rCHO细胞无血清适应及悬浮培养

考察了血清对rCHO(C28)细胞生长与产物(HBsAg)表达的影响,发现φ血清<0.01时细胞出现明显的代谢转换;考察了微量元素、氢化可的松、混合脂类与短多肽混合物(TL混合物)对细胞的影响,建立了适于rCHO(C28株)生长的无血清培养基MT-SFM;在将细胞从有血清转到无血清状态时,阶段性降血清比直接降血清更有利于rCHO(C28)细胞的无血清适应;当细胞适应了MT-SFM无血清培养基后,批培养中细胞的最大平均比生长速率可达0.65d-1,产物HBsAg的滴度在32～64之间。     

动物细胞无血清培养基的发展和应用

随着生物医药产业和生命科学基础研究对动物细胞培养规模、效率和安全性能要求的不断扩大和提高,无血清培养基的研制和开发已经成为细胞工程领域的重要课题。无血清培养基的发展历经了无血清来源、无动物源、无蛋白和化学成分限定培养基等四个阶段,逐步使得无血清培养基的成分更为明确和简单,进一步提升了无血清培养基在细胞培养中可避免外源物污染等的优势,使其在生物制品和生命科学领域获得了广泛的应用和发展。本文主要系统总结了无血清培养基的发展历程、组分构成和优化方法,尤其对无血清培养基近年来在生物制品、干细胞培养及肿瘤研究等方面的最新开发应用进行了扼要分析述论,以期对无血清培养基在生物学前沿领域的应用和优化提供可借鉴的方向,尤其在肿瘤干细胞的方面可以进行更深入的探索。     

利用发光细菌测定人体血清杀菌活性的研究

本文报导了以发光细菌作指示生物,以相对发光强度的变化为指标,测定人体血清样品总补体活性(CH_(50))的新方法。当把发光细菌和正常人体血清混和培养时,由于血清的杀菌作用而使细菌体内发光强度减弱,且光强度的减弱程度直接与活菌数的减少以及血清浓度相关联。用这一方法测定了199个人体血清样品,并与常规方法测定结果作比较,表明所有CH_(50)值正常的人血清样品抑制细菌发光能力明显大于CH_(50)值不正常的人血清样品,而且抑制细菌发光50％所得结果与常规CH_(50)试验结果一致。发光细菌测定法是一种简便、快速、灵敏的方法。     

淡水养殖鱼类血清转铁蛋白耐低氧特性的研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳、含铁蛋白质专一染色法及利凡诺 ( Rivanol)溶液沉淀法确定了鲤鱼、鲫鱼等 1 2种淡水养殖鱼的血清转铁蛋白在聚丙烯酰胺凝胶中的位置 ,鉴定出 8类鲤鱼、6类鲫鱼和 3类白鲢的血清转铁蛋白的特异类型 ,并分析了转铁蛋白多态体的表现型和基因型 .测定了鲤鱼、鲫鱼、白鲢和鳙鱼的血清铁浓度、铁结合能力及铁饱和度 .通过分析淡水养殖鱼类耗氧量及窒息点临界含氧量与血清转铁蛋白的关系 ,证实了鱼类转铁蛋白具有耐低氧的特性 .     

淡水养殖鱼类血清转铁蛋白耐低氧特性的研究

用聚丙酰胺凝胶电泳、含铁蛋白质专一染色法及利凡诺溶液沉淀法确定了鲤鱼、鲫鱼等１２种淡水养殖鱼的血清转铁蛋白在聚丙烯酰胺中的位置,鉴定出８类鲤鱼、６类鲫鱼和３类白鲢的血清转铁蛋白的特异类型,并分析了转铁蛋白多态体的表现型和基因型,测定了锂鱼、鲫鱼、白链和鳙鱼的血清铁浓度,铁结合能力及铁饱和度,通过分析淡水养殖鱼类耗氧量及窒息点临界含氧量与血清转铁蛋白的关系,证实了鱼类转铁蛋白具有耐低氧的特性     

