四川引种安哥拉山羊可行性报告

四川省畜牧局为充分利用本省山地牧草资源,振兴民族地区经济,正蕴酿引种安哥拉山羊到山区去改良当地土种山羊,并立题组成课题组对引种的可行性进行研究。研究内容涉及安哥拉山羊生态适应性观测、四川引种安哥拉山羊适宜地区的探讨等。课题组在查阅了大量国外安哥拉山羊饲养业资料的基础上,对引进到陕西省米脂县的安哥拉山羊进行了生态适应性观测;根据安哥拉山羊对生态条件的要求和四川省各地的生态条件,用差额法确定了引种的适宜地区,最后结合交通等条件,提出了四川引种安哥拉山羊的最适地区。结论表明引种到米脂县的安哥拉山羊基本上能适应当地的生态条件;四川西北部有理县等18个县属于干旱区或半干旱区,具有安哥拉山羊所要求的生态条件,可供引种时选用。结合交通条件考虑,以汶川县的绵池至杂谷脑一带、松潘县的镇江口和黑水的西尔为最佳,建议首先在这些地区尽快引种少量安哥拉山羊作进一步的适应性观测,取得成功后,再推广到其它适宜地区。     

安哥拉山羊及其杂种羊的饱养管理技术

对凉山和茂县两个安哥拉山羊试验点的生态条件与原地产生态条件比较表明，凉山点基本、茂县点完全能满足安哥拉山羊对生态条件的要求，根据安哥拉山羊的生物学特性，营养需要及国内外饲养管理经验，结合试验点的实际情况，制订并实施了安哥拉山羊及其杂种羊以“放牧为主，辅以舍饲相结合”的饲养管理模式，放牧饲养管理日程、补饲饲饲料的种类及定额、定期预防注射和驱虫、建筑适宜的羊舍及设备等技术措施，为提高安哥拉山羊及其杂种羊的生产性能提供了饲养管理技术上的保证。     

安哥拉山羊改良建昌黑山羊高代杂种羊血液生化遗传标记的研究

采用ＰＡＧＥ法检测Ｆ３的Ｈb、Ｔf、Hp,Pr,Alb、Po、ＬＤＨ、Ａkp和Amy等基因座的多态性和相关分析。研究结果表明,Ｆ３的Hb、Ｔf、Hp、Ａkp呈多态,Ａlb、Pr、Ｐr、Ｐo、ＬＤＨ、Ａmy呈单态;ＬＤＨ同工酶相对活力顺序为ＬＤＨ１＞ＬＤＨ３＞ＬＤＨ２＞ＬＤＨ４＞ＬＤＨ５;Ｆ３与安哥拉山羊Ａkp基因型分布差异显著（Ｐ＜０．０５）,与建昌黑山羊差异极显著（Ｐ＜０．０１）;平均基因杂合度安哥拉山羊最高,Ｆ３次之,建昌黑山羊最低,Ｆ３与安哥拉山羊的遗传相关系数大,遗传距离小;ＬＤＨ１的相对活力与净毛率呈极负相关（Ｐ＜０．０１）,ＬＤＨ５与两型毛根数百分比呈显著正相关（Ｐ＜０．０５）、与两型毛重量百分比呈极显著正相关（Ｐ＜０．０１）、、与无无髓毛伸度呈极显著负相关（Ｐ＜０．０１）,ＬＤＨ其他各要带的相对活力与产毛性状无显著相关。     

胞内型磷脂酶A2基因亚克隆与基因表达

目的 研究花生四稀酸在细胞中的释放及前列腺素的合成,构建与花生四稀酸释放相关的表达系统。即胞内型磷脂酶Ａ２（ｃｙｔｏｓｏｌｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ ｃＰＬＡ２）ｃＤＮＡ－ｐＲＣ／ＣＭＶ。方法 从克隆载体ｐＭＴ２用Ｓａｌ１制备ｃＰＡＬ２ｃＤＮＡ;平末端连接ｃＰＡＬ２－ｐＲＣ／ＣＭＶ;转染鼠巨噬细胞及筛选正向阳性克隆;ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ｃＰＬＡ２ ｃＤＮＡ基因表达。结果 人ｃＰＬＡ     

