青海省牛传染性鼻气管炎血清学调查

从青海省互助、玛多、海晏、玉树、贵德、德令哈、共和等14个地区采集420份牛血清样品,应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)调查了青海省牛传染性鼻气管炎病毒的感染情况。结果在420份被检牛血清样品中,共检出阳性血清样品200份,平均阳性率为47.62%(200/420)。     

禽流感病毒三种检测方法的比较研究

对分别应用病毒分离鉴定、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光(IFA)3种方法对病料组织中的禽流感病毒(AIV) 进行检测与比较研究。结果显示:经鸡胚尿囊腔接种分离到的病毒,通过用禽流感病毒H5、H9亚型单克隆抗体所进行的血凝(HA)和血凝抑制试验(HI),鉴定为AIV H5亚型毒株;应用RT-PCR技术直接对病料组织抽提的RNA样品进行检测,从病料组织能扩增出大小为229bp的AIV通用目的片段和大小为380bp的H5亚型特异性片段;取病料组织的过滤液接种狗肾上皮细胞(MDCK)单层,24h后用H5亚型AIV特异性的单克隆抗体进行间接免疫荧光试验,结果在细胞核、细胞质内观察到特异性的荧光。研究的结果表明,3种技术都可对病料样品中的AIV进行检测,而RT-PCR和IFA两种方法还可直接对病料样品中的病毒进行亚型的鉴定。相对而言,后两者具有更快速、更敏感、操作更简便的特点。     

山鸡感染禽流感H9亚型病毒的分离鉴定

禽流感H9亚型病毒(AIVH9)为低致病性病毒,毒力相对较弱,若无并发症,死亡率不高,主要出现呼吸道症状。2005年6月某珍禽养殖场饲养珍禽山鸡突然发病,通过发病情况调查、观察临床症状、病理变化,同时采取发病鸡的血液分离血清测定AIH5、AIH9和ND的抗体;采集病鸡内脏接种鸡胚尿囊腔分离到一株病毒,该分离株具有血凝活性,经鉴定为AIVH9亚型,表明禽流感不仅危及家禽,一些珍禽也有自然感染AIV的潜在性。     

猪肝脏中盐酸克伦特罗残留量的检测

从某农贸市场随机抽取30份猪肝脏，采用酶联免疫吸附法（ELISA）对猪肝脏中盐酸克伦特罗残留进行了检测，以1ng／g为标准划定阳性检出率，检测结果阳性检出率为6．7％，表明在该地区仍有超量使用盐酸克伦特罗的现象。ELISA法简便快速，适于在基层推广使用。     

感染新疆番茄的一种杆状病毒的鉴定

从新疆感病毒番茄分离到一株属于类草花叶病毒组的病毒，感病番茄显示生长阻滞，叶片皱缩花叶畸形以及坏死等系统侵染症状；该病毒可经汁液传播侵染属于１０科的１８种草本植物，但不能经桃蚜传播，感病组织粗汁液和提纯病毒制备物在ＳＤＳ双向免疫扩散试验和酶联免疫吸附试验中与烟草花叶病毒ＵＩ株系抗血肖发生强烈的免疫反应，该病毒的病毒粒子为长２９０ｎｍ，宽２０ｎｍ的直杆状病毒粒子，其体外存活期在粗汁液中２个月，在干组     

仔猪腹泻病原的分离与鉴定

针对承德某猪场发生的仔猪腹泻,为了鉴定病原,无菌采集死亡仔猪的肺脏、肝脏、心血、淋巴结等病料组织,通过胶体金试纸条检测、PCR鉴定、细菌学鉴定、致病性试验等方法进行病毒及细菌鉴定。结果显示,圆环病毒2型检测为阳性,沙门菌对小白鼠具有很强的致病性。本例仔猪腹泻病原为圆环病毒2型和沙门菌混合感染。     

用酶联免疫吸附试验诊断蓝氏贾第鞭毛虫病免疫价值的研究

用蓝氏贾第鞭毛虫纯培养虫株和超声粉碎可溶性虫体部分作为抗原,采用ELISA方法检测人体感染蓝氏贾第鞭毛虫血清免疫抗体并讨论其寄生虫学诊断价值．检测65份成人贾第虫病血清,其中55份IgG和／或IgA阳性,阳性率84．62％．20份10岁以下儿童贾第虫病人血清无1份阳性．结果提示蓝氏贾第鞭毛虫感染产生的体液免疫反应存在有年龄依赖性,酶联免疫吸附试验用于蓝氏贾第鞭毛虫病免疫诊断具有局限性．     

