正常鹌鹑血清血糖、甘油三酯、尿酸参考值生化测定

目的观察正常鹌鹑饲养不同时间血清甘油三酯、血糖、尿酸水平变化,为应用鹌鹑作为实验动物进行科学研究提供参考。方法雄性正常成年鹌鹑,按常规方法饲养7~131 d,饲养不同时间检测血清生化指标:血糖测定采用葡萄糖氧化酶终点法/GOD-PAP法;尿酸测定采用尿酸酶-POP法;甘油三酯测定采用终点法/GPO-PAP法。结果正常鹌鹑血清血糖、尿酸、甘油三酯水平最低值依次分别为:(7.09±3.54)mmol/L(、118.4±71.1)μmol/L和(0.79±0.16)mmol/L。最高值分别为:(13.53±1.03)mmol/L(、244.2±96.7)μmol/L和(1.32±0.35)mmol/L。平均值分别为(11.28±2.20)mmol/L(、176.66±70.11)μmol/L和(1.00±0.28)mmol/L。结论本实验检测结果可为正常鹌鹑血清血糖、尿酸、甘油三酯水平变化范围提供一定的参考。     

中国大陆杂色山雀遗传多样性

使用线粒体控制区(529bp)和核基因(9个微卫星位点)作为分子标记对杂色山雀(Parus varius)在中国大陆8个分布地的70个体进行遗传多样性研究.在所有样本线粒体控制区序列中共识别出10个单倍型,整体核苷酸多样性(Pi)为0.00176;单倍型多样性(Hd)为0.533;平均核苷酸差异数(k)为0.892.在线粒体水平上,杂色山雀中国大陆种群处于线粒体DNA多态性较低的范围内,遗传多样性较低.微卫星数据显示,70个样本在9个微卫星位点上的多态信息含量(PIC)为0.305～0.863,平均多态信息含量为0.755±0.1720;8个分布地样本各自平均等位基因个数(K)在1.4±0.53～9.4±2.46之间,平均期望杂合度(He)在0.444±0.5270～0.808±0.1929之间,平均多态信息含量在0.167±0.1976～0.738±0.1634之间.在核基因水平上,杂色山雀中国大陆种群遗传信息丰富,遗传多样性较高.基于线粒体控制区序列构建的系统进化树显示中国大陆地区杂色山雀指名亚种8个分布地样本混杂在一起;样本间的遗传分化指数Fst为0.0119,基因交流值为3.82.样本中的大部分变异是来自种群内且这种变异达到遗传分化的显著性水平,显示了中国大陆杂色山雀指名亚种8个分布地样本为一个地理种群.错配分布图以及中性检验结果显示中国大陆杂色山雀在过去的发展历程中发生过扩张事件.对于中国大陆地区杂色山雀的保护,应该将其作为一个进化显著单元进行保护.     

东北粗皮蛙线粒体DNA遗传多样性分析

本文通过对东北粗皮蛙29个样本线粒体DNA控制区和细胞色素b基因部分序列分析,探讨其遗传多样性和种群遗传结构。PCR扩增和测序结果,获得587bp的线粒体DNA控制区序列和895bp的细胞色素b基因序列。合并线粒体DNA序列分析,共定义14个单倍型,16个变异位点,单倍型多样性(H)为0.704,核苷酸多样性(π)为0.001,平均核苷酸差异数为1.438,表明东北粗皮蛙遗传多样性较低。分子变异分析(AMOVA)结果表明,种群内变异占全部遗传变异的98.13%,群体间没有遗传分化(FST=0.0187),因此应加强对东北粗皮蛙野生种群的保护。     

新疆扎滚鲁克古代人群的线粒体DNA分析

从15例扎滚鲁克古代人牙齿样本中提取扩增线粒体DNA, 确定其单倍型归属, 并结合相关现代人群进行了系统发育分析和多维尺度分析. 结果表明,扎滚鲁克古代人群与现代中亚人群有较近的母系遗传关系, 是欧亚混合人群. 与以前的新疆古代人群研究相比, 该人群东部欧亚序列的成分明显增多, 这可能与人群所处的地理及历史时代相关.     

