家族性血小板型出血病16型的遗传诊断与咨询

对1例临床初诊疑似血小板无力症患者结合其家系遗传情况进行基因诊断以明确病因。抽取患者外周血提取DNA,打断DNA并制备文库,通过核酸探针对目标基因编码区和剪切区附近的DNA进行捕获和富集,然后使用高通量测序平台Illumina HiSeq2500进行变异检测,最后对患者及家系成员采用Sanger测序进一步验证。患者ITGA2B基因检出c.2267+1GT的杂合变异,遗传自其父亲,变异与家系中的患者表型紧密连锁。患者疾病明确诊断为由于ITGA2B杂合变异c.2267+1GT引起的家族性血小板型出血病16型。该位点变异为首次报道,研究结果扩展了ITGA2B基因突变谱。     

溶瘤单纯疱疹病毒抗肿瘤作用及其机理研究

目前,已有溶瘤病毒在临床治疗上应用,是一种有效的癌症免疫治疗方法。近年来研究人员对单纯疱疹病毒的研究越来越广泛,尤其是Ⅰ型单纯疱疹病毒。为了探索溶瘤单纯疱疹病毒抗肿瘤作用及其机理,从单纯疱疹病毒的生物学特点,溶瘤单纯疱疹病毒的抗肿瘤机制,溶瘤单纯疱疹病毒的临床应用及其局限性等方面进行归纳整理。研究表明,溶瘤病毒通过多步法包括直接裂解肿瘤细胞,诱导细胞毒性或凋亡致敏细胞因子以及促进抗肿瘤T细胞应答来达到抗肿瘤的作用。增强溶瘤治疗期间的免疫反应可增强其抗肿瘤效果。溶瘤病毒在肿瘤治疗方面已经成为一种新兴制剂。     

ELISA和PCR法在研究乙肝病毒传播途径中的应用

应用HBV表面抗原酶标试剂盒和诊断HBVDNA的PCR试剂盒分别检测可能污染有HBV的不同来源标本30份，结果ELISA法检出HBsAg阳性5例，检出率16．7％；PCR法检出HBVDNA阳性12例，检出率40％，明显高于ELISA法，提示应用PCR技术探讨乙肝病毒传播途径似乎效果更好。     

幽门螺杆菌感染与胃肠外疾病

目的综述幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染与胃肠外疾病的关系.方法对近年来的文献进行整理归纳.结果幽门螺杆菌感染不仅与慢性胃炎、消化性溃疡等密切相关而且还与某些胃肠外疾病有一定的相关性.结论幽门螺杆菌作用机制复杂,在不同的疾病中起着不同的作用,弄清幽门螺杆菌作用机制将具有重要的临床意义.     

蛾类粗制变应原的实验研究

探讨了蛾变应原试剂的制备和临床应用。将 2年 4个季节采集的 62 6.5 g经干燥的蛾粉碎后以可卡氏碱性抗原提取液提取 ,提取液经无菌过滤得变应原原液 ,再以原液和稀释液进行动物试验测定其致敏性。皮试测定蛾类变应原有较强致敏作用 ,原液致敏作用达 1 0 0 % ,其稀释液按稀释度不同致敏作用达 5 0 %— 1 0 0 %不等。蛾类变应原有强烈的致敏作用 ,可用于临床研究     

幽门螺杆菌感染与胃肠外疾病

目的综述幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染与胃肠外疾病的关系.方法对近年来的文献进行整理归纳.结果幽门螺杆菌感染不仅与慢性胃炎、消化性溃疡等密切相关而且还与某些胃肠外疾病有一定的相关性.结论幽门螺杆菌作用机制复杂,在不同的疾病中起着不同的作用,弄清幽门螺杆菌作用机制将具有重要的临床意义.     

煤工尘肺结核患者血清TNF-α水平的临床观察

为了研究煤工尘肺结核患者的机体细胞免疫状况,应用ELISA法对煤工尘肺结核组、煤工尘肺组及肺结核组患者进行血清α肿瘤坏死因子(TNF-α)水平检测,并与健康对照组进行了比较。结果发现煤工尘肺结核组、煤工尘肺组及肺结核组患者血清TNF-α水平均明显低于健康对照组(P<0.01),而这三组患者血清TNF-α水平相差不显著(P>0.05)。煤工尘肺结核组中,随着煤工尘肺期别的增加,血清TNF-α水平也呈明显下降趋势,煤工尘肺 期、 期患者血清中TNF-α水平均显著低于煤工尘肺 期患者血清中TNF-α水平(P<0.05)。因此,煤工尘肺结核患者机体细胞免疫能力明显低下,临床治疗中可考虑使用免疫调节剂进行辅助治疗。     

结核分枝杆菌Ag85B基因克隆及真核表达质粒pIRES-Ag85B的构建

目的:克隆并构建编码结核分枝杆菌Ag85B分泌蛋白的重组真核表达质粒,为进一步研究其在开发新型的结核病疫苗和结核病免疫诊断试剂奠定了基础。方法:采聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Ag85B基因,然后用双内切酶消化PCR产物和pIRES质粒,用T4 DNA连接酶连接后,转化入感受态E.coli DH5a,产物铺AmpR抗性的平板,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定并进入blast网页比对测序的序列。结果:酶切鉴定所切下的片段大小与预计相符,测序比对后结果与目的基因完全一致,证实符合表达框架。结论:成功地克隆并构建Ag85B基因的真核重组表达质粒pIRES-Ag85B。     

A型肉毒杆菌毒素的基因测序与分析

对国内A型肉毒杆菌毒素基因测序,分析了解毒素基因结构并推测其氨基酸序列。提取肉毒杆菌总DNA,利用自行设计的引物对目的基因进行PCR扩增,把目的基因导入E.Coli JM109,筛选含目的基因的阳性克隆菌进行测序和分析,从而了解毒素基因结构并推测其氮基酸序列。对A型肉毒杆菌毒素基因的核苷酸序列成功测序并与GenBank中的相应序列比较,其序列同源性为96％。推测其氨基酸序列同源性为100％。成功地对A型肉毒杆菌毒素的基因进行了测序,这为肉毒杆菌毒素中毒的快速诊断,以及进一步探求以基因工程方法生产此毒素奠定基础。