新疆普氏野马鼻肺炎病毒的分离鉴定

从新疆昌吉州吉木萨尔野马饲养繁殖中心送检的野马病料中分离到一株病毒,并对其进行了全面鉴定．该病毒株在ＢＨＫ－２１细胞上连传６代出现典型细胞病变,用适应ＢＨＫ－２１细胞的病毒接种鸡胚成纤维细胞、乳豚鼠肾原代细胞、豚鼠睾丸细胞均出现程度不同的细胞病变．在电镜下可见到典型的马鼻肺炎病毒粒子（疱疹病毒样颗粒）．病毒对５－碘脱氧尿核苷、氯仿、乙醚等敏感．在ｐＨ３下失活,５６℃３０ｍｉｎ灭活．病毒能被马鼻肺炎病毒标准阳性血清所中和．病毒接种乳豚鼠出现典型致死性肝炎．结果表明所分离病毒为马鼻肺炎病毒,并将该毒株定名为ＰＨ９３－１株     

鸡传染性法氏囊病毒LS株的分离与鉴定

用SPF鸡胚,从江苏溧水某鸡场病死鸡的法氏囊组织中分离到一株病毒,接种健康非免疫鸡,能致鸡3～5 d内全部发病,死亡率达55%以上,腿肌和腺胃出血,肝和肾肿大出血,脾脏出血,法氏囊肿大出血;该病毒不能凝集鸡红细胞,可以与IBDV阳性血清产生沉淀;应用RT-PCR进行检测,扩增IBDV VP2基因,并与GenBank中的已知序列进行比较.结果表明,所分离的病毒为IBDV毒株.     

鸡副粘病毒病的病毒特性和基因型研究及疫病防制

用ＳＰＦ鸡胚分别从不同患病鸡群中分离到４株病毒,经病毒学鉴定,该病毒为禽副粘病毒Ｉ型。根据在疫毒力的国际判定标准测定,４株病毒均属于新城商年;人工感染７１周龄ＳＰＦ鸡均１００％发病致死;应用１株鹅副粘病毒制备的具有对禽副粘病毒Ｉ型共同的群特异性单抗各仅对鹅副粘病毒毒株、鸡副粘病毒毒株呈阳性反应,而对新城疫Ｆ４８Ｅ８,Ｌａｓｏｔａ等毒株不发生反应的特异性单克隆抗体;应用ＲＴ－ＰＣＲ技术对禽副粘病毒Ｉ     

埃博拉病毒感染的实验室诊断方法研究进展

 埃博拉病毒病是由埃博拉病毒引起的一种急性出血性传染病,具有极高的传染性,病死率高达90%,世界卫生组织已将埃博拉病毒列为对人类危害最严重的病毒之一,目前虽有一个被美国食品和药物管理局(FDA)批准用于紧急治疗的实验药物TKM-Ebola,但尚无批准上市的用于预防埃博拉病毒的疫苗.建立快速、准确、简便的实验室检测方法对及时进行临床诊断救治、开展流行病学调查并最终控制其传播流行具有重要意义.本文综述埃博拉病毒实验室检测方法的原理、应用及进展,介绍病毒分离、电子显微镜观察、逆转录聚合酶链反应法、抗原检测试验、抗体酶联免疫吸附试验、血清中和试验及其他检测方法.     

仙台病毒抗原的制备及初步应用

目的纯化和制备仙台病毒(Sendai Virus,SeV)抗原,初步应用于间接酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫印迹(Western-blot)试验对SeV抗体进行检测。方法通过鸡胚尿囊腔及BHK-21细胞增殖法培养增殖SeV,低温冻融去除细胞碎片后,用差速离心及超声破碎法纯化并制备SeV抗原,以SDS-PAGE电泳进行纯度鉴定;优化确定间接SeV-ELISA抗原的最佳包被浓度,对比检测间接免疫荧光试验(IFA)初筛小鼠SeV阳性血清,同时用Western-blot检测法进行特异性验证。结果用BHK-21细胞培养增殖的SeV,病毒滴度HA为1∶128,SeV抗原的电泳纯度达80%;确定SeV-ELISA抗原最佳包被浓度为2.5μg/mL时,测得小鼠SeV抗体ELISA与IFA的阳性符合率为100%,并由Western-blot检测法得到了证实。结论通过BHK-21细胞增殖和差速离心及超声破碎法制备的SeV抗原,可用于ELISA及Western-blot法对小鼠SeV抗体的检测,进而验证了SeV具有较强的抗原特异性及蛋白活性。     

兰州地区2972例孕妇TORCH血清学检测结果的临床分析

检测兰州地区孕妇TORCH感染情况,调查区域内的阳性感染率,从而为区域内孕妇保健提供临床参考。选取2016-2017年期间于兰州大学第二医院行孕检,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TORCH-IgM抗体的女性受检者2972例,分析其阳性结果,对比不同季节孕妇TORCH感染阳性率有无明显差异。TORCH-IgM抗体阳性受检者共40例,阳性率为1.35%,其中以单纯疱疹病毒和弓形虫感染阳性率最高,为0.40%。调查发现夏季为单纯疱疹病毒感染的相对高发期,而春季为巨细胞病毒和弓形虫感染的高发期。孕妇应在孕早期行血清TORCH筛查,采取针对性措施积极预防TORCH感染,从而尽早发现宫内感染,提高生育质量。     