荧光猝灭法研究Fe(Ⅲ)和Zn(Ⅱ)与血清白蛋白的竞争结合

利用荧光猝灭法,在生理pH值7.43,20℃时,研究了Fe(Ⅲ)-血清白蛋白-Zn(Ⅱ)双金属体系中Fe(Ⅲ)、Zn(Ⅱ)与血清白蛋白相互作用,得出Fe(Ⅲ)与血清白蛋白结合比Zn(Ⅱ)与血清白蛋白结合强,并且在HSA体系中,Zn(Ⅱ)能够促进Fe(Ⅲ)与血清白蛋白的结合.     

抗凝血药物华法灵钠与人血清白蛋白的相互作用研究

用荧光光谱、紫外光谱和圆二色谱法研究了抗凝血药物华发灵钠与人血清白蛋白(HSA)的相互作用.初步确定华法灵钠对人血清白蛋白的荧光产生猝灭现象,猝灭方式为静态,并计算了二者形成化合物的结合常数K和结合位点数n.根据不同温度下的热力学函数,确定了华发灵钠与人血清白蛋白的相互作用力类型为氢键和范德华力.发现华法灵钠的存在明显改变人血清白蛋白的构象,并讨论了华发灵钠使人血清白蛋白构象发生变化的可能原因.     

新疆某地维吾尔族男性吸毒者KSHV血清流行病学初步分析

为进一步研究HIV-KSHV感染相关疾病提供基础资料,利用ELISA法检测KSHV潜伏期LANA1、溶解期ORF65、K8.1抗原抗体,采用χ2检验分析有关数据,分析了新疆某地维吾尔族男性吸毒人群的KSHV血清流行病学的特点。吸毒人群主要以注射吸毒者为主(184/199,92.5%),在199份吸毒者血清中共检测到KSHV阳性血清60份,KSHV血清阳性率是30.6%;χ2检验分析显示,年龄、职业、文化程度、婚姻状况、HIV-1血清状态、吸毒方式以及吸毒年限均与KSHV血清阳性率无关,该吸毒人群中KSHV感染率较高,表明KSHV普遍存在于新疆某地维族男性吸毒人群。     

利用发光细菌测定人体血清杀菌活性的研究

本文报导了以发光细菌作指示生物,以相对发光强度的变化为指标,测定人体血清样品总补体活性(CH_(50))的新方法.当把发光细菌和正常人体血清混和培养时,由于血清的杀菌作用而使细菌体内发光强度减弱,且光强度的减弱程度直接与活菌数的减少以及血清浓度相关联.用这一方法测定了199个人体血清样品,并与常规方法测定结果作比较,表明所有CH_(50)值正常的人血清样品抑制细菌发光能力明显大于CH_(50)值不正常的人血清样品,而且抑制细菌发光50%所得结果与常规CH_(50)试验结果一致.发光细菌测定法是一种简便、快速、灵敏的方法.     

黄鳝血液中若干生化指标的测定

本文报告了雌雄黄鳝血液中血浆总蛋白、纤维蛋白原、血红蛋白、血糖、血清胆固醇、血清甘油三脂的含量以及血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、胆碱酯酶和异柠檬酸脱氢酶、乳酸脱氢酶活力的测定结果。     

急性脑梗死患者hsCRP、CD62p与颈动脉斑块关系的研究

目的探讨急性脑性梗死患者血清超敏C反应蛋白（hsCRP）、P-选择素（CD62p）水平及颈动脉斑块的特点。方法将发病3天内急性脑梗死患者112例、正常体检老年人80例,采用全自动生化分析仪测定患者血清中hsCRP水平,流式细胞仪测量CD62p并应用颈动脉超声对斑块特点进行分析。结果急性脑梗死组与对照组比较颈动脉斑块检出率和易损斑块比例增加,且血清中hsCRP水平和CD62p百分率增加;在急性脑梗死组和对照组中易损斑块病例比非易损斑块病例、无斑块病例血清中hsCRP水平和CD62p百分率增加。结论血清中hsCRP、CD62p水平与颈动脉斑块及脑梗死的发生率呈正相关。     

