玉米抗大斑病菌单基因系的建立及其在Exserohilum turcicum生理小种鉴定中的应用

利用美国A632,B37,B73,B68,C103,Va26等30个Ht单基因鉴别寄主, 按美国伊利诺伊大学的大田接种方案与鉴定方法, 建立了适合中国的监测玉米
大斑病菌生理小种鉴定的21个Ht单基因系. 从吉林省15个地区的不同玉米品种中采集玉米大斑病样本, 采用单孢分离获得了32个玉米大斑病菌菌株, 利用已建立的上述21个Ht单基因鉴别寄主, 通过美国的大田鉴定方案进行生理小种鉴定. 结果表明, 这32个菌株均为0号小种, 并未出现生理小种分化现象.     

不同培养基对玉米小斑病菌生长繁殖及致病力的影响

采用燕麦、玉米、彼查、PDA及PDA＋宿主叶片、PDA＋VB1 7种固体培养基培养玉米小斑病菌C小种。结果表明，PDA＋VB1和PDA培养基表面加宿主叶片2种培养基培养的菌株，无论是菌丝生长速度、产孢量还是致病力均显著高于其他培养基，可用这2种培养基复壮、保存玉米小斑病菌C小种。     

云南省玉米小斑病菌生理小种的初步鉴定

从云南省13个地区42个县(市)采集玉米小斑病样本,分离出113个单孢菌株,并在中国鉴别品种上开展了生理小种鉴定.结果表明,玉米小斑病菌生理小种O,C,S和T小种在云南省均有分布,O小种是优势小种,且O小种菌株具有不同致病力,中等致病力菌株和弱致病力菌株频率明显高于强致病力菌株.此外,生理小种类型在不同海拔上分布存在差异,S小种多分布于高海拔地区.     

玉米mtDNA的RAPD分析与对YⅡ-1型不育胞质的归群研究

选用５１个随机引物对玉米Ｕ８１１２的５种不同类群胞质的同核异质系的线粒体ＤＮＡ进行扩增。结果表明：各类型胞质的ｍｔＤＮＡ间的随机扩增产物有较大的差异。玉米ＹⅡ－１型不育胞质的ｍｔＤＮＡ扩增的电泳谱带了与Ｔ群、Ｓ群不育胞质有明显的差异，与Ｃ群不育胞质之间也存在着一定的差异。     

高效液相色谱对玉米大斑病菌毒素的分离与制备

建立了以高效液相色谱分离制备玉米大斑病菌2号小种毒素的方法,研究了以Nova-PakC18分析柱、制备柱对检测波长、流动相、pH值对分离和制备的影响.结果表明5-羟甲基-2-呋喃甲醛的检测限为0.017 mg/L,其他组分的相对偏差为0.09%～1.9%.在0.005～0.10 g/L范围内,标准毒素的线性回归良好,相关系数和回收率分别为0.971 3和98.2%.该方法快速、准确且重现性好,适于毒素的分离制备.     

黑河地区大豆灰斑病菌生理小种消长变化的研究

利用张立娟等建立的两套灰斑病鉴定体系,对采自黑河地区的不同品种15份病菌标样进行了病菌生理小种变化监测。结果表明黑河地区灰斑病生理小种数目和频率有较大变化。在逊克、北安等地发现新的生理小种,为了解黑河地区灰斑病菌生理小种结构变化提供了可靠依据。     

重庆温光型小麦雄性核不育系C49s小孢子发生和发育的细胞学研究

作者对重庆温光型小麦雄性核不育系“C4 9s”、普通小麦“6 9”及不育系“C4 9s 87”与普通小麦“94 6 4”的杂种F1代雄性器官进行切片观察 ,发现其雄配子发育从花粉母细胞减数分裂间期到二分孢子时期绒毡层差异不大 .在减数分裂前期Ⅱ到中期Ⅱ ,不育系绒毡层细胞部分呈双核、三核增大细胞 ,部分出现核解体 ,而普通小麦“6 9”与“C4 9s 87/94 6 4”的杂种F1代中没有出现该现象 .不育系绒毡层细胞比可育系迟解体 .从单核早期开始 ,不育系小孢子发育不正常 ,表现为小孢子收缩变形 ,无核或有核细胞质稀薄 ,细胞核不能定向移动到萌发孔的对侧 .“C4 9s”败育的原因可能与绒毡层发育及液泡的动态性有关 .败育的高峰为单核期 .     