二茂铁/β-环糊精/碳纳米管复合修饰电极制备、表征及对尿酸的催化氧化

利用滴涂法制备了二茂铁/β-环糊精/单壁碳纳米管修饰玻碳电极,并对其进行了表征.该修饰电极对尿酸(UA)具有良好的电化学催化特性.采用示差脉冲伏安法(DPV)测得UA的氧化峰电流与其浓度在5.2×10-7-6.0×10-4mol/L范围内成线性关系,回归方程为ipa(μA)=13.19 0.311C(μA),相关系数为0.9973,检测限为5.2×10-7mol/L(信噪比为3).尿酸和抗坏血酸(AA)在修饰电极上于不同的电位被氧化,可用于抗坏血酸存在下选择性测定尿酸.     

聚结晶紫薄膜修饰电极对多巴胺与尿酸的电催化作用

利用循环伏安法制备了聚结晶紫薄膜修饰电极(PCVE),详细研究了该修饰电极对生物分子多巴胺(DA)和尿酸(UA)的电催化作用.结果表明,PCVE对DA和UA具有较强的电催化作用,并且对抗坏血酸(AA)具有较强的抗干扰作用,允许高达1 000倍以上AA存在而不干扰痕量DA的测定.将PCVE结合差分脉冲伏安(DPV)技术,对DA的检测线性范围为4.0×10-7 mol/L~2.5×10-5 mol/L,检测限可达3.5×10-8 mol/L;对UA的检测线性范围为5.0×10-7 mol/L~5.0×10-5 mol/L,检测限达5.0×10-8 mol/L.利用该法可以对DA和UA进行同时测定,将该法用于尿液中尿酸的测定,取得满意结果.     

鲇细胞色素b基因序列分析

对4个种群的鲇（Silurus asotus）的线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）细胞色素b（cytochrome b,Cytb）基因片段的500bp序列进行测定,经Clustal X同源排序后得400bp序列．结果表明：鲇种群内碱基的变异较低,雅砻江和涣阳河种群均为0,岷江种群为0．25％,乌江种群为1．25％．雅砻江和澳阳河种群只有1种单倍型,岷江和乌江种群有2种单倍型但单倍型间变异位点很少．雅砻江和涣阳河种群内无变异位点,岷江种群仅有1个变异位点,乌江种群有5个变异位点．结论：细胞色素b基因在鲇种群内是比较保守的,种群间的变异较大．     

硫辛酸对甲醛致人HepG2细胞DNA损伤的保护作用

为探讨硫辛酸对甲醛诱发人HepG2细胞DNA损伤的保护作用,体外培养的HepG2细胞经甲醛(0.25,2.5,25μmol/L)单独处理或甲醛与硫辛酸((5+20),(5+40)μmol/L)同时处理2 h后,分别运用彗星试验(comet assay)结合彗星图像分析软件(CASP)分析细胞尾部DNA百分率(tail DNA%)变化.结果显示:不同浓度甲醛处理后HepG2细胞尾部DNA百分率以浓度依赖性方式显著升高(P0.01);但甲醛与硫辛酸同时处理后HepG2细胞尾部DNA百分率明显降低并与硫辛酸浓度呈依赖关系,与甲醛单独处理组(5μmol/L)相比差异显著(P0.05或P0.01).此结果说明硫辛酸对甲醛诱发的人HepG2细胞DNA损伤有保护作用.     

基于线粒体D-loop DNA序列的瓯江口鳗鲡幼苗遗传鉴定

浙江瓯江口及邻近水域是东海诸多经济鱼类的重要栖息地。本研究对采自瓯江口6个地点,34尾玻璃鳗样本进行遗传鉴定。通过对线粒体D-loop 800 bp DNA序列分析,共检测得到34个不同单倍型,这些单倍型与GenBank中的日本鳗鲡D-loop序列相似度最高(99%),说明这些鳗鲡为日本鳗鲡。瓯江口鳗鲡群体的单倍型多态性(Hd)为1.0±0.007,核苷酸多态性(π)为0.011±0.000 8,说明该群体的遗传变异水平较高。各采样点之间没有显著的遗传差异(FST=-0.028)。根据Tajima’s D中性检验(D=-1.982 96,P0.01)和核苷酸错配分布结果,推测这些日本鳗鲡可能在近期发生过种群爆发性扩张。     