丙型肝炎病毒核酸疫苗的研究

从丙型肝炎病人的阳性血清中提取出丙型肝炎病毒ＲＮＡ，通过ＲＴ－ＰＣＲ的方法获得丙型肝炎病毒Ｃ区基因片段。并将此片段克隆到真核细胞表达载体ｐｃＤＮＡ３．１（＋），得到重组质粒ｐｃＤＮＡ－ＨＣＶ／Ｃ，再将其通过肌肉注射免疫ＢＡＬＢ／小鼠后，小鼠产生了抗ＨＣＶ／Ｃ区抗体。     

乌珠穆沁羊mtDNA的RFLP研究

用ＡｐａⅠ等７种识别６碱基的限制性内切酶研究了１４只乌珠穆沁羊ｍｔＤＮＡ的ＲＦＬＰ。结果表明,在所研究的个体中检测到３７个酶切位点,１７种限制性态型,其中ＢａｍＨⅠ和ＢｇｌⅠ表现出多态,ＸｈｏⅠ无切点。１７种限制性态型可归结为３种基因单倍型,即单倍型Ⅰ（ＢａｍＨⅠ－Ｃ,ＢｇｌⅠ－Ａ）、单倍型Ⅱ（ＢａｍＨⅠ－Ａ,ＢｇｌⅠ－Ａ）和单倍型Ⅲ（ＢａｍＨⅠ－Ｃ,ＢｇｌⅠ－Ｂ）。ｍｔＤＮＡ多态度π值为０．０２７％,表明乌珠穆沁羊ｍｔＤＮＡ多态性比较贫乏。     

安哥拉山羊的饲养管理技术

安哥拉山羊以放牧为主,在放牧场设有简陋的棚圈、剪毛场所、药浴池和清洁饮水处等。世界各国饲养安哥拉山羊,都是根据安哥拉山羊不同的年龄和生理状况,供给不同的营养。苏联饲养安哥拉山羊,怀孕母羊日粮营养价值为1.05饲料单位,可消化蛋白质为103.05克;哺乳期为1.18饲料单位和120.75克。美国根据放牧场,牧草的产量和质量,设计出不同年龄的安哥拉山羊,在不同季节的补饲配方。我国陕西黄土高原综合治理研究所,饲养安哥拉山羊,在冬季也制订出补饲标准。安哥拉山羊4月龄断奶,6～8月龄性成熟,18月龄配种,发情周期19～21天,发情持续时间22小时,怀孕期平均为149.2天。通常是秋季配种。自由交配公母比例为1:30～40。     

抗－DNA免疫复合物性质的研究

用聚乙二醇（ＰＥＧ）和硫酸铵从系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者血清中分离出免疫复合物（ＩＣ）和血浆核酸（ＰＮＡ）。分析结果表明，ＰＮＡ的主要成分是ＲＮＡ，仅有少量ＤＮＡ存在，并且ＰＮＡ中ＤＮＡ的ｄＧ＋ｄＣ含量（５５％）明显高于正常值（４２％）。一旦经过ＲＮａｓｅ处理，ＰＮＡ抑制抗－ＤＮＡ抗体结合ＤＮＡ的能力降低，说明抗－ＤＮＡ抗体和ＲＮＡ有交叉反应。动力学研究观察到，抗－ＤＮＡ免疫复合物中抗原抗体的分子比是１：１，结合能为３７ｋＪ／ｍｏｌ。这提示，除ＤＮＡ／抗－ＤＮＡ外，其他抗－ＤＮＡ免疫复合物也可能同ＳＬＥ患者的组织损伤有关。     

DNA指纹技术在马海毛山羊育种中的应用研究

以(CA/GATA/TCC)5探针，HinfI酶切，研究安哥拉山羊与建昌黑山羊杂交的亲本及其F2、F3的DNA指纹图谱.结果，在供试山羊中，个体平均检出18.2+0.4条谱带，安哥拉山羊F1，F2的鉴别机率分别为1.38×10-12，1.18×10-13，0.50×10-10；群体内相似系数安哥拉山羊为0.4539，F2为0.4077，F3为0.6111；亲子临定的父权概率W＝0.9889；安哥拉山羊与建昌黑山羊比较，2.3kb和8.6kb谱带为安哥拉山的特异谱带.     

