小鼠脊髓颈段一氧化氮合酶阳性神经元的分布研究

用NADPH-黄递酶组织化学方法观察小鼠脊髓颈段一氧化氮合酶阳性神经元(Nitric oxide synthase,NOS)的分布,结果显示在颈髓胶状质和中央管周围灰质内有较多一氧化氮合酶神经元分布,在前角基部内侧有较大的NOS神经元.后角浅层和中间带分别含有密集和中度密集的一氧化氮阳性纤维;在颈髓的前索白质和后索白质中也有一氧化氮合酶阳性神经元的分布,NOS阳性神经元的纤维较细,有串珠状膨大,相互交织成疏密不等的网络.这些神经元大多显示Golgi染色外观,它们尚不能与任何已知的神经递质类型神经元单一对应.     

一氧化氮合酶阳性神经元在小鼠颈髓的分布

用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法观察小鼠颈髓一氧化氮合酶阳性神经元的分布,结果显示在颈髓的胶状质和中央管周围灰质内有较多一氧化氮合酶神经元分布,在前角基部内侧有较大的ＮＯＳ神经元,这些神经元大多显示Ｇｏｌｇｉ样染色外观,它们尚不能与任何已知的神经递质类型神经元单一对应,后角浅层的中间带分别含有密集和中等密集的ＤＯＳ阳性纤维,一氧化氮合产阳性神经元的纤维较细,有串珠状膨大,相互交织成疏密度不等的网络。     

黑线姬鼠、小白鼠颈髓NOS阳性神经元的分布比较

用NADPH-黄递酶组织化学方法显示野生动物黑线姬鼠与实验动物小白鼠颈髓内一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的分布.结果显示在黑线姬鼠与小白鼠颈髓中央管周围灰质、后角浅层以及前角灰质都有密集的NOS阳性神经元.与小白鼠相比，黑线姬鼠颈髓NOS阳性神经元数量较多，胞体较大，分布较密集，呈强阳性反应.结果提示野生动物黑线姬鼠与实验动物小白鼠颈髓的这些种间差异与它们生存的环境、生活习性有很大关系.     

NOS阳性神经元在小鼠嗅球的形态与分布

目的:观察小鼠嗅球各层一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase,NOS)阳性神经元的形态与分布.方法:采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)法显示NOS阳性神经元在小鼠嗅球中的形态与分布.结果:NOS阳性细胞群主要位于嗅球边缘的嗅小球层和中央腔周围的颗粒层;强阳性神经元主要位于嗅球边缘的嗅小球层内;僧帽细胞层偶见深染的NOS阳性僧帽细胞和簇细胞;弱阳性神经元分布于内颗粒细胞层,浅染且形态较小.结论:小鼠嗅球内有NOS阳性神经元的表达,这种明显的分布可能与小鼠嗅觉灵敏有关,僧帽细胞层深染的NOS阳性僧帽细胞可能与小鼠对气味感知能力相关.     

大鼠胃幽门括约肌NOS阳性神经元的分布特异性

目的 :研究 NO能神经元在大鼠幽门括约肌的特异性分布状态及其功能。方法 :采用还原型辅酶 组织化学技术 ,在冰冻切片和胃—幽门—十二指肠连续全层标本上显示 NOS阳性神经元成分。结果 :幽门括约肌粘膜下丛及肌间神经丛均有 NOS阳性神经元分布。在与括约肌紧连的胃和小肠 ,胃的神经丛大而丛间距较大 ,神经纤维粗而稀疏 ,小肠神经丛小而密集 ,纤维较细。胃幽门括约肌大弯侧神经元胞体和神经纤维均明显比小弯侧多 ,而前、后壁之间无明显差异。结果 :幽门括约肌舒缩功能活动除接受两侧胃肠的神经及其递质调控外 ,而其自身含有内在的 NO能神经元也具有直接的自主活动功能。     