河南董寨国家级自然保护区赤腹鹰种群遗传多样性的研究

遗传多样性是评判物种能否长期生存的依据之一,与物种的适应能力、生存能力和进化潜力密切相关.为了了解河南董寨保护区赤腹鹰种群的遗传多样性水平,对该种群48个样本线粒体DNA控制区429bp序列进行了对比分析.结果显示:T、C、A、G的平均含量分别为27.0%、17.5%、32.1%、23.4%,其中A含量最高,C含量最低,A+T含量(59.1%)明显高于C+G(40.9%);共发现变异位点8个,其中单变异位点7个,简约信息位点1个;检测到8个单倍型,平均遗传距离0.005,系统发生树未表现出单倍型之间有明显的遗传分化;种群的单倍型多样性、核苷酸多样性、平均核苷酸差异数分别为(0.620±0.046)SD、(0.001 84±0.001 51)SD、(0.788±0.582)SD,在猛禽中处于中等水平,且明显低于常见鸟类;错配分布及中性检验结果表明该种群符合急速扩张模型,历史上可能发生过一定程度的扩张事件.     

东北粗皮蛙线粒体 DNA 遗传多样性分析

本文通过对东北粗皮蛙29个样本线粒体DNA控制区和细胞色素b基因部分序列分析,探讨其遗传多样性和种群遗传结构。 PCR扩增和测序结果,获得587bp的线粒体DNA控制区序列和895bp的细胞色素b基因序列。合并线粒体DNA序列分析,共定义14个单倍型,16个变异位点,单倍型多样性（H）为0．704,核苷酸多样性（π）为0．001,平均核苷酸差异数为1．438,表明东北粗皮蛙遗传多样性较低。分子变异分析（AMOVA）结果表明,种群内变异占全部遗传变异的98．13％,群体间没有遗传分化（FST ＝0．0187）,因此应加强对东北粗皮蛙野生种群的保护。     

陕西秦巴山区中华蜜蜂线粒体DNA的遗传多样性

为研究陕西秦巴山区中华蜜蜂遗传多样性,对陕西秦巴山区20个地理种群的200群中华蜜蜂线粒体DNA tRNAleu~COⅡ基因片段进行测序分析。结果显示:线粒体DNA基因片段长度为349bp,其中包括90bp非编码区和259bp的COⅡ部分序列,A+T含量大于85%,表现出A+T偏倚性;共检测到25个变异位点和29种单倍型,单倍型多样度为0.680±0.037,核苷酸多样度为0.002 94±0.000 25;聚类分析发现陕西秦巴山区中华蜜蜂各地理种群间未发生明显遗传分化,与北京、吉林、甘肃等地及日本东方蜜蜂亲缘关系也较近,而与印度东方蜜蜂亲缘关系较远。     

从线粒体DNA控制区基因探讨红腹锦鸡和白腹锦鸡的分类关系

用聚合链式反应(PCR)和直接测序的方法测定红腹锦鸡(Chrysolophus pictus)和白腹锦鸡(C.amherstiae)各5个样本线粒体DNA控制区的468 bp的序列,共发现26个变异位点.红腹锦鸡的序列变异率为0.90%,白腹锦鸡的序列变异率是0.17%,两者差异极显著.红腹锦鸡和白腹锦鸡的3种碱基(A,T,C)含量差异显著.根据Kumar双参数法计算两种锦鸡的遗传距离为0.035±0.008,按线粒体DNA控制区的进化速率2%/Myr计算,它们的分歧进化的时间大约是(1.75±0.40)Myr,结果支持它们是两个独立的种.红腹锦鸡和白腹锦鸡可能分别起源于秦岭以南地区和横断山脉.     

