成都地区骨科患者伤口金黄色葡萄球菌感染的分子流行病学及耐药性分析

目的:分析四川成都地区骨科伤口感染金黄色葡萄球菌的分子流行病学特征与耐药现状.方法:收集2016年9月至2019年9月成都地区西部战区总医院骨科分离自伤口分泌物的金黄色葡萄球菌,进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)鉴定及其SCCmec分型、各菌株MLST分型和spa分型.聚合酶链式反应(PCR)检测20种金黄色葡萄球菌常见毒力因子,并对12种常用抗菌药物进行药敏分析.所有结果同时进行MRSA与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)菌株间的比较.结果:195株细菌MRSA检出率为21.0%,MRSA以SCCmecⅠ(41.5%)、Ⅳ(36.6%)型为主, MLST型别主要为ST59 (58.5%)和ST630 (17.1%),spa型别主要为t437 (43.9%);MSSA的MLST主要型别为ST188 (22.1%)和ST6 (13.6%),spa型别主要为t189 (19.5%)和t701 (10.4%).MRSA菌株hlb(P0.01)和seb(P0.01)基因携带率较高,而cna(P0.01)和ebpS(P0.05)基因携带率较低,且这一结果与分子分型相关.耐药分析提示某些抗生素可在经验性抗金黄色葡萄球菌中优先选择.结论:成都地区骨科伤口感染金黄色葡萄球菌主要为ST59/ST630-t437-MRSA-SCCmecⅠ/Ⅳ和ST188-t189-MSSA.分子分型结果与毒力因子携带情况密切相关,本研究结果对本地区抗菌策略的制定有一定参考作用.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及SCC mec分型研究

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性,并对MRSA进行SCC mec分型.方法收集50株MRSA菌株,应用PCR技术扩增mec A基因确证MRSA,并对50株MRSA进行分型,使用纸片扩散法(K-B法)和肉汤稀释法(MIC法)进行耐药性分析.结果 mec A基因检出率为96%;SCC mecⅢ型4株,SCC mecⅣ型3株,其余43株为未分型;50株MRSA对苯唑西林和β-内酰胺类药物完全耐药,对大环内酯类药物及克林霉素耐药性高于80%,所有菌株均对万古霉素、达托霉素和利奈唑胺敏感.结论 MRSA尚未出现严重的多重耐药现象,此结果可为临床用药提供参考.     

成都地区健康犬及其畜主鼻腔金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌的分离及耐药性研究

为了解成都地区健康犬及其主人金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌的携带率及耐药情况,对收集的鼻腔棉拭子样本308份(犬源和人源各154份)进行相关细菌分离、纯化及鉴定.对获得菌株进行药物敏感性和mec A基因检测.结果表明:犬源和人源金黄色葡萄球菌分离率分别为5.19%(8/154)和13.64%(21/154),犬源和人源中间型葡萄球菌分离率分别为9.74%(15/154)和2.60%(4/154);金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌中mec A检出率分别达20.71%和68.42%;29株金黄色葡萄球菌对磺胺二甲嘧啶耐药最严重(耐药率R达93.10%),对青霉素G和复方新诺明耐药较严重(R分别为72.41%和58.62%),对其余药物呈不同水平耐药性(耐药率范围6.90%~27.59%);19株中间型葡萄球菌对磺胺二甲嘧啶、青霉素G耐药非常严重(R分别达100.00%和94.74%),对红霉素及复方新诺明耐药较严重(R分别为78.95%和73.68%),对其余药物呈不同水平耐药性(R范围5.26%~63.16%),26.32%中间型葡萄球菌对苯唑西林耐药.不同来源菌株表现出较严重多重耐药性,尤其是耐苯唑西林中间型葡萄球菌呈100.00%多重耐药性.以上结果说明,健康犬和人类鼻腔内可携带金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌,这些菌株已呈较严重耐药性,在这些菌株中mec A基因普遍存在,应加强对这两种细菌流行情况及其耐药性检测.     