脑缺血大鼠大脑皮质IGF-Ⅱ免疫阳性神经元的变化及复方丹参的影响

目的:观察脑缺血大鼠大脑皮质胰岛素样生长因子II(IGF-II)免疫阳性神经元的变化,并探讨复方丹参的抗缺血机制。方法:双侧颈总动脉结扎建立永久性脑缺血模型,复方丹参腹腔内注射后用ABC法显示IGF-II免疫阳性神经元并进行定量分析。结果:大鼠大脑皮质II-V层有较丰富的IGF-II免疫阳性神经元分布,阳性细胞多见一个细长的突起。对照组大鼠阳性神经元分布较均匀、不密集,60、120、180 d光密度无明显变化;脑缺血组大鼠60 d时密集,较对照组增多明显,光密度增高,但120、180 d数量有所减少,光密度下降,但仍多于对照组。生理盐水处理组IGF-II免疫阳性神经元的变化与单纯缺血大鼠对应时间点相似,用丹参处理后60 d,阳性神经元的数量较缺血组和生理盐水处理组数量减少,光密度未见明显差异,120 d时数量仍然较密集,多于对照组,180 d进一步减少,接近对照组,但多突起的阳性细胞多见。结论:脑缺血性刺激可诱导大鼠大脑皮质IGF-II免疫阳性神经元增多,丹参干预后IGF-II免疫阳性神经元未见明显增多,但表达IGF-II免疫阳性神经元形态特征发生变化。     

不同动物小肠肌间神经丛内NOS神经元分布的比较

采用NADPH-黄递酶组织化学法对草鱼、牛蛙、家鸡和大鼠小肠肌间神经丛内NOS阳性神经元的分布进行了比较研究．结果表明，NOS阳性产物在草鱼肌间神经丛中未见分布，而在其它几类动物中阳性反应明显．但在不同动物NOS阳性神经元的形态、分布、密度及神经纤维的分布存在差异．在牛蛙、家鸡和大鼠的小肠肌间神经丛中，NOS阳性神经元的分布从分散到集中，形态呈现由不规则形到规则形再到不规则形的复杂变化；神经节从无到有，神经网络由不发达趋于发达；而在每种动物中，NOS阳性神经元的密度沿肠道由前向后基本呈上升趋势，这种节段性的差异牛蛙极显著，家鸡和大鼠则不甚显著．实验结果提示，随着动物的进化，一氧化氮能神经元在肠肌间神经丛中的分布也更加复杂而有序，从而使胃肠道的调节更加精确．     

刺猬嗅球一氧化氮合酶阳性神经元的分布和形态

用依赖还原型辅酶Ⅱ的黄递酶（NADPH-d）组织化学方法显示NOS阳性神经元在刺猬嗅球的分布和形态，观察野生刺猬嗅球内一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的分布和形态．结果显示：NOS阳性神经元在刺猬嗅球内广泛分布。强阳性神经元主要位于刺猬嗅球边缘的突触小球层，小球周细胞也有NOS强阳性表达；偶见深染的NOS阳性僧帽细胞；内颗粒细胞层有大量浅染且较小的NOS阳性神经元．结论：刺猬是敏嗅动物．其嗅球中的NOS阳性神经元分布状态可能与嗅觉灵敏度相关。     

大白鼠海马神经元NOS与AChE活性的研究

目的:观察大白鼠海马不同亚区一氧化氮合酶(NOS)与乙酰胆碱酯酶(AChE)阳性神经元的活性。方法:分别采用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)和乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学方法对大白鼠海马不同亚区NOS和AChE阳性神经元的分布以及活性进行研究。结果:海马不同亚区均含有NOS和AChE阳性神经元,其中CA2区NOS呈强阳性反应,CA3区AChE呈强阳性反应。结论:实验表明,NOS和AChE阳性神经元广泛分布于大白鼠海马不同亚区,为进一步探讨海马的学习记忆功能机制提供了形态学佐证。     

IL-6对大鼠脑缺血再灌注后海马及纹状体NOS和Fos表达的影响

目的 :研究IL 6对大鼠脑缺血再灌注 (CIRF)后海马及纹状体的NOS和Fos阳性神经元表达的作用。方法 :采用大脑中动脉栓塞法 (MCAO)对 2 4只Wistar大鼠左侧大脑中动脉构成CIRF模型的基础上分两组 :即单纯CIRF对照组 (n =8) ;经同侧脑室事先注入IL 6的实验组 (n =16)。分别进行NADPH脱氢酶反应显示NOS和免疫组织化学染色显示Fos表达。观察了CIRF后 1、2、4、6小时海马及纹状体处NOS和Fos阳性神经元数量的变化 ,以及IL 6对其变化的影响。结果 :大鼠CIRF后纹状体缺血中心区缺少NOS和Fos的表达 ,而纹状体周围区NOS和Fos阳性神经元明显增加 ;海马各部NOS和Fos阳性神经元均明显增加 ,其中CA1区增加最显著。但预先经侧脑室注射IL 6的实验组中 ,大鼠海马及纹状体NOS和Fos阳性神经元明显低于对照组。IL 6明显抑制了NOS及Fos表达。结论 :提示IL 6可能参与脑缺血性神经元损伤的调控作用     