1286例健康体检者血清同型半胱氨酸水平分析——以兰州某高校医院健康体检人群为例

目的:检测分析1286例高校教职工健康体检者血清同型半胱氨酸(Hcy)水平及高同型半胱氨酸血症(HHcy)检出情况.方法:用酶法检测1286例健康体检者血清Hcy水平,分析不同性别、年龄段血清Hcy水平和HHcy检出率.结果:检测人群血清Hcy总水平为7.74(6.38,9.52)μmol/L,其中男性为9.03(7.69,10.85)μmol/L,女性为6.84(5.79,8.19)μmol/L,男性Hcy水平明显高于女性,随着年龄的增加,血清Hcy水平呈上升趋势.检测人群血清HHcy总的检出率为5.8%,其中男性为10.6%,女性为2.2%,男性HHcy检出率明显高于女性,随着年龄的增加,血清HHcy检出率先下降,之后升高.结论:高校教职工血清Hcy水平以及HHcy检出率存在性别、年龄的差异,对HHcy检出率高的人群应采取相应措施,尽早进行干预,以降低心脑血管疾病发生的风险.     

聚苯乙烯磺酸钠/单壁碳纳米管复合膜修饰电极对体系中抗坏血酸、尿酸、多巴胺的的电分离研究

制备了聚苯乙烯磺酸钠(PSS)/单壁碳纳米管(SWNTs)膜修饰玻碳电极,在磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,研究了抗坏血酸(AA)、尿酸(UA)、多巴胺(DA)在该修饰电极上的电化学行为.结果表明:AA、UA、DA在该修饰电极上的氧化信号能得到明显地区分,峰电位差值DA-AA为158mV,DA-UA为118 mV,AA-UA为276 mV.利用示差脉冲伏安法对体系中抗坏血酸(AA)、尿酸(UA)、多巴胺(DA)可以同时进行检测.其线性响应范围分别为1.0×10-3-1.0×10-4mol/L(AA);7.4×10-7-7.0×10-6mol/L(DA);1.0×10-6-1.0×10-5mol/L(UA).该方法用于针剂中多巴胺的检测,回收率在102.0-106.0%之间.     

神经鞘磷脂合成酶2与阿霉素致乳腺癌细胞线粒体损伤的相关性

目的:探讨神经鞘磷脂合成酶2(SMS2)的表达与阿霉素(ADR)致乳腺癌细胞线粒体损伤的相关性.方法:采用过表达慢病毒感染法构建并筛选SMS2过表达的乳腺癌MCF-7细胞.CCK-8实验检测细胞对ADR的IC50值,选择适当浓度的ADR药物作用条件处理细胞后,使用MitoSOX试剂染色检测线粒体ROS水平,检测细胞内ATP水平以评估线粒体功能;电镜观察线粒体超微结构的异同;Western blot检测线粒体细胞色素C的释放水平和细胞凋亡相关蛋白Cleaved-PARP、Cleaved-Caspase 3、Bcl-2、Bax表达水平.结果:SMS2过表达的MCF-7细胞对ADR的IC50值为(2.42±0.073)μmol/L,而对照组细胞IC50值为(0.62±0.036)μmol/L(P<0.01).2μmol/L ADR处理细胞24 h后,SMS2过表达的MCF-7细胞内线粒体ROS水平降低(P<0.05);细胞内ATP水平增加(P<0.05);电镜观察示线粒体结构性损伤减轻;线粒体细胞色素C的释放水平降低(P<0.05);抗凋亡蛋白Bcl-2表达增加,促凋亡蛋白Cleaved-PARP、Cleaved-Caspase 3、Bax的表达减少(P<0.05).结论:SMS2过表达可能通过减轻ADR对乳腺癌MCF-7细胞线粒体的损伤作用,进而抑制细胞凋亡.     