小麦不同细胞质雄性不育系过氧化物酶同工酶的比较研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳,对小麦几种细胞质雄性不育系及同核保持系的萌动胚、单核早期花药、二核——三核期花药的过氧化物酶同工酶酶谱进行分析,结果表明:不育系与保持系之间的酶谱差异以萌动胚最小,二核——三核期花药最大,同时,不同细胞质类型及同一细胞质类型的不育系间,酶谱也存在一定差异.     

α-微管蛋白与玉米细胞质雄性不育的相关性研究

采用两个核背景（Mo17,77)的同核异质、同质异核细胞质雄性不育系及正常品系为材料，以合成的α-微管蛋白基因片段为探针，对玉米细胞质雄性不系转育前后的mRNA进行Northern杂交分析，首次直接从转录水平上了玉米细胞质雄性不育系在败育前后α－微管蛋白基因转录量的差异。结果表明，玉米细胞质雄性不育系α－微管蛋白基因在败育前后的转录量存在着明显的差异，败育前的相对转录量大于败育后的相对转录量，证明了α－微管蛋白基因在花粉发育中起着重要作用，与玉米细胞质雄性不育性密切相关。     

拟南芥叶肉细胞原生质体分离及影响因素

通过对拟南芥(Arabidopsis thaliana)叶肉细胞原生质体分离条件的研究,探讨了酶解法制备拟南芥叶肉细胞原生质体的分离条件和影响因素.在不同纤维素酶质量浓度、山梨醇质量浓度、酶解液pH值、酶解时间下,测定了拟南芥叶肉细胞原生质体的产量.结果表明,在20 g/L纤维素酶、140 g/L山梨醇、pH=5.8的酶解液中,酶解时间为1.5 h,原生质体产量最高.同时,在相同分离条件下测定了拟南芥幼叶和老叶的原生质体产量,结果表明,幼叶原生质体产量显著高于老叶.     

真菌纤维二糖水解酶基因的克隆与表达研究

采用能够转化细菌和真菌的双功能质粒ｐＤＬ１，与部分酶切的糙皮侧耳（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｏｓｔｒｅａｔｕｓ）基因组ＤＮＡ片段进行体外重组。再用重组质粒ＤＮＡ转化玉米黑粉菌（Ｕｓｔｉｌａｇｏ，ｍａｙｄｉｓ）的原生质体，在平皿上筛选抗新霉素的转化子，转化率达８００转化子／μｇＤＮＡ，由此在玉米黑粉菌中建立了糙皮侧耳的基因文库。随机选出１５个转化子提取其ＤＮＡ，以３２Ｐ标记的ｎｅｕｒ基因酶切片段作为探针进行打点杂交，全部显示阳性，证明抗性菌落不是来源于敏感细胞的回复突变。以李氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）的纤维二糖水解酶（Ｃｅｌｌｏｂｉｏｈｙｄｒａｓｅｓ，简称ＣＢＨ）ＣＢＨⅡ基因末端片段为探针，从阳性克隆菌株中提取ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移并杂交，结果证明本研究已成功地克隆了糙皮侧耳纤维二糖水解酶ＣＢＨⅡ基因。基因的表达检测证明，克隆菌株具有纤维二糖水解酶活力。     

The pathogenic site of the C-toxin derived from Bipolaris maydis race C in maize(Zea mays)

Bipolaris maydis race C strain 523 (C523) induces severer leaf blight on cytoplasmic male sterility (CMS)-C maize than on normal (N) maize. Previously, a pathotoxin isolated from C523 (C-toxin) was shown to be responsible for the disease. To understand the basis of the differential responses between CMS-C and N maizes to this fungus, protein synthesisin vitro by mitochondria from N and CMS-C cytoplasms was monitored after their incubation in a solution containing the toxin (0.3%). Similar protein products were detected between the two alloplasmic lines, indicating that the toxin does not directly act on the mitochondrial membrane, nor inhibits the expression of mitochondrial genes. To further locate the action site of the toxin, intact leaves from both N and several subtypes of CMS-C lines were treated by 0.3% toxin. Analysis of electrolyte leakage of leaf cells showed that the leakage rates were similar to one another among the alloplasmic maize lines. In contrast, at a lower concentration of the toxin (0.05%), the leaf cells from CMS-C line were more susceptible to the toxin than those of the other lines. All these results indicate that the target of the toxin action appears to be the cellular-membrane rather than mitochondria, suggesting that the variable susceptibilities toB. maydis between the alloplasmic maize lines might be related to a difference in their cellular-membranes.     