276例临床分离金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的 分析住院患者金黄色葡萄球菌的耐药特点,为临床合理用药提供依据.方法 细菌鉴定应用VITEK32全自动微生物分析鉴定系统,采用K-B法对临床分离的金黄色葡萄球菌菌株进行药物敏感性试验;头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测MRSA.结果 276株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 165株占59.8％;金黄色葡萄球菌(MSSA) 111株,占40.2％.MRSA对青霉素G、氨苄西林100％耐药;对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁100％敏感;对氯霉素、呋喃妥因、利福平耐药率分别为9.1％、15.2％、17％;其他耐药率都在60％以上.MRSA的耐药率明显高于MSSA,且呈逐年上升趋势.结论 金黄色葡萄球菌对多种抗菌药均具有较高的耐药性,临床应根据药敏结果确定患者的治疗方案.糖肽类抗生素(万古霉素、替考拉宁)可作为MRSA重症感染患者的首选药物.     

520株金黄色葡萄球菌的耐药性变迁与分析

采用K—B法进行药敏实验并用琼脂扩散法对苯唑西林耐药的菌株做耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)测定,对2000-2004年韶关市铁路医院临床检出的520株金黄色葡萄球菌进行耐药性变迁情况的分析.结果表明:测定菌株对β-内酰胺类和氟喹诺酮类抗菌药的耐药性总体上呈逐年上升趋势,对氨基糖苷类则有下降趋势,对苯唑西林耐药率逐年增高,出现耐万古霉素的菌株,提示临床医生在治疗金黄色葡萄球菌引起的感染中,应根据不同感染情况参考耐药性监测选用适宜的抗菌药.     

某院金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析

为研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)在医院的临床分布特征及耐药情况,该文以四川某医院2018年收集的539株S.aureus为研究对象,采用微量肉汤稀释法测定其对15种抗生素的最低抑菌浓度(MIC),并用统计学方法进行分析。结果显示,539株S.aureus中有142株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA);MRSA主要分布于皮肤性病科(30株,21.1%);S.aureus对青霉素、红霉素、克林霉素耐药率较高,分别为96.10%、63.50%、60.30%,但对利奈唑胺、万古霉素等敏感;MRSA菌株对苯唑西林、青霉素、红霉素等的耐药率均明显高于甲氧西林敏感型金黄色葡萄球菌(Methicillin-sensitive Staphylococcus aureus,MSSA)菌株;在预防和治疗S.aureus感染时,需根据药敏实验合理选择使用抗菌药物。     

针对不同来源金黄色葡萄球菌分离菌株的agr Ⅰ-Ⅳ分型初探

目的:金黄色葡萄球菌附属基因调节子(agr)位点是一个全面的群集感应系统并且控制着毒力因子的产生,本研究旨在针对不同来源的金黄色葡萄球菌分离菌株进行agr Ⅰ-Ⅳ基因分型研究.方法:根据金黄色葡萄球菌agrⅠ-Ⅳ基因组别类型的引物,对五种不同来源的169株金黄色葡萄球菌DNA模板进行多重PCR扩增,获得目的基因,以判断agr基因型.结果:169株分离菌株中,agrⅡ型的检出率为19%(32/169),agrⅢ型检出率为12%(20/169),agrⅣ型检出率为8%(14/169),五种不同来源的金黄色葡萄球菌均有检出agrⅡ型,均未检出agrⅠ型,并且都含有未能分型的agr阴性菌株.研究结果表明不同来源金黄色葡萄球菌分离菌株中agr Ⅰ-Ⅳ基因型的流行情况.该方法对于金黄色葡萄球菌菌株分子分型有一定的借鉴意义,也为金黄色葡萄球菌菌株分子流行病学调查奠定一定的基础.     

Nuc和mecA基因在金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性检测中的初步应用

目的为获得金黄色葡萄球菌对甲氧西林的耐药信息,评估通过PCR扩增nuc基因、mecA基因检测金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性的可行性。方法收集获得63株临床分离鉴定的金黄色葡萄球菌,采用传统药敏检测方法进行菌株药敏测试;再用PCR方法检测菌株是否携带nuc基因和mecA基因,以传统药敏检测结果为参照,评估用PCR扩增技术检测金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性的可行性。结果 1.样本菌株中有24株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphyococcus aureus,MRSA),39株为甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(Methicillin-sensitive Staphyococcus aureus,MSSA)。来自重症医学科的分离株中MRSA数量较多。2.样本菌株nuc基因携带率为85.7%,其中nuc基因在MRSA菌株中的携带率为87.50%,在MSSA菌株中携带率为84.62%;3.样本菌株mecA基因的携带率为19.05%,其中MRSA菌株的mecA基因携带率为50.0%,MSSA中均不携带mecA基因。来自重症医学科的MRSA中同时携带mecA基因和nuc基因的比例为77.78%。结论用PCR技术检测nuc基因、mecA基因来快速鉴定金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性可能存在一定比例的误诊结果。     

