气升式反应器中红豆杉细胞培养动力学的研究

设计了８Ｌ规模的气升式生物反应器,应用该生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,经３０ｄ培养,细胞鲜重达２６ｇ／Ｌ,干重细胞紫杉醇含量达１．１７×１０－３ｇ／ｇ,建立了细胞生长动力学模型．结果表明该生物反应器适合红豆杉细胞的生长、代谢和产物合成．     

电导率法监测红豆杉细胞的生长

对红豆杉细胞在２５０ｍＬ和２Ｌ摇瓶及１０Ｌ反应器中的生长情况进行了研究。应用电导率法监测红豆杉细胞的生长,得出在红豆杉细胞悬