西瓜种植物RAPD分析影响因子的研究

以西瓜种内的１２个品种（系）为模板ＤＮＡ,研究了影响ＲＡＰＤ扩增效果的因素。结果表明,模板ＤＮＡ、Ｔａｑ酶、随机引物、Ｍｇ２＋浓度以及ＰＣＲ反应程序在ＲＡＰＤ分析中都具有重要的作用。根据以上因子的研究结果,建立了适合西瓜种植物的ＲＡＰＤ分析的技术体系：１０μＬ反应液中,模板１０ｎｇ／１０μＬ,引物０５μｍｏｌ／Ｌ,ＴｒｉｓＨＣｌ（ｐＨ８３）５０ｍｍｏｌ／Ｌ,ＢＳＡ５００μｇ／ｍＬ,ＭｇＣｌ２２５ｍｍｏｌ／Ｌ,ＴａｑＤＮＡ０６Ｕ／１０μＬ,ｄＮＴＰｓ２００μｍｏｌ／Ｌ,１０％蔗糖４００和１ｍｍｏｌ／Ｌ甲酚红。     

山羊传染性胸膜肺炎的临床诊疗

分析了某羊场发生山羊传染性胸膜肺炎的发病情况、临床症状、解剖变化，针对山羊胚胎移植手术前后的临床表现，提出了山羊传染性胸膜肺炎的预防治疗方案，使该群羊的发病、死亡率得到了有效制，提高了羊胚胎移植的成活率。     

羊肠毒血症的发生与防治

从１９９６年９月下旬起，会理县鹿厂镇星火村的黑山羊陆续发病，至１９９６年１０月上旬，共发病２８只，死亡１５只．经临床症状观察、尸体剖解和实验室诊断，结合流行病学分析，确诊为羊肠毒血症．通过及时采取防治措施，控制了该病流行     

波尔山羊的胚胎移植技术及应用

利用发情控制技术，将超过正常数量波尔山羊的胚胎移植到普通白山羊的体内，妊娠、产仔，获得更多波尔山羊的后代，借此扩大波尔山羊的种群。     

克隆西农莎能奶山羊的微卫星DNA分析

目的利用微卫星DNA技术对通过体细胞克隆技术获得的两只西农莎能奶山羊进行鉴定。方法提取两只克隆西农莎能奶山羊、两只受体西农莎能奶山羊母羊、西农莎能奶山羊供体细胞和两只对照组西农莎能奶山羊母羊的基因组DNA,通过5对具有显著多态性差异的引物扩增微卫星DNA序列,并对其进行微卫星DNA分析。结果两只克隆西农莎能奶山羊和供体细胞的基因型完全一致,受体母羊和对照组母羊的微卫星DNA多态性则与前两者均不相同。结论两只克隆西农莎能奶山羊基因组DNA来源于供体细胞。     

美姑县巴普黑山羊血液生化指标测定

本文对凉山州美姑县巴普黑山羊血液中血磷、血钙、胆固醇等10项指标进行了测定。结果表明：母羊血液胆固醇含量显著高于公羊（P〈0．05）,其它9项指标公母羊差异不显著（P〉0．05）。血糖、血磷、血钙、血中氯化物、总胆固醇、GPT均高于国内外山羊测定值的变异范围。     

波杂羊规模化养殖的关键技术及效益分析

对湘西州近几年在山羊规模化养殖方面的成功经验进行归纳和总结,提出波杂羊规模化养殖的关键技术要点,并就养羊效益进行比较分析,以期进一步推动山区山羊产业的发展.     