北京地区实验大鼠金黄色葡萄球菌的 检测结果及 MLST 分型分析

目的 了解北京地区实验大鼠金黄色葡萄球菌的携带情况及分子特征,为实验大鼠金黄色葡萄球菌的防控 提供基础信息。 方法 按照 GB / T 14926. 14—2001 实验动物金黄色葡萄球菌检测方法,对 2008—2017 年北京地区 实验大鼠进行检测,并按年份和季节对检出情况进行分析;然后,对其中主要菌株进行 MLST 分型及分析。 结果 2008—2017 年在北京地区实验大鼠中检测到金黄色葡萄球菌 165 株,阳性率为 8. 44% ;2013 年达到金葡菌阳性峰 值(39 株,18. 48% ) ,而阳性率在季节间的差异不明显。 MLST 分型将 148 株金黄色葡萄球菌分为 7 个型别( ST8、 ST3、ST1、ST6、ST2871、ST88 及 ST641) ,其中 ST1 占比最大( 51. 35% ) ,其次是 ST2871( 30. 41% ) ,其余 ST 型别占比 都低于 10% ;进一步分析发现其具有显著的时空分布特点,并存在进化相关性。 结论 本研究为实验大鼠金黄色 葡萄球菌的防控提供了基础信息。     

104株金黄色葡萄球菌的耐药性检测及分析

总结和分析了兰州市中医医院住院及门诊患者下呼吸道标本分离出的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性,为临床治疗和院感控制提供及时准确的依据。分离培养本院2011年1月至2013年12月共3年患者下呼吸道痰液标本,通过鉴定,将分离出的金黄色葡萄球菌做MRSA的检测,统计分析确定为MRSA的药敏试验结果。鉴定出的104株金黄色葡萄球菌,确定为MRSA的有61株,占58.7%。下呼吸道痰液标本中的耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌分离率呈升高趋势,多重耐药日趋严重,增加临床治疗的困难,应高度重视。     

针对不同来源金黄色葡萄球菌分离菌株的agr I-IV分型初探

目的: 金黄色葡萄球菌附属基因调节子(agr)位点是一个全面的群集感应系统并且控制着毒力因子的产生, 本研究旨在针对不同来源的金黄色葡萄球菌分离菌株进行agr I-IV基因分型研究. 方法: 根据金黄色葡萄球菌agrI-IV基因组别类型的引物, 对五种不同来源的169株金黄色葡萄球菌DNA模板进行多重PCR扩增, 获得目的基因, 以判断agr基因型. 结果:169株分离菌株中, agrⅡ型的检出率为19%(32/169), agrⅢ型检出率为12%(20/169), agrⅣ型检出率为8%(14/169), 五种不同来源的金黄色葡萄球菌均有检出agrⅡ型, 均未检出agrⅠ型, 并且都含有未能分型的agr阴性菌株. 研究结果表明不同来源金黄色葡萄球菌分离菌株中agr I-IV基因型的流行情况, 该方法对于金黄色葡萄球菌菌株分子分型有一定的借鉴意义, 也为金黄色葡萄球菌菌株分子流行病学调查奠定一定的基础.     

喙尾琵琶甲抗菌活性的研究

目的:观察喙尾琵琶甲乙醇提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抑菌活性.方法:采用试管稀释法测定喙尾琵琶甲乙醇提取物对5株临床分离的MRSA菌株的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),初步判断其抑菌效果.结果:喙尾琵琶甲乙醇提取物对5株MRSA的MIC值为0.98～1.95 mg/mL,MBC值为3.9～7.8 mg/mL.结论:喙尾琵琶甲乙醇提取物具有良好的体外抑菌活性.     

