采用末稍血检测乙型肝炎表面抗原的研究

目的：本研究旨在评价末稍血替代静脉血检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。方法：采用酶联免疫吸附试验对100例健康体检者，100例非乙肝患者（乙肝血清标志物全部阴性者），100例HBsAg携带者，102例乙肝患者行血清，末稍全血HBsAg检测。结果：末稍血用两种不同洗板方法检测HBsAg，结果有极显著性差异（P＜0．01），末稍血用本室洗板方法与静脉血清HBsAg检测结果无差异（试验诊断指数均200％）。结论：采用末稍血用本室洗板方法可替代静脉血清对HBsAg检测。     

兰州市饮食服务行业从业人员乙型肝炎病毒携带情况调查分析

对2007年兰州市饮食服务行业7 615例从业人员乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检出情况进行调查分析,以期了解乙型肝炎病毒携带情况。采用ELISA法对餐饮服务行业从业人员进行血清HBsAg检测。兰州市餐饮服务行业从业人员HBsAg检出率为1.799%;男性略高于女性,但男女之间无显著性差异。HBsAg阳性人群21～30岁组显著高于其他各组(P0.001),其他组间无显著性差异(P0.05)。HBsAg阳性率有随年龄增加而降低趋势。16～20岁组HBsAg阳性人群较2005年有显著下降,达到50%。应加强对餐饮服务行业从业人员的健康体检,切实控制乙型肝炎食源性传播。     

荧光定量PCR检测HBV DNA及临床意义

目的:了解HBV感染者的常见血清学组合的HBV DNA阳性情况,探讨其临床意义。方法:对260份血清同时用荧光定量PCR与ELISA方法进行检测并进行评价。结果:40例HBsAg(+)/HBeAg(+)/抗-HBc(+)组血清HBV DNA全部阳性,阳性率为100％,含量为10~(7.62±0.69)cps/mL;110例HBsAg(+)/抗-HBe(+)/抗-HBc(+)组血清58例阳性,阳性率为52.7％,含量为10~(4.64±1.31)cps/mL;35例HBsAg(+)/抗-HBe(-)/抗-HBc(+)组血清20例阳性,阳性率为57.1％,含量为10~(4.93±1.42)cps/mL;75例HBsAg(-)组血清中,5例HBV DNA阳性,阳性率为6.7％,含量为10~(3.68±0.46)cps/mL。结论:乙型肝炎患者HBV荧光定量检测是病毒复制最直接可信的指标,动态荧光定量PCR检测HBV DNA,对动态监测乙型肝炎感染的病原学变化及判断有关药物抗-HBV复制是否有效具有一定的临床意义。     

基于小鼠肝炎病毒研究遗传工程小鼠隔离检疫设计

目的以小鼠肝炎病毒(MHV)为例,研究两种常用小鼠感染MHV后粪便中病毒核酸检测量与血清特异性抗体的变化,探讨实验动物病原微生物感染的检测设计。方法用MHV病毒核酸检测阳性的脏垫料持续饲养C57BL/6和BALB/c小鼠(n=20) 28 d,进行脏垫料接触感染。之后所有小鼠使用无菌垫料进行单笼饲养,每周收集新鲜粪便和血清样本,经Taqman荧光定量PCR(qPCR)和ELISA法检测后进行统计分析。结果对于BALB/c小鼠,采用qPCR法检测时,在实验第21天即有阳性检出(阳性率20%),第28天阳性检出率达到最高,为80%,第42天阳性检出率为50%,至第56天无阳性检出。血清ELISA检测发现,实验第42天才有MHV特异性抗体检出(阳性率为50%)。对于C57BL/6小鼠,采用qPCR法检测时,在第28天和第42天分别从20%小鼠粪便中检出MHV。而采用ELISA法在整个实验期均未检出特异性阳性抗体。结论在隔离检疫和常规病原检测中,建议选用BALB/c小鼠作为哨兵鼠,替代C57BL/6小鼠。由于qPCR法具有早检出和更高检出率的优点,建议在隔离检疫早期采用基于分子生物学的粪样核酸检测法替代ELISA法。     

335例乙型肝炎患者血清HBV-DNA定量与乙肝病毒标志物的相关性分析

目的:探讨乙型肝炎患者血清HBV-DNA定量与乙肝病毒标志物的关系。方法:对335例乙型肝炎患者分别用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清HBV-DNA含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清乙肝病毒标志物,并对结果进行统计学分析。结果:大三阳组HBV-DNA阳性率及含量显著高于其他组(P<0.01);小三阳组HBV-DNA阳性率及含量显著低于大三阳组(P<0.01),但与HBsAg、HBcAb阳性组比较差异无统计学意义(P>0.05);HBeAg阳性组HBV-DNA阳性率显著高于HBeAg阴性组(P<0.01)。结论:只有将HBV-DNA定量检测和乙肝病毒标志物有机的结合,才能为乙型肝炎的临床感染、病毒复制、传染性强弱以及抗病毒药物的疗效观察提供可靠的判断依据。     

