苦荞胰蛋白酶抑制剂提取方法的研究

分别用磷酸缓冲液、０．２ｍｏｌ／Ｌ硫酸、０．４ｍｏｌ／Ｌ三氯乙酸以及水提法从苦荞种子中提取胰蛋白酶抑制剂,对四种提取方法所得产物的抑制活性及柱层析纯化结果比较表明：以磷酸缓冲溶液为提取介质,经热变性、盐析及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析分离后苦荞胰蛋白酶抑制剂的活性和得率较高,是较为理想的提取方法。     

苦荞部分营养成分分析及评价

经测定苦荞蛋白质含量为１０．１８％，必需氨基酸含量为４１３．７％ｍｇ／ｇｐｒｏｔｅｉｎ。其限制性氨基酸仅为苏氨酸一种，苦荞蛋白质的氨基酸评分为８８．５分。苦荞矿物质元素含量丰富，其中铁为３２．８，锰为１２．５，锌为２１．４，铬为２．５４，钼为１．６６，锗为４．２，铜为４．３，钙为１２７（单位均为ｐｐｍ）．总黄酮含量为１１０ｍｇ／１００ｇ。苦荞具有很高的营养价值，并对中老年人具有多种预防保健功能，是一种急待开发利用的天然营养保健食品资源。     

苦荞对干旱胁迫的应答及外源物质的缓减效应研究

苦荞属于药食两用类作物，适应性广，抗逆性强，表现出耐瘠耐旱的特性。现对苦荞干旱的研究还不够深入，且种植和生产易受干旱胁迫影响。本文阐述近年来对苦荞干旱的研究进展，简述干旱对苦荞生长发育的影响，主要表现在形态、生理、产量等指标，从抗氧化物质、渗透调节等分析其干旱胁迫的生理生化机制以及分子机制，归纳了矿质元素（氮、磷、钾）以及外源激素（褪黑素、烯效唑等）可以缓减苦荞的干旱胁迫，以期为苦荞抗旱性研究和生产应用提供理论基础及参考，对国内外农业中苦荞可持续发展具有重要意义。     

FHIT抑癌基因在头颈部鳞癌中的研究进展(综述)

脆性组氨酸三联体基因(FHIT)是1996年新发现的一种定位于人类染色体3p14．2上的抑癌基因，其编码的蛋白质具有ApnA水解酶的特性，可通过水解ApnA(主要是Ap3A)而阻止细胞生长信号传导途径，从而抑制细胞的生长；另有观点认为FHIT可与Ap3A等结合成FHIT底物复合物，这种复合物可能是一种信号物质，其抑癌作用可能比其水解酶作用更重要。研究表明FHIT在肿瘤的发生中起着重要的作用，现就FHIT在头颈部鳞癌中的研究进展作一综述。     

草鱼胰蛋白酶的分离纯化及性质研究

从草鱼肝胰脏中分离纯化出一种胰蛋白酶．纯化过程包括：硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sephamse离子交换,Sephacryl S-200凝胶过滤和Q-Sepharose离子交换层析．SDS-PAGE显示在分子量约为28．5ku处有单一电泳带,表明该酶已得到高度纯化．以Boc-Leu-Arg-Arg-MCA为底物测得该酶的最适温度为40℃．最适pH值为9．0．丝氨酸蛋白酶抑制剂（Pefabloc SC,PMSF,Benzamidine）对该酶的活力有明显抑制作用．底物特异性实验表明该酶特异性分解精氨酸和赖氨酸残基的C末端,进一步证明纯化蛋白为草鱼胰蛋白酶,其酶学性质与鲤鱼胰蛋白酶相似．     