血浆同型半胱氨酸水平与脑小血管病搏动指数相关性研究

目的 探讨血浆同型半胱氨酸(tHcy)水平与脑小血管病患者搏动指数(PI)的相关性.方法 选取脑小血管病患者180例和同期对照组100例,利用化学发光微粒子免疫检测法检测患者血浆tHcy水平;借助颈部血管彩超测定两侧颈动脉血流运动学参数,包括颈动脉最大血流速度(Vmax)、最小血流速度(Vmin)、平均血流速度(Vmean);利用公式PI=(Vmax-Vmin)/Vmean,求得PI.结果 脑小血管病组患者血浆tHcy与患者PI呈正相关(r=0.326,P=0.002),同时与Vmax,Vmin,Vmean呈负相关,而对照组无此相关性.脑白质病变(WML)组患者血浆tHcy水平明显高于腔隙性脑梗死组(LI).结论 血浆tHcy水平与脑小血管病PI有显著的相关性,tHcy是脑小血管病的独立危险因素,可在一定程度上反映脑血管的损伤程度.     

初孵扬子鳄大脑皮层组织学结构观察

本文用光镜对扬子鳄大脑皮层的组织学结构进行了研究 .扬子鳄大脑皮层可分为外网状层、细胞层和内网状层三层 ,神经细胞绝大多数集中于细胞层内 ,内、外网状层中零星分布一些小细胞 .从内侧到外侧 ,大脑皮层可分为海马、新皮质和梨状皮质三部分 ,三者之间无明显界线 ,细胞排布有所区别 .本文对扬子鳄的大脑皮层同其他脊椎动物的进行了比较讨论 .     

计算机诊断疾病—专家系统之二 急性脑血管病的鉴别诊断

为了实现利用电子计算机诊断疾病这样一个较大的专家系统,我们建立了一个数学模型,本文利用这个模型来鉴别诊断急性脑血管病(又称脑血管意外)。首先,我们建立了急性脑血管病的四个标准模型:脑血栓形成P_1的标准模型M_(P_1)~S,脑溢血P_2的标准模型M_(P_2)~S,脑栓塞P_3的标准模型M_(P_3)~S和蛛网膜下腔出血P_4的标准模型M_(P_4)~S。然后对待诊者的临床表现建立一个模型M_(P')~F,再判定该模型M_(P')~F,最象四个标准模型中的那一个,用这样一个模型识别方法来确定该待诊者所患的疾病。最后编制了一个计算机诊断的语言程序——脑血管意外语言程序(这部分从略)。     

Creation of reversed phase high-performance liquid chromatographic technique to assay platelet-activating factor

OBJECTIVE: To establish a new assay for platelet-activating factor (PAF), to compare it with bio-assay; and to discuss its significance in some elderly people diseases such as cerebral infarction and coronary heart disease. METHODS: To measure PAF levels in 100 controls, 23 elderly patients with cerebral infarction and 65 cases with coronary heart disease by reversed phase high-performance liquid chromatographic technique (rHPLC). RESULTS: rHPLC is more convenient, sensitive, specific, and less confusing, compared with bio-assay. The level of plasma PAF in patients with cerebral infarction was higher than that in the controls (P<0.01), and in patients with coronary heart disease. CONCLUSION: Detection of PAF with rHPLC is more reliable and more accurate. The new assay has important significance in PAF research.     

阿托伐他汀联合氯吡格雷对急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块及凝血功能的影响

目的探讨阿托伐他汀联合氯吡格雷治疗对急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块及凝血功能的影响.方法将80例急性脑梗死患者根据随机数字法分为对照组(阿司匹林及阿托伐他汀)和观察组(对照组基础上,加用氯吡格雷),比较两组治疗的临床疗效、治疗前后动脉粥样硬化斑块面积及颈动脉中层厚度,治疗前后凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)水平变化情况.结果与对照组相比,观察组治疗的总有效率明显增高(P0.05);与对照组相比,观察组治疗后动脉粥样硬化斑块面积及颈动脉中层厚度均明显减少(P0.05);与对照组相比,观察组治疗后PT,APTT均明显增高,FIB水平显著降低(P0.05).结论阿托伐他汀联合氯吡格雷治疗能够明显减少急性脑梗死患者的斑块面积,改善凝血指标,提高疗效,值得临床推广使用.     