鸡肾型传染性支气管炎的初步诊断与病毒分离

对河北省秦皇岛地区所发生的３起不同品种及不同日龄鸡肾型传染性支气管炎病例，进行了发病情况、临诊症状、病理变化及病原分离等方面的检验。以８只剖检病死鸡的肾脏作为病毒检验用材料，采用鸡胚尿囊腔途径接种并传代的方法，均分离到了病毒。所分得的病毒株均对鸡红细胞无血凝作用，与ＩＢ标准阳性抗血清做琼扩试验呈特异阳性反应，用１８日龄健康雏鸡做回归试验，复制出了同自然病例一样的肾型传染性支气管炎病例。同时，以８只剖检病死鸡的肝脏、肺脏、脾脏、肾脏等作为细菌检验用材料做抹片染色镜检及细菌分离，均未发现亦未分离出细菌     

福建龙岩规模化猪场BVDV感染的血清学调查

为了解闽西地区规模化猪场牛病毒性腹泻病毒(BVDV)流行情况,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对闽西地区18个猪场送检猪血清进行BVDV感染的血清学调查,同时检测这些猪血清的猪瘟抗体,结果表明:规模化猪场BVDV的感染比较严重,血清阳性率为28.6%,猪场阳性率达到94.4%。种猪、育肥猪、保育猪、哺乳仔猪的BVDV的血清阳性率分别为38.5%、17.3%、2.1%、27.4%,种猪的阳性率明显高于生长猪。BVDV抗体与猪瘟抗体的相关性分析结果表明在猪瘟抗体阳性猪群中的BVDV感染率较高,某些猪瘟抗体阴性猪群中也发现BVDV感染的现象。     

新疆部分地区3种鸡肿瘤性疾病的初步调查

为了调查新疆部分地区蛋鸡场疑似肿瘤性疾病,初步了解鸡肿瘤性疾病感染与发病情况,从喀什、阿克苏、玛纳斯等地区的7个养殖场抽选30份疑似肿瘤性疾病病例,进行现场剖解,采用病理组织学方法,ELISA抗原检测法,病原核酸鉴定法对其进行鉴别研究。结果显示：ELISA法检出马立克氏病、禽白血病及禽网状内皮组织增生症的阳性检出率分别为10．00％、76．66％、50．00％。其中禽白血病及禽网状内皮组织增生症的双重感染率为36．66％;PCR方法只检出马立克氏病为阳性。新疆部分地区商品蛋鸡场存在3种鸡肿瘤性疾病的感染,但引发肿瘤病变是以马立克氏病毒为主,调查结果为该类疾病的防控措施提供参考依据。     

实验大鼠和小鼠多种病毒的血清学检测结果分析

摘要:目的　评估近期大鼠和小鼠的病毒感染情况,为我国大、小鼠质量控制和标准化提供参考。 方法　应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2012年至2013年国内36家单位送检的小鼠和大鼠血清进行病毒抗体检测,检测出现阳性的样品再用免疫荧光试验(IFA)进行复检。 结果　检测小鼠病毒抗体18项,出现阳性结果的有9项,小鼠诺如病毒和小鼠肝炎病毒阳性率最高,分别是42.2％和19.9％,检测大鼠病毒抗体14项,出现阳性结果的有8项,大鼠细小病毒有5项,阳性率最高达13.6％—34.4％。 结论　我国大、小鼠病毒监测、净化和控制工作仍需加强。     

传统抗原、重组抗原检测啮齿类动物病毒的ELISA法敏感性和特异性

酶联免疫吸附试验 (ELISA)是一种常用的检测啮齿动物血清病毒抗体的方法。用于检测血清抗体的抗原可是用常规方法制备的全病毒或是在原核或真核系统中表达的重组抗原蛋白。利用杆状病毒表达系统已获得细小病毒、沙粒样病毒和冠状病毒的带有His标记的重组病毒抗原。重组抗原在昆虫细胞中表达裂解后 ,可用色谱法提纯。提纯的抗原用来包被 96孔ELISA板。用细小病毒非结构蛋白 (NS 1) ELISA法检测啮齿动物血清 ,在检测的 345 7份样本中有 88份 (2 5 % )NS 1抗体阳性 ,9份 (0 3% )为非特异性反应。虽然NS 1ELISA检测NS 1抗体具有…     

应用酶联免疫吸附试验检测山羊日本血吸虫病抗体的研究

本研究首先制备了日本血吸虫水溶性止卵抗原和兔抗山羊酶标复合物。经测试确定了:抗原的最适包被浓度(5ug/ml);酶标复合物的最佳工作浓度(1:2500)以及血清不同稀释度下的阴—阳临界值,从而成功地建立了山羊日本血吸虫病抗体的酶联免疫检测法。以1:80稀释作参考,对25份标准阳性血.清和19份标准阴性血清的考核结果证实:在最适条件下,该法特异性,敏感性良好,具有临床和科研应用价值。随后,应用酶联免疫吸附试验对7只实验山羊血吸虫病抗体消长作了长期、细致地观察,结果表明:特异性IgG最早于尾蚴感染后第40天出现;吡喹酮治疗后,7个月消失。