苦荞降血糖产品的稳定性研究

在单因素试验的基础上,采用正交试验优化苦荞黄酮提取工艺.以黄酮得率为指标,分别考察了料液比、乙醇浓度、超声时间、提取温度等因素对黄酮得率的影响,通过优化试验得到最佳工艺,提取黄酮制备苦荞黄酮胶囊,并对其稳定性进行研究.结果表明,最佳提取条件料液比为1∶8(g∶mL)、体积分数为60%的乙醇、超声时间30 min、提取温度80℃,黄酮得率为2.48%.将实验室湿度控制在67.5%以下,以微晶纤维素、富铬酵母、硬脂酸镁为辅料,体积分数85%的食品级乙醇为溶湿剂制粒,苦荞黄酮胶囊颗粒的休止角为39.39°,表明其流动性很好.制备胶囊,测得其装样量差异性很小.采用保温加速试验方法测胶囊稳定性,胶囊各项指标均在质量规定范围内,表明药物性质比较稳定.     

牛初乳免疫球蛋白体外胰蛋白酶消化研究

采用硫酸铵盐析、DEAE离子交换层析纯化牛初乳免疫球蛋白IgG，并对其进行胰蛋白酶体外消化研究．结果表明：牛IgG比牛血清白蛋白（BsA）抗胰蛋白酶水解．IgG经低温巴氏灭菌处理后，其被胰蛋白酶消化的能力变化不大：经90℃高温3min处理后，被胰蛋白酶水解率大幅度提高，提示IgG的立体结构在保护其完整性方面有重要作用；另外，藏绵羊小肠液对IgG的降解率高于胰蛋白酶．     

苦荞蛋白磷酸酶2C家族的鉴定及表达分析

为了研究苦荞蛋白磷酸酶2C(PP2C)家族的成员和分类,及后续探究其在苦荞生长发育中的功能,本文利用生物信息学方法对苦荞PP2C家族进行鉴定、分类,并对其基因结构、保守基序、分子进化等进行分析.结果表明,苦荞PP2C家族有81个成员,划分为A-K的11个亚族,并且在同亚族中序列特征相似,而不同亚族间序列特征有一定差异;苦荞PP2C家族有14次基因重复事件.此外,qRT-PCR分析结果表明其A亚族基因在苦荞根、茎、叶、花、果中均有表达,除FtPP2C44外的8个基因在苦荞花、果中表达量较高;在苦荞幼苗中,除FtPP2C08外的8个基因均受ABA诱导表达量上调.上述结果揭示了苦荞PP2C家族的成员组成、序列特征、扩增和其A亚族基因的组织表达模式及受ABA诱导表达情况.     

虾蛄蛋白酶法水解条件的研究

本文主要探讨了酶水解虾蛄的具体工艺。通过酶的选择，确定了胰蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶作为水解酶。在此基础上，提出并确定了用混合酶水解虾蛄蛋白的新工艺。     

复合湿热处理对苦荞全粉理化特性及体外消化性的影响

采用湿热处理(HM-T)、湿热复合普鲁兰酶处理(HM-E-T)、湿热复合微波处理(HM-M-T)、湿热复合柠檬酸处理(HM-C-T)4种方法,研究不同湿热处理对苦荞全粉(N-T) 理化特性及消化性的影响。结果表明:经处理后苦荞全粉总膳食纤维和直链淀粉含量显著增加(P>0.05),其中HM-E-T效果最显著,HM-C-T次之;差示热量扫描仪检测结果显示,湿热处理后苦荞全粉黏度均显著降低且相变峰消失;X射线衍射结果表明,HM-T淀粉仍为A型结晶,HM-E-T淀粉由A型淀粉转变为A+B+V的多晶型,而HM-M-T和HM-C-T淀粉失去了原有晶形结构,淀粉相对结晶度从23.0%(N-T)下降至20.9%(HM-T)、18.4%(HM-E-T)、12.6%(HM-M-T)和10.6%(HM-C-T);扫描电子显微镜和激光共聚焦电子显微镜观察结果表明,处理后的苦荞全粉微观结构发生不同程度的变化,蛋白质和淀粉发生一定程度复合。体外消化结果显示,苦荞全粉中抗性淀粉质量分数从9.69%(N-T)分别增加到11.49%(HM-T)、14.12%(HM-E-T)、11.97%(HM-M-T)、13.01%(HM-C-T);预估血糖生成指数(eGI)出现不同程度的降低,即57.85(N-T)>56.03(HM-T)>55.65(HM-M-T)>55.18(HM-C-T)>50.22(HM-E-T),特别是HM-E-T后的苦荞全粉eGI值降低效果最明显。复合湿热处理比湿热处理更能有效降低餐后谷物血糖生成指数(GI)值,其中HM-E-T后的苦荞全粉可作为低GI食品的理想原料。     