化学农药对玉米中后期几种病虫害的田间防治效果

在玉米抽雄期喷施化学农药防治玉米生长中后期的几种病虫害,结果表明,40%氯虫·噻虫嗪WG 225 g/hm2剂量对玉米螟虫和蚜虫均有较高的防治效果,田间防效分别为81.08%和89.91%,小区产量比对照增加20.8%.10%吡虫啉WP 450 g/hm2剂量对蚜虫的防效为63.64%,对玉米螟虫效果较差.12.5%烯唑醇WP 450 g/hm2剂量对玉米锈病的防效为76.60%.30%苯甲·丙环唑对小斑病和弯孢霉叶斑病的防效分别为62.04%和51.72%.氯虫·噻虫嗪与烯唑醇混合喷施对中后期的玉米螟虫、蚜虫和锈病具有较好的控制作用.     

玉米大斑病菌HT-毒素特异性组分与原生质膜蛋白互作研究

以玉米叶片原生质为研究对象,以ANS(1-苯胺基-8-萘磺酸)作荧光探剂,用荧光标记法研究了毒素与质膜蛋白的互作.在被ANS标记后的原生质悬浮液中加入不同浓度HT-毒素后,ANS荧光强度明显增加,呈现出了剂量—效应关系,表明HT-毒素与质膜上ANS某些受体发生了互作.本实验采用2种试剂,从2个角度表明了ANS受体和质膜上存在的毒素受体具有蛋白特性.初步推测HT-毒素特异性组分的原初作用位点在质膜外侧.     

玉米须不同发育时期物质含量变化研究

以玉米须为原料,研究了玉米须的不同发育时期、不同温度逆境下、不同浓度浸液中抗逆物质、抗氧化物质、营养物质的变化规律,结果表明：嫩玉米须SOD活性最强,老玉米须黄酮、总糖、脯氨酸含量最高;低温嫩须维生素C含量最高,高温熟须蛋白质、糖类含量高;玉米须水浸液SOD活性以0．5g／100mL浓度时、黄酮以3．5g／100mL浓度时为最佳。     

新疆块根芍药内生细菌XJU-PA-4的鉴定及特性分析

采用琼脂扩散法检测了从新疆块根芍药（Paeonia anomala）中分离获得的内生菌XJU-PA-4对植物及动物病原菌的抑菌作用,并对其进行鉴定及特性分析。实验结果表明：（1）XJU-PA-4对玉米小班病菌和金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性,抑菌圈直径分别达到25mm及18mm。（2）XJU-PA-4的16S rDNA序列与Bacillus subtilis strain WL-6的同源性为99％,G＋Cmol％含量为53．5％。结合形态学观察及生理生化特性,最终将XJU-PA-4鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,在GenBank数据库的注册号为EU714296。     

Primary observations of the existence of Fas-like cytoplasmic death factor in plant cells

The main activity of Fas is to trigger cytoplasm death program in animal cells. In G2 pea, vacuole plays a pivotal role in inducing cell death in the cytoplasm of longday (LD) grown apical meristem cells. Expression patterns of the Fas in G2 pea cells revealed that the Fas is mainly localized in the vacuole of cells undergoing programmed cell death (PCD). The Fas expression is corresponding to the initiation of menadione-induced PCD in tobacco protoplasts.The results suggest the existence of the Fas-like mediated cytoplasmic death pathway in plant cells.``     

灰霉菌毒素对草莓愈伤组织细胞超微结构的影响

灰霉菌毒素严重地损伤了草莓愈伤组织细胞的结构。主要表现为线粒体明显膨胀,内嵴减少;内质网槽库膨大形成若干潴泡;核糖体密度下降;细胞质减少;继而核仁固缩,染色质凝聚。胞饮液泡可能是灰霉菌毒素进入细胞的途径。