分离出了具有电泳纯度的多克隆催化抗体．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测,ＩｇＧｓ相对分子质量为１４８０００．纯化后的多克隆抗体,经ＥＬＩＳＡ法测定,其最低检出活性为２×１０(－６)～４×１０(－６)ｇ／Ｌ．     

检测海洋弧菌的酶联免疫吸附试验研究

研究建立中国对虾病原菌－副溶血弧菌的间接酶联免疫吸附试验快速检测技术，间接ＥＬＩＳＡ技术中的副溶血弧菌的特异抗血清由家兔制备，羊抗兔ＩｇＧ用碱性磷酸酶标记，酶的底物为对磷酸基硝基苯。将该技术标准化后，测定了抗血清与１３株其它副溶血弧菌菌株２９株其它弧菌标准菌株的交叉反应，并进行了苗期对虾样品中副溶血弧菌的检测。     

苏云金杆菌SD—5菌株晶体蛋白的研究

研究了ＳＤ－５菌株伴孢晶体结构多钛组成和抗原特性，分析了氨基酸组成并进行了糖蛋白的检测，结果表明：ＳＤ－５晶体蛋白主含Ｍｗ１３５０００、Ｍｗ６５０００两条多肽，另见有一Ｍｗ２４００００的弱带，不同方法处理的样品，电泳图谱有一定差异；ＳＤ－５晶体蛋白抗血清与其晶体抗原形成两条沉淀线，而与７２１６、ＨＤ－１形成一条沉淀线。     

实验犬布鲁杆菌诊断试剂的制备和应用

目的　制备犬布鲁杆菌试管凝集菌液和抗血清。方法　苯酚生理盐水冲洗在肝浸液中培养的布鲁杆菌菌苔 ,参照标准比浊管制成所需浓度菌液。采用人工接种比格犬和家兔的方法 ,试管凝集试验测定所得抗血清效价。结果　家兔抗S型血清效价达 1∶32 0 0以上 ,R型抗血清效价达 1∶2 5 6 0以上。比格犬抗血清效价较低 ,最高为1∶6 4 0。结论　S型布鲁杆菌通过静脉免疫即可获得效价较高的抗血清 ,而犬R型布鲁杆菌需采用加佐剂肌肉注射的方法 ,血清效价才能达到较高水平     

人源程序性死亡配体PD-L2蛋白的原核表达与抗血清制备

利用原核表达系统获得包涵体表达形式的重组蛋白h PD-L220~123(Ig V结构域)和h PD-L220~208(Ig V结构域和Ig C结构域);将重组蛋白利用Ni-NTA柱亲和层析纯化与复性后,作为免疫原免疫Balb/c雌性小鼠制备鼠抗人的多抗血清,经ELISA法检测其效价均达到1∶106;Western-blot实验结果表明,制备的多抗血清均能特异性识别h PD-L2蛋白.以制备的多抗血清进行IHC实验评估与鉴定,结果显示:以h PD-L220~123重组蛋白为免疫原制备的多抗血清阳性较弱且定位模糊,以h PD-L220~208重组蛋白为免疫原制备的多抗血清具有很强的膜定位且背景清晰.     

气味沙雷氏菌（Serratia odorifera）核糖体16ku组分的分离和体？…

将气味沙雷氏菌（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｏｄｏｒｉｆｅｒａ）核糖体与该核糖体抗血清进行免疫印迹方法（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ），发现分子质量为１６ｋｕ的蛋白质与抗血清有特异怀免疫反应。用制备电泳从核糖体中分离得到１６ｋｕ组分，发现其特异性免疫活性依然存在，同时对荷Ｓ１８０实体瘤小鼠有明显的保护作用，对荷瘤小鼠的巨噬细胞和巨噬细胞和Ｔ淋巴细胞增殖活性有激活作用，并能刺激体内ＮＫ细胞，使之产生ＮＫ活性，且作