木菠萝凝集素的纯化与性质研究

木菠萝种子经抽提、４０－６０％饱和度度硫酸铵沉淀和Ｇａｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和层析，得到纯化的木菠萝凝集素（Ｊａｃａｌｉｎ）。Ｊａｃａｌｉｎ分子量约为５８２００，由分子量分别是１４０００和１５８００的亚基组成，等电聚焦电泳显示多条区带，其ＰＩ为５．７－８．６５，Ｓｃｈｉｆｆ’ｓ试剂染色证明它是一种糖蛋白，Ｎ－末端为精氨酸和甘氨酸。Ｊａｃａｌｉｎ能凝集除山羊、鸡以外的多种动物和人Ａ、Ｂ、Ｏ和Ａ     

Identification of a senescence-related protease in coriander leaves

Senescence-related protease may play an important role in leaf senescence. By improved SDS-Gela-tin-PAGE assay, a 63 ku senescence-related protease (63 SRP) in coriander leaves was identified. Activity of 63 SRP was increased in parallel to the advance of coriander leaf senescence, and inhibited by treating the leaf with gibberellic acid, and enhanced by ethylene treatment. The 63 SRP was suggested to be a serine protease based on the fact that its activity was inhibited by the protease inhibitor PMSF. The optimal temperature for the activity of the 70 ku protease was 50℃. The maximal activity was observed at pH 6-9, some activity could be observed on the gel slices incubated at pH 5 or 11. The 63 SRP was partly purified by the way of ammonium sulfate precipitation and then gel slicing after gel elec-trophoresis.     

多级色谱纯化牛胎盘免疫调节多肽及性质测定

使用DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换色谱、Sephadex G-25 凝胶色谱和Sephasil C18反相高效液相色谱等分离纯化技术,采用体外培养淋巴细胞增殖试验,从牛胎盘提取液中分离出了具有免疫调节活性的多肽。免疫调节多肽对淋巴细胞增殖的促进作用具有剂量依赖性。纯化后的免疫调节多肽经过毛细管电泳(CE)鉴定为单一组分。毛细管等电聚焦电泳(CIEFE)测定多肽的等电点是3.82。基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定多肽的相对分子质量为2134。蛋白质测序仪测定多肽的序列为Tyr-X-Phe-Leu-Gly-Leu-Pro-Gly-X-Thr。     

狗脑抗吗啡镇痛肽“60a”的分离纯化及部分一级结构

本实验室从正常狗脑中又分离获得一个暂称这为“６０ａ”的肽。冻干粉经ＳｅｐｈａｄｅｒＧ－５０和羧甲基纤维素ＣＭ２２柱层析，再经反相高效液相层析纯化得最后样品，经ＳＤＳ电泳和等电聚焦电泳鉴定均为一条带，分子量约８０００，等电点在ｐＨ７．８左右；Ｎ－末端氨基酸为Ｍｅｔ；自Ｎ－末端的部分氨基酸序列为：Ｈ２Ｎ－Ｎｅｔ－Ｌｅｕ－Ｓｅｒ－Ｐｒｏ－Ａｌｓ－Ａｓｐ－Ｌｅｕ－Ｔｈｒ－Ａｓｐ－Ｉｌｅ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ－Ｔ     