父亲精液HBV-DNA载量与HBV父婴垂直传播的相关性分析

目的:探讨乙肝表面抗原(HBsAg)阳性父亲精液乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量对其新生儿发生HBV父婴垂直传播的影响,以期寻找阻断HBV父婴垂直传播的有效方法.方法:在知情同意的原则,以丈夫血清HBsAg阳性、孕母HBsAg及HBV-DNA均阴性的52个家庭作为研究对象,收集父母及其新生儿的相关资料及血液标本和父亲精液标本,检测血液乙肝病毒血清学标志物(HBVM)、HBV-DNA载量与精液HBV-DNA载量.依据其新生儿脐带血HBV-DNA检测结果作为分组标准,HBV-DNA检测为阳性11例为病例组,阴性41例为对照组,进行病例对照研究.结果:新生儿脐带血HBV-DNA阳性率为21.2%(11/52),52份精液HBV-DNA阳性率为26.9%(14/52);精液HBV-DNA阳性父亲其新生儿发生HBV父婴垂直传播的危险性高于精液HBV-DNA阴性者(P0.01);精液与其血清的HBV-DNA载量存在正相关关系,精液HBV-DNA载量低于其血清载量;ROC曲线分析显示,精液HBV-DNA载量在预测HBV垂直传播发生风险的效果优于血清HBV-DNA载量.结论:父亲精液HBVDNA载量是HBV父婴垂直传播的危险因素;HBsAg阳性的男性在计划孕育前降低其血液及精液中HBV-DNA载量水平能降低HBV父婴垂直传播的风险.     

肛肠病患者乙肝病毒感染探讨

目的:研究肛肠病患者、骨伤患者及内科病患者中乙肝标志物的情况,并进行比较分析。方法:肛肠病患者、骨伤患者及内科病患者各500例分成3组。每例患者静脉采血2-3ml,用酶联免疫(ELISA)法测定血清中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,统计各组的阳性率并进行分析。结果:血清中肛肠病组的总感染率,HBsAg、HBeAg阳性率及HBsAg、HBeAg、HbcAb三者同时阳性的比例高于其它两组,有显著性差异(P<0.05)。结论:乙肝病毒与肛肠疾病是否相关尚待进一步研究。     

乙型肝炎病毒感染与母婴宫内垂直传播的临床研究

目的研究孕妇乙型肝炎病毒(HBV)感染与母婴宫内垂直传播的关系。方法选取我院2007年3月至2009年11月于佛山市第一人民医院产前检查及足月分娩的120例HBsAg阳性孕妇及其新生儿作为研究对象,采集孕妇静脉血及新生儿脐血进行HBV血清学标志物和HBVDNA的检测,了解新生儿HBV母婴宫内垂直传播的情况。结果 120例HBsAg阳性孕妇新生儿宫内感染率为12.4%;新生儿出生24 h内HBsAg、HBeAg、HBV-DNA阳性率分别为14.2%、15.8%、5.0%;HBeAg阳性孕妇新生儿HBsAg、HBeAg阳性率高于HBeAg阴性孕妇,2组比较统计学有差异(P0.05);新生儿宫内感染率随着HBV-DNA复制水平的增加而逐渐升高,HBV-DNA复制水平与新生儿宫内感染率呈正相关。结论孕妇HBeAg阳性、和或HBV DNA高复制水平是新生儿宫内垂直传播的高危因素。     

降钙素原、白细胞计数以及C反应蛋白在新生儿感染性疾病中的应用

目的:通过检测患有新生儿感染性疾病的患儿血清中的降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和血液中的白细胞计数(WBC)水平,探讨其对新生儿感染性疾病中辅助诊断作用.方法:选用临床确诊为患有感染性疾病的新生患儿42例,健康新生儿30例,检测其血清中的PCT、CRP以及血液中的WBC,用统计软件Spss 17.0进行数据分析.结果:42例新生患儿中PCT阳性率(PCT≥0.5 ng/mL为阳性)为90.5％,WBC阳性率(WBC＞ 20×109/L为阳性)为28.5％,CRP阳性率(CRP ＞8 mg/L为阳性)为44.7％,三者在新生儿感染性疾病中均升高,但是PCT阳性率明显高于CRP和WBC,存在显著差异性(P＜0.01).结论:PCT、WBC和CRP对新生儿感染性疾病的诊断,鉴别诊断和指导临床早期用药有一定的价值,而且相比于WBC和CRP,PCT是一个能够更早,更灵敏地反映新生儿感染性疾病的指标.     