模拟5000米低氧大鼠脑内信息物质含量变化初探

利用减压舱模拟海拔５０００米低氧并采用放射免疫的方法，观察了大鼠大脑皮层和小脑内信息物质浓度的变化，并比较了两部位间的含量差异。以西宁地区海拔２２６０米作为对照，发现：高海拔低氧可引起大鼠脑内ｃＡＭＰ含量升高尤以小脑显著。     

蒙古沙鼠的脑底动脉解剖及其在全脑缺血模型中的应用

目的研究蒙古沙鼠脑底动脉的形态,为制作全脑缺血再灌注模型提供解剖学依据.方法成年蒙古蒙古沙鼠30只,分别用铅丹混合液和乳胶混合液两种方法灌注,甲醛固定,铅丹组用X线机拍片观察.乳胶组用去骨暴露血管直接观察.分别观察蒙古沙鼠脑底动脉的构成及分支、分布情况.结果蒙古沙鼠的脑底动脉来自颈内动脉系和椎-基底动脉系,颈内动脉的主要分支有：大脑前动脉、大脑中动脉、大脑后动脉,基底动脉的主要分支是小脑上动脉.颈内动脉及其分支与基底动脉及其分支之间未见任何交通支.结论蒙古沙鼠的脑底动脉无后交通动脉,没有完整的大脑动脉环.颈内动脉系和椎-基底动脉系为两个独立的供血系统.为制作全脑缺血的两血管阻塞模型提供了天然的条件,本文对此进行了进一步的验证.     

广州地区发热幼儿中人类疱疹病毒7的检测

目的：检测广州地区发热幼儿中人类疱疹病毒7(HHV-7)的感染状况，从而了解HHV-7感染在此类疾病中的病原学意义。方法：采用n-PCR法检测患儿血浆中的HHV-7DNA。结果：在发热疾病组中血浆HHV-7DNA阳性率为18．0％，而在作为对照的健康组及非发热疾病组的阳性率分别为0和5．4％，发热疾病组与对照组间比较有显著性差异。结论：在广州地区的发热幼儿中HHV-7感染具有一定的病原学意义。     

Continued clearance of apoptotic cells critically depends on the phagocyte Ucp2 protein

Rapid and efficient removal of apoptotic cells by phagocytes is important during development, tissue homeostasis and in immune responses. Efficient clearance depends on the capacity of a single phagocyte to ingest multiple apoptotic cells successively, and to process the corpse-derived cellular material. However, the factors that influence continued clearance by phagocytes are not known. Here we show that the mitochondrial membrane potential of the phagocyte critically controls engulfment capacity, with lower potential enhancing engulfment and vice versa. The mitochondrial membrane protein Ucp2, which acts to lower the mitochondrial membrane potential, was upregulated in phagocytes engulfing apoptotic cells. Loss of Ucp2 reduced phagocytic capacity, whereas Ucp2 overexpression enhanced engulfment. Mutational and pharmacological studies indicated a direct role for Ucp2-mediated mitochondrial function in phagocytosis. Macrophages from Ucp2-deficient mice were impaired in phagocytosis in vitro, and Ucp2-deficient mice showed profound in vivo defects in clearing dying cells in the thymus and testes. Collectively, these data indicate that mitochondrial membrane potential and Ucp2 are key molecular determinants of apoptotic cell clearance. As Ucp2 is linked to metabolic diseases and atherosclerosis, this newly discovered role for Ucp2 in apoptotic cell clearance has implications for the complex aetiology and pathogenesis of these diseases.