苦荞黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

将Wistar大鼠随机分为5组，分别为假手术组（Sham）、缺血再灌注组（I／R）、苦荞黄酮小剂量组、苦荞黄酮大剂量和芦丁组．手术前30min腹腔注射给药，采用线栓法结扎大鼠双侧颈总动脉，制备脑缺血再灌注损伤模型，缺血30min，再灌注90min．然后断头取脑，测定脑匀浆中各种丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮（NO）和超氧化物歧化酶（SOD）．I／R组，脑组织中MDA、LDH、NO较sham组明显增高，而SOD较Sham组降低．苦荞黄酮大小剂量和芦丁均能降低脑组织中MDA、LDH、NO含量，但对SOD活力影响均不明显．结果说明苦养黄酮可能通过抗自由基和减轻NO介导的神经毒性来发挥对脑缺血再灌注损伤的保护作用，为进一步开发和利用苦养奠定了理论基础．     

地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶分离纯化研究

对产白地表茅孢杆菌(B.licheniformis)的碱性蛋白酶通过乙醇沉淀、盐析、DEAE阴离子交换层析,凝胶层析4步纯化.以酶比活力为指标,对碱性蛋白酶分离纯化条件进行了优化.结果发现:提纯酶的比活力达62098U/mg,纯化倍数为23.7,活性回收率为15.7%.     

HPLC法测定黑荞麦中黄酮苷的含量

目的:建立黑荞麦中黄酮苷含量测定方法.方法:微波萃取高效液相色谱法,色谱柱:Shmadzu Shim-pack-vp-ODS(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇(0.02mol/L)-磷酸二氢钾(用磷酸调节PH=3.0)(80:20),流速:1.0 m L/min;进样量:10μL.结果:线性范围为40-280mg/L,加标回收率为99.5%-100.2%,精密度为RSD=0.76%(n=6).结论:该方法不仅节省时间,重现性好,而且精密度高,为黑荞麦中黄酮苷的开发利用和含量的测定分析提供参考依据.     

Purification and relationship with gastric disease of a 130 kDa（CagA） protein of Helicobacter pylorl

Objective:The aims of this research were to purify and identify the 130 kDa(CagA) protein of H.pylori clinical isolate HP97002 and evaluate the relationships between the purified 130 kDa(CagA) pro-tein and gastric diseases.Methods:The procedure for isolating the protein included 6 mol/L guanidine ex-tract,size exclusion chromatography and elusion from gel.Sera of 68 patients with gastric diseases(44 with chronic gastritis,15 with atrophic gastritis,7 with peptic ulcer disease,2 with gastric cancer) were obtained,and the serological response to CagA was studied by Westem-blot using the purified protein,Results;The pu-rified protein was 130 kDa and preserved good antigenicity and revealed basic isoelectric point about of 8.1. Among 68 sera,43 sera could recognize the purified protein associated with chronic agastritis 47.7%(21/44),atrophic gastritis 86.7%(13/15),peptic ulcer disease 100%(7/7),gastric cancer 100%(2/2).Compared with each other,the difference was significant(x^2=13.327,P=0.004),and 130 kDa(CagA) protein was associated with severe gastric diseases(rs=0.442,P=0.001).Conclusion:The 130 kDa(CagA) protein was associated wih severe gastric diseases.     

不同炒制方式及贮藏时间对苦荞茶滋味影响的智舌辨识研究

利用智舌对不同炒制温度、时间以及不同贮藏期的苦荞茶进行品质辨识,采用铂、金、钯、钨、钛和银电极作为工作电极,分别在1,10,100 Hz三个脉冲频率下进行品质检测;并利用主成分分析和线性判别分析对数据进行分析整理.结果表明炒制温度及储藏时间对苦荞茶的滋味品质影响较大,样品之间差异显著.相比之下炒制时间对苦荞茶滋味品质的影响不显著.主成分分析能够区分炒制温度差异较大的苦荞茶,而对于同一炒制温度不同炒制时间的茶样以及不同储期的茶样区分效果不佳.线性判别分析能够有效地区分不同炒制温度和时间制备的12组苦荞茶以及不同储期的7组苦荞茶,其区分指数分别达到99.8%和99.7%.