ELISA和PCR法在研究乙肝病毒传播途径中的应用

应用HBV表面抗原酶标试剂盒和诊断HBVDNA的PCR试剂盒分别检测可能污染有HBV的不同来源标本30份，结果ELISA法检出HBsAg阳性5例，检出率16．7％；PCR法检出HBVDNA阳性12例，检出率40％，明显高于ELISA法，提示应用PCR技术探讨乙肝病毒传播途径似乎效果更好。     

快速全血凝集试验在中国不同人群HBsAg检测中的应用

为了评价本实验室建立的快速全血凝集法检测HBsAg的效果,检测了河北省不同人群534份全血样品,得到了满意结果.来自不同人群的369份样品(其中62份来自乙肝患者,180份来自献血者,127份来自正常人群),经快速全血凝集法和国家认证的市售ELISA试剂盒平行检测后,总符合率为96.7%,灵敏度为90.99%,特异性为98.7%.乙肝患者、献血者和正常人群中阳性率分别为52.6%,4.3%和8.9%.实验结果说明快速全血凝集法不仅简单快速、不需要特殊设备,而且具有高的敏感性和特异性,因此它可以广泛应用于基层卫生机构和临床HBsAg的检测,尤其适用于病人的床边诊断.     

马来西亚食蟹猴B病毒相关抗体检查

目的 提供马来西亚食蟹猴B病毒相关抗体阳性率,为我国从马来西亚进行食蟹猴引种提供参考依据.方法 对野外捕捉的1 916只食蟹猴后股静脉采血,低温静置,高速离心、分离血清,用玻片免疫酶法(EIA)和ELISA诊断试剂盒法两种方法对血清进行检测.结果 总的B病毒相关抗体阳性率为68.5%,其中年龄<2岁、2～4岁、4～6岁的B病毒相关抗体阳性率分别为53.0%、63.8%和76.4%.结论 马来西亚食蟹猴B病毒相关抗体阳性率较大;B病毒相关抗体的阳性率是随着年龄的增加而增加;B病毒的感染不受性别的影响.因此在引种过程中应选用年龄较小者.     

乙肝母婴阻断后婴儿静脉血乙型肝炎五项指标的实验室检测分析

目的:研究乙型肝炎病毒母婴阻断后的临床效果.方法:乙型肝炎血清标志物阳性的116例孕妇母婴阻断后婴儿一岁时,采集静脉血,用MEIA法与ELISA法分别检测乙型肝炎五项指标并进行对比研究.结果:116例婴儿静脉血ELISA法检测结果为:抗-HBs(+)比例为72.4%,用MEIA法检测:抗-HBs(+)比例为73.3%;两种方法检测无显著差别(P＞0.05).结论:HBV母婴垂直传播的发生率很高,母亲及婴儿乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)联合乙肝疫苗注射可显著提高HBV母婴传播阻断效果.     

MCTD、SS和RA患者血清中SARS-CoV抗体阳性原因分析

为探讨严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)抗体在SARS病原学诊断中的特异性及其在干燥综合征(SS)、混合结缔组织病(MCTD)和类风湿性关节炎(RA)患者血清中的假阳性问题，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法(IFA)检测了111例正常对照和46例SS、MCTD和RA患者血清中SARS-CoV抗体的阳性率。结果在正常对照和SS、MCTD和RA患者中，应用ELISA测定SARS-CoV抗体的阳性率分别为3．6％(4／111)和19．6％(9／46)，经IFA检测，上述SARS-CoV抗体阳性者均为阴性。提示IFA诊断SARS的特异性为100％，ELISA诊断SARS存在一定的假阳性。     

PreS1抗原与HBeAg联合检测用于预测HBV-DNA的水平

目的:联合检测慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者的血清前S1(PreS1)抗原和乙肝e抗原(HBeAg)两项指标,判断其与HBV-DNA定量的相互关系.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附分析(ELISA)法(两步法)检测PreS1抗原,双抗体夹心ELISA法(一步法)检测HBeAg,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测HBV-DNA.结果:在335例慢性HBV携带者患者中,PreS1抗原阳性率为42.7％,HBeAg阳性率为36.4％,HBV-DNA阳性率为53.4％.在179例HBV-DNA阳性患者中,HBeAg阳性109例(60.9％);156例HBV-DNA阴性患者中,HBeAg阴性143例(91.7％).在179例HBV-DNA阳性患者中,PreS1抗原阳性89例(49.7％);在156例HBV-DNA阴性患者中,PreS1抗原阴性102例(65.4％).PreS1和HBeAg双阳性的感染者HBV-DNA阳性率为93.8％( 45/48);在PreS1和HBeAg双阴性的感染者中,HBV-DNA阳性率仅为22.0％ (26/118).结论:HBeAg与HBV-DNA的相关性比PreS1抗原与HBV-DNA的相关性高.PreS1和HBeAg双阳性的感染者HBV的复制程度高,而双阴性的感染者复制程度较低.因此,PreS1抗原与HBeAg联合检测可用于预测HBV-DNA的水平.     