耐甲氧西林葡萄球菌临床检测方法评价

目的评价三种方法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的可靠性和临床实用性.方法根据NCCLS的判定标准,采用mecA基因PCR扩增法检测临床分离的85株金黄色葡萄球菌和80株凝固酶阴性葡萄球菌,并与苯唑西林琼脂稀释法和头孢西丁纸片扩散法进行比较.结果苯唑西林琼脂稀释法筛选MRSA(MRCNS)的检出率分别93.75%(95.35%)、95.24%(54.05%);头孢西丁纸片扩散法筛选MRSA(MRCNS)的检出率分别为98.43%(95.35%、)、90.48%(64.86%).结论对于MRSA的检测,选用PCR扩增法,该法具有快速、灵敏和特异性强的特点,且纸片法与PCR扩增法检测结果符合率很高;对于MRCNS的检测,通过表型法筛选后,最好能得到mecA基因的确证.     

食品源单增李斯特菌喹诺酮类抗生素耐药机制研究

以945株食品源单核细胞增生李斯特菌(Listeria monoocytogens,LM)作为研究对象,分析其对喹诺酮类抗生素耐药的分子机制。采用KB法筛选出喹诺酮类耐药的LM,利用PCR检测喹诺酮耐药决定区(quinolone resistance-determining region,QRDR)的基因突变以及质粒介导喹诺酮耐药(plasmid-mediated quinolone resistance,PMQR)基因的分布情况,结合最小抑菌浓度(MIC)值和外排泵抑制剂利血平分析其外排泵的作用,多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)结合血清组对耐药菌株进行遗传多样性分析。结果表明:32株耐药菌株中gyrA、gyrB、parC与parE的QRDR均未发生氨基酸突变,且未检测到PMQR相关基因;而7株fepR基因发现新的氨基酸突变位点,其作用机制有待阐明;外排泵基因lde在耐药LM中皆有检出,78.1%(25/32)LM加入利血平后MIC值降低至原MIC的1/2以下,lde可能是导致LM对喹诺酮耐药的重要因素。血清组分析发现32株耐药菌株分属血清组I.1、I.2、II.1、II.2和III,MLST共分为10种ST型,其中ST87、ST9和ST8为优势株,具有一定的致病能力。结果表明,lde是LM产生喹诺酮耐药的重要因素,但LM潜在喹诺酮耐药分子机制仍有待阐明,同时其潜在的致病性应引起重视。     

苯唑西林和万古霉素对金葡菌的抑菌圈直径和最低抑菌浓度的关系

目的分析苯唑西林和万古霉素对金黄色葡萄球菌的纸片扩散法抑菌圈直径和E-test法最低抑菌浓度间的关系。方法用纸片扩散法检测苯唑西林和万古霉素对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径,用E-test法检测最低抑菌浓度(M IC)。结果纸片扩散法和E-test法检测金黄色葡萄球菌对苯唑西林的敏感性,敏感率分别为85.0%和86.5%,中介率分别为2.3%和3.0%,耐药率分别是12.7%和10.5%,个别经K irby-Bauer法判定的中介株或耐药株经E-test法M IC证实为敏感或中介株;所有的菌株都对万古霉素的敏感,其中抑菌圈直径≥15 mm的菌株占91.7%。结论用K irby-Bauer法和E-test法检测金黄色葡萄球菌对万古霉素和苯唑西林的敏感性,其药敏结果基本一致,但纸片扩散法结果处折点值附近或万古霉素对菌株的抑菌圈低于超出敏感值下限时,应测量相应抗生素的最低抑菌浓度。     

我院血流感染的细菌分布及耐药性分析

为了解血流感染的分离菌对常用抗菌药物的敏感性和耐药性。收集酒泉市第二人民医院2017-2019年的血培养分离菌株,采用自动化仪器法或纸片扩散法(K-B法)进行细菌药物敏感性试验,按照美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)2017年版标准判断结果,使用WHONET5.6软件进行数据统计分析。共分离细菌280株,其中革兰阳性菌80株,占28.6%,革兰阴性菌200株,占71.4%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株的(MRSA和MRCNS)检出率分别为13.0%和78.6%,未发现万古霉、素替考拉宁及利奈唑胺耐药菌株。肠杆菌科细菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、阿米卡星的耐药率较低,未发现亚胺培南、美罗培南耐药菌株。酒泉市血流感染的分离菌以革兰阴性菌为主,耐药趋势不容忽视,应加强抗菌药物合理应用及院内感染防控措施,微生物实验室应加强细菌耐药监测工作,及时向临床通报检验结果。     