血尿酸水平与慢性心力衰竭患者预后的临床观察

目的观察慢性心衰患者血尿酸浓度，为临床判断慢性心衰疗效及预后提供帮助。方法（1）检测70例心功能Ⅰ～Ⅱ级，50例心功能Ⅲ级，73例心功能Ⅳ级患者血尿酸浓度，对其比较；（2）对193例心功能Ⅰ-Ⅳ级病因分别为冠心病、扩张性心肌病、高血压心脏病、风心病组患者观测其预后；（3）对例慢性心力衰竭患者治疗前后血尿酸浓度比较。结果（1）心功能Ⅰ～Ⅱ级组血尿酸浓度（209±29）μmol／L,HI级组血尿酸浓度（448．05±54）μmol／L，Ⅳ级组血尿酸浓度（526．11±102．8）μmol／l，心功能Ⅰ-Ⅱ级组分别与Ⅲ级组、Ⅳ级组间比较差异有统计学意义（P〈O．05），Ⅲ级组与Ⅳ级组间差异有统计学意义（P〈0．05）；（2）心功能Ⅰ-Ⅱ级组治疗前（209±29）μmol／L，治疗后（178±36）μmol／L，差异无统计学意义（P〉0．05），Ⅲ级组治疗前后分别为（448．05±54）μmol／L、（276±98）μmol／L，Ⅳ级组治疗前后分别为（526．11±102．8）μmol／L、（324±106）μmol／L，Ⅲ级组与Ⅳ级组治疗前后差异有统计学意义（P〈0．05）。结论心衰越严重血尿酸浓度越高，预后越差。心功能改善后血清尿酸浓度明显下降，动态检测血清尿酸浓度是判断心衰的预后的一个有意义的生化指标。     

陶家寨墓地M5号墓主线粒体DNA片段分析

以青海省西宁市陶家寨墓地M5号墓中的14个个体的牙齿样本为研究对象进行线粒体DNA研究.考古学研究表明该墓葬年代为东汉-魏晋时期(距今2000 a左右),并可能为家族墓地.通过对该墓地的14个个体的高可变一区(HVRⅠ),高可变二区(HVRⅡ)测序及扩增片段长度多态性(APLP)分型,共检出8个单倍型,分属于A,B,D,Flc,Z和M,6个单倍型类群.与周边地区的古代人群相比较,实验样本与同一地区距今约4000 a前的喇家古人群在遗传结构上具有一定的连续性.而与现代人群比较发现,实验样本与羌族人群有较近的亲缘关系.     

川渝黔地区山羊起源于A和B两母系遗传谱系

本研究旨在从DNA水平揭示四川、重庆和贵州地区山羊的母系起源和群体遗传特征.通过对川渝黔地区13个山羊品种(类群)共152个体或序列mtDNA D-loop高变区HVI片段(481 bp)变异的分析,结合13个山羊参考序列(分属于A、B、C、D、F和G单倍群)构建系统进化树和单倍型网络分析以及不同单倍群群体扩张分析,结果表明:152只山羊mtDNA DloopHVI序列被类聚为A和B两个单倍群,其中单倍群B又分化为B1和B2两亚单倍群.从2种单倍群的地理分布特征可以发现,北川白山羊和阿坝藏山羊全部属于单倍群A,而其他山羊品种中单倍群A和B具有不同的分布频率.归并于A和B两个谱系的山羊并没有历经种群扩张.结果提示,川渝黔地区山羊可能起源于A和B两母系遗传谱系,而谱系B虽然分化为B1和B2两支系,但均未历经种群扩张.     

Nafion/DNA/纳米铂复合膜修饰电极的制备及其应用于多巴胺的高灵敏高选择性测定

纳米铂粒子(PtNPs)具有良好的生物相容性及高的催化性能,利用恒电位法将DNA生物分子电沉积在PtNPs修饰电极表面,得到一纳米结构的导电薄膜,极大地增大了电极的比表面积,结合Nafion的高选择性,制备了一种新型的Nafion/DNA/PtNPs复合膜修饰电极,研究了多巴胺(DA)在该修饰电极上的电化学行为,利用示差脉冲伏安法(DPV)对DA进行了定量分析.结果证明,该复合膜修饰电极大大提高了DA的电化学响应,在0.1 mol/L pH 7.0磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,DA的示差脉冲伏安峰电流与其浓度在0.01～0.1μmol/L和0.1～6.0μmol/L两个范围内呈良好的线性关系,检出限可达3.3 nmol/L.此外,该修饰电极可以经受较高浓度抗坏血酸(AA)和尿酸(UA)的干扰,用于盐酸多巴胺注射液中DA含量的测定,结果满意.