山羊与岩羊间特异RAPD片段分析

在两组40个随机引物中，筛选出16个重复性好的多态引物，对山羊与岩羊闻RAPD片段分析表明，16个引物扩增出67条带，其中54条带表现多态，多态率80．60％，山羊各群体共有条带为23条，山羊和岩羊共有条带为13条，岩羊有4条特异带，不同引物所扩增出的片段在各群体中分布频率不同．岩羊特异RAPD片段，OPA-10724的序列与人类全基因组比较，同源的短序列较多，最太长度为86bp，唯有30bp的长度与绵羊ZFZ基因和牛ZFY基因内含子同源。     

应用波尔山羊提高成都麻羊产肉性能研究

通过波尔山羊与成都麻羊二元杂交试验，含波血75％、50％和25％的杂种羊，均比成都麻羊的产肉性能有明显的提高。在不同生长发育阶段,含波血75％和50％的杂种羊体尺和体重均极显著大于成都麻羊（P＜0．01）；含波血25％的杂种羊体尺和体重也多极显著大于成都麻羊（P＜0．01）。含波血75％，50％和25％的杂种羊，24月龄公羊体重比成都麻羊相应重30．9kg、25．6kg和3．6kg，分别提高78．6％、65．1％和9．2％，差异极显著（P＜0．01），母羊比成都麻羊相应重21．7kg 17.3kg和4．5kg，分别提高66．6％53．1％和13．8％，差异极显著（P＜0．01）。含波血75％，50％和25％的杂种羊的日增重，在哺乳期公羊比成都麻羊相应重67．4g、66．7g和15g，分别提高59．5％、58．9％和13．2％，母羊比成都麻羊相应重41．7g、50．0g和11．2g，分别提高38．5％、46．2％和10．3％。杂种羊日增重在4月龄内都还明显高于成都麻羊， 特别是含波血75％和50％的杂种羊更为突出，保持高速增重时间长，在周岁内日增重公羊是成都麻羊的2．8倍和3．0倍，母羊相应为2．1倍和2．3倍。杂种羊的繁殖性能与成都麻羊比较差异不大。含波血75％，50％和25％的杂种羊的产肉性能与成都麻羊比较提高非常明显，6月龄羯羊的胴体重分别比成都麻羊重5．9kg、5．0kg和2．5kg，屠宰率相应高8．4、6．4和3．8个百分点，净肉率分别高7．9、6．7和4．0个百分点，差异均极显著（P＜0．01）。     

四川黑山羊品种(群体)的RAPD标记研究

从5组24个随机引物中筛选出16个重复性好的多态引物,对四川9个黑山羊品种(群体)共计572只个体,进行随机扩增多态DNA(RAPD)标记研究.结果表明,16个引物扩增出125条带,其中102条带呈现多态,多态率为81.61%.不同引物扩增出的DNA片段在各品种(群体)中的分布频率不同.9个黑山羊品种(群体)间相似系数为0.7533～0.9642,遗传距离指数为0.0358～0.2467.引物OPQ-06(序列为GAGCGCCTTG)未在乐至黑山羊中扩增出900bpDNA片段,而在其他8个黑山羊品种(群体)中出现率均为1,可作为区分乐至黑山羊和其他8个黑山羊品种(群体)的分子遗传标记.引物OPK-03(序列为CCAGCTTAGG)未在江安黑山羊扩增出550bpDNA片段,在其他8个黑山羊品种(群体)中出现率均为1,可用于区分江安黑山羊和其他8个黑山羊品种(群体)的分子遗传标记.     

化学发光自显影免疫印迹法（Western Blotting）检测绒山羊皮肤组织中催乳素受体蛋白

采集不同季节绒山羊皮肤组织样品,提取总蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,将电泳结果转移到醋酸纤维薄膜,然后与催乳素抗体结合、辣根过氧化物酶标记二抗结合,后者作用于化学发光底物,暗室中置X-光胶片上自显影数分钟,经显影、定影,得到黑色曝光斑,根据胶片上曝光斑的位置确定出催乳素受体的分子量为87kD。根据不同时期样品黑斑的大小得出各时期催乳素受体表达量与绒毛生长趋势是一致的。