多重耐药UPEC细菌毒力基因分布特征及进化分型分析

本研究对临床尿路感染病例病原菌耐药情况、毒力基因分布及其进化分型特征,以期为耐药性尿路感染病原防控提供参考。通过对收集的尿样进行细菌分离培养,结合革兰氏染色镜检、16S rDNA对细菌进行鉴定,利用K-B纸片扩散法对细菌进行药敏试验,并通过PCR扩增进行毒力基因及系统发育和进化分型分析。本研究成功检测出20株尿路致病性大肠杆菌（Uropathogenic Escherichia coli, UPEC）,药敏试验显示多数菌株具有多重耐药特征,该批UPEC对青霉素、红霉素、万古霉素耐药率达100%;对羧苄西林、氨苄西林、阿奇霉素耐药率达90%以上;对四环素、诺氟沙星、链霉素、耐药率达80%以上;对环丙沙星、 庆大霉素、卡那霉素、氟氧沙星、头孢曲松耐药率达70%以上;对头孢噻肟、呋喃妥因、氯霉素耐药率在35%以上;对阿莫西林与多粘菌素B耐药率低,分别仅为10%与5%。六个毒力基因（iutA、fimH、hly、fyuA、tsh、traT）检出率分别为85%、95%、85%、75%、25%、10%。其系统发育分型中,归属B2群的细菌最多,占比40%（n=8）;D群次之,占比35%(n=7);其次为A群,占比25%（n=5）;未检测到B1群菌株。通过MLST分型分析,20株大肠杆菌涉及10个ST型,其中ST131、ST648、ST744、ST1193型别较多。CRISPR序列扩增结果显示其中6株细菌含有CRISPR序列,提示不同菌株的进化差异。本研究通过对临床多重耐药UPEC进行毒力和分型特征分析,为临床有效防控耐药菌导致的尿路感染提供重要依据。     

齐墩果酸衍生物的合成与表征及其抑菌活性的研究

齐墩果酸属于五环三萜类化合物,在自然界中分布广泛,并显示出多种生物活性,如:保肝、抗炎、抗病毒、抗癌等多种药理作用,并具有良好的抑菌活性.因此本文以齐墩果酸为先导化合物,对其结构进行了修饰,合成4个中间体和6个新的目标产物,并经过IR、1 H NMR波谱测试技术对其结构进行了表征.并以其对培养于MHB(高铁血红蛋白)的S.a(金黄色葡萄球菌)4220、S.a(金黄色葡萄球菌)209、MRSA(抗甲氧西林金黄色葡萄球菌)3167、MRSA(抗甲氧西林金黄色葡萄球菌)3506、QRSA(抗喹诺酮金黄色葡萄球菌)3505、QRSA(抗喹诺酮金黄色葡萄球菌)3519和培养于BHI中的E.coli(大肠杆菌)1682、E.coli(大肠杆菌)1356等8种菌种进行抑菌活性测试,结果表明,部分化合物的抑菌活性较标准抗菌药物有明显提高.     

生姜拮抗性内生细菌的筛选

从乐山市售生姜根状茎中分离纯化内生细菌,并以金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli（E.coli））、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA）为靶标菌进行抑菌试验。研究结果表明：生姜中存在大量的内生细菌,分离获得的9个菌株对四种靶标菌都有不同程度的抑菌作用,2个菌株（SJ1 and SJ9）抑菌效果非常显著,相对抑菌率超过170%。     

紫地榆提取物体外抗菌活性研究

目的:从紫地榆乙酸乙酯部位分离得到不同组分,并对其进行体外抗菌活性研究。方法:通过大孔树脂柱对紫地榆乙酸乙酯部位分离,分别用水和不同浓度的乙醇进行梯度洗脱,不同极性提取物用常量试管稀释法对13株常见病原菌和10株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行抑菌作用研究。结果:水部位提取物对标准菌株无明显抑菌活性;50%乙醇提取物对13株常见病原菌和10株临床分离的MRSA均有不同程度的抑菌作用。结论:紫地榆50%乙醇提取物在体外有不同程度的抑菌活性。