一氧化氮合酶在猕猴中枢神经系统中的表达

研究神经元型一氧化氮合酶(NOS1)在灵长类动物中枢神经系统中的表达．方法：采用免疫组织化学技术，观察了一氧化氮合酶在正常猕猴脑和脊髓中的表达．结果表明NOS1阳性神经元分布于中枢神经系统的广泛区域，包括大脑皮质、海马、齿状回、尾壳核、纹状体、小脑皮质、脊髓前角、后角和中央灰质与中枢神经系统的诸多功能有关．     

扬子鳄胚胎脊髓胸段的组织发生

用尼氏染色及Ｈａｇｇｑｖｉｓｔ染色法观察了２４例孵育３～６２天的扬子鳄胚胎的脊髓胸段组织发生过程。孵育第３天,脊髓横断面近圆形,中央管呈长椭圆形。第６天脊髓呈卵圆形,中央管呈窄而长的梭形,套层明显。第１２天,脊髓灰质的腹角明显,脊髓外周出现一薄层白质。第１８～３０天中,灰质腹角进一步扩大,背角逐渐形成。两侧背角不断向正中靠拢并合并,中央管缩小呈圆形。白质明显增厚并形成背索、侧索和腹索。第３０～６２     

大鼠坐骨神经切断后经皮低频高强度电刺激相应脊髓节段中GAP-43表达的变化

目的探讨成年Wister大鼠在坐骨神经切断后GAP-43于相应脊髓节段前角运动神经元内的表达变化.方法选取健康成年雄性Wister大鼠60只,将坐骨神经切断,随机分为实验组和对照组,实验组给予经皮低频高强度电刺激,分别于术后1,2,4,8,12,16周处死,取其L4~L6脊髓,利用免疫组织化学技术检测GAP-43在相应脊髓节段中的表达变化,并利用影像分析系统进行统计学分析.结果对照组:1周时前角细胞胞体内GAP-43有明显表达,4周时达到高峰,5~8周时逐渐下调,9~16周时GAP-43在前角细胞胞体内中仍有少量表达,并呈弱阳性.实验组:1周时前角细胞胞体内GAP-43有明显表达,2周时达到高峰,且在4~16周时在神经元中仍有表达,并呈阳性.结论坐骨神经切断可导致成年大鼠相应脊髓节段中前角运动神经元GAP-43表达明显增加,可证明在周围神经损伤后神经元的再生能力增强,但时效很短.而给予低频高强度电刺激疗法后,GAP-43的表达在时长和量上都有明显增加.     

电针治疗对脑梗死大鼠nNOS免疫阳性神经元表达的影响

目的 :研究电针对脑梗死大鼠尾壳核、海马CA1区缺血半影 (IP)区神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)免疫阳性神经元的影响 ,为探讨针刺治疗脑梗死神经机制提供实验依据。方法 :采用线栓法建立大鼠永久性大脑中动脉栓塞的脑梗死模型 ,分为缺血组和缺血 +电针组 ;用免疫组化的方法观察尾壳核、海马CA1区IP区nNOS免疫阳性神经元表达的变化。结果 :(1)缺血组 :缺血 1d ,尾壳核IP区nNOS免疫阳性神经元深染固缩 ;缺血 7d后 ,阳性神经元数目增加 (P <0 0 5 ) ;在海马CA1区IP区 ,缺血 1d ,阳性神经元分布广 ;缺血 7d ,数目减少 (P <0 0 5 ) ;缺血 14d ,数目较缺血7d时增加 (P <0 0 5 )。 (2 )缺血 +电针组 :尾壳核IP区nNOS免疫阳性神经元数目较缺血组增加(P <0 0 5 ) ;在海马CA1区IP区 ,电针 1d ,阳性神经元分布局限 ,数目较缺血组减少 (P <0 0 1) ,电针 7d后 ,数目较缺血组增多 (P <0 0 5 )。结论 :电针对nNOS免疫阳性神经元调节具有双重性。既能减少电针 1d时海马IP区nNOS表达 ,减轻一氧化氮 (NO)的毒性作用 ;又能加速海马 (电针 7、14d)、尾壳核IP区nNOS表达的恢复     