琼脂糖电泳改良法明显提高HBsAg的检出率

琼脂对流免疫电泳是一种检测HBsAg常用方法,但存在的问题是其敏感度较低。笔者在常规方法的基础上,做了些改进:用琼脂糖代替纯化琼脂;并先将诊断血清加在阳极端孔内,预电泳15—20分钟,然后将待检标本加入阴极端孔内继续电泳50分钟。应用这种预电泳法检查416份标本并和常规法作了比较。结果表明预电泳法HBsAg检出率(25.0％)明显地高于常规法(15.4％)。     

乙肝病毒前C基因变异对宿主T细胞亚群的影响及其临床意义的研究

目的　通过检测乙型肝炎病毒 (HepatitisBVirus,HBV)变异株感染患者外周血T细胞亚群分布的变化 ,探讨HBV基因组前C区 1896位基因变异与宿主机体免疫水平的关系 .方法　用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测 5 5名患者血清乙型肝炎病毒标志物 (HBVM)HBsAg ,抗 HBs,HBeAg ,抗HBe及抗 HBc;采用定性PCR法检测上述患者血清HBVDNA ;通过限制性片段长度多态性分析法 (RFLP)检测发生前C区 1896位基因突变的HBV变异株 ;采用流式细胞术 (flowcytometry)对上述患者外周血的CD4 + T细胞 ,CD8+ T细胞 ,CD3+ T细胞含量进行检测 ,将检测结果同所设健康对照组进行比较 ,并对数据进行统计学分析 .结果　在 5 5名患者中 ,HBsAg(+) ,anti HBs(- ) ,HBeAg(+) ,anti HBe(- ) ,anti HBc(+)者共 2 2例 ,其HBVDNA检测结果均为阳性 ,在这2 2例患者中 ,有 2 0例被检出为单纯HBV野毒株感染 ,另有 2例被检出为变异株和野毒株混合感染 ;HBsAg(+) ,anti HBs(- ) ,HBeAg(- ) ,anti HBe(+) ,anti HBc(+)者共 33例 ,其中HBVDNA阳性者为 18例 .在 18例HBeAg(- )而HBVDNA (+)的患者中 ,有 17例被检出为HBV前C区 1896位变异株感染 .变异株感染患者外周血CD4 + T细胞含量较之健康对照组有所减低 (P <0 .0 1) ,CD8+ T细胞含量较之健康对照组也有所     

无乙肝症状的“健康人群”中前S_2蛋白及抗前S_2的血清学调查

采用国产单克隆抗体酶标试剂盒(McAb—ELISA)对广东某地区无乙肝症状的298人作了血清前S_2蛋白及抗前S_2检测,同时检测各项乙型肝炎病毒血清学标志(HBVM)及肝功能。全部检测对象肝功能正常。前S_2阳性率7.72％。抗前S_2阳性率5.70％。前者与HBsAg及其它乙肝病毒复制标志(HBcAg、PHSA-R、HBcAg、抗-HBcIgM及HBVDNA)有平行关系,后者则与抗HBs有平行关系。结果提示前S_2可作为一项敏感的HBV复制及传染性的指标,抗前S_2是一项乙肝感染的恢复标志,二者有重要的流行病学与临床意义,检测证实人群中存在相当数量的HBV携带者和隐性感染者。     

肝癌患者血清可溶性白介素2受体检测及其临床意义

应用夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测了45例肝癌(HCC)患者及42例健康成人的血清可溶性白介素2受体(sTL-2R)水平,结果显示HCC患者sTL-2R水平较健康成人明显增高(p＜0．01),其升高幅度与肿瘤体积大小有关(p＜0．05),而与AFP及HBsAg阳性与否无关(P＞0．05),故HCC者测定血清sTL-2R不仅能了解肿瘤患者的机体免疫功能状态,且在一定程度上能对疾病的严重程度,疗效及判断预后作出评估。     

前S1抗原的检测及其与HBV血清标志物之间关系的探讨

目的了解前S1抗原和乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物常见模式之间的关系,探讨前S1抗原检测的临床意义.方法采用双抗体夹心ELISA法对269例HbsAg阳性血清进行前S1抗原检测,并与相应的HBV血清标志物模式进行比较分析.结果HbeAg阳性组的前S1抗原阳性率无显著差别(P>0.05),HbsAg阳性组的前S1抗原阳性率也无显著差别(P>0.05).而HbeAg阳性组和HbsAg阳性组之间前S1抗原阳性率则存在显著差别(P<0.01),后者阳性率较高.结论前S1抗原与HBV血清标志物之间有一定关系,临床上宜将两者结合起来检测,综合判断.