人胎颈交感节肽能神经元的免疫细胞化学的研究

取１６例２４～３２周龄的死亡人胎作材料，用免疫细胞化学方法，于光镜下观察到颈上神经节（简称颈上节）和星状神经节（简称星状节）中存在含血管活性肠肽（ＶＩＰ）神经元和纤维，含生长抑素（ＳＯＭ）神经元和纤雏以及含Ｐ物质（ＳＰ）纤维，但未发现含ＳＰ神经元。二节中的含ＶＩＰ神经元和含ＳＯＭ神经元形状多种，免疫反应染色深浅不等，颈上节以大、中型细胞为主，而星状节以中、小型细胞居多。上述神经元类型和分布未有明显的胎龄变化。结果揭示颈交感神经节中，含ＶＩＰ和含ＳＯＭ神经元在出生前已经发育。ＶＩＰ、ＳＯＭ和ＳＰ３种神经肽在胎儿期已作为神经传导物或神经调节物而发挥功能。     

乌鳢尾部神经分泌系统组织化学和HRP法研究

采用辣根过氧化物酶(HRP)法结合乙酰胆碱酯酶(AChE)和单胺氧化酶(MAO)组化方法,对乌鳢尾部神经分沁系统进行了研究。结果如下: 1.在尾部脊髓中可以观察到一些HRP标记的神经分泌细胞和HRP标记末梢。有些标记末梢终止于脊髓中央管,少量终止于腹面脊膜。尾垂体中也有许多HRP标记末梢。2.神经分泌细胞细胞体中的HRP颗粒在电镜下呈圆形、短管状和哑铃状。3.神经分泌细胞体显示AChE活性,并定位于核膜、粗面内质网上。4.神经分泌细胞体周围尚显示MAO活性。     

Sensory transmitters regulate intracellular calcium in dorsal horn neurons

Primary afferent terminals in the dorsal horn of the spinal cord release excitatory amino acid and peptide transmitters that initiate the central processing of nociceptive information. The postsynaptic actions of amino acid transmitters on spinal neurons have been well characterized, but the cellular basis of peptide actions remains unclear. Substance P is the best characterized of the peptides present in sensory neurons and has been shown to depolarize dorsal horn neurons and to facilitate nociceptive reflexes. To determine the mechanisms by which substance P contributes to afferent synaptic transmission, we have monitored the levels of intracellular calcium in single isolated rat dorsal horn neurons and report that substance P can produce a prolonged elevation in calcium concentration by mobilizing its release from intracellular stores. This elevation may contribute to the long-term changes in the excitable properties of dorsal horn neurons that occur following afferent fibre stimulation. We have also found that L-glutamate elevates intracellular calcium in substance P-sensitive dorsal horn neurons by increasing calcium influx. These results provide a direct demonstration of intracellular calcium changes in response to neuropeptides in mammalian central neurons. They also indicate that there is convergent regulation of intracellular calcium in dorsal horn neurons by two different classes of sensory transmitters that are co-released from the same afferent terminals.     

Functional regeneration of sensory axons into the adult spinal cord

The arrest of dorsal root axonal regeneration at the transitional zone between the peripheral and central nervous system has been repeatedly described since the early twentieth century. Here we show that, with trophic support to damaged sensory axons, this regenerative barrier is surmountable. In adult rats with injured dorsal roots, treatment with nerve growth factor (NGF), neurotrophin-3 (NT3) and glial-cell-line-derived neurotrophic factor (GDNF), but not brain-derived neurotrophic factor (BDNF), resulted in selective regrowth of damaged axons across the dorsal root entry zone and into the spinal cord. Dorsal horn neurons were found to be synaptically driven by peripheral nerve stimulation in rats treated with NGF, NT3 and GDNF, demonstrating functional reconnection. In behavioural studies, rats treated with NGF and GDNF recovered sensitivity to noxious heat and pressure. The observed effects of neurotrophic factors corresponded to their known actions on distinct subpopulations of sensory neurons. Neurotrophic factor treatment may thus serve as a viable treatment in promoting recovery from root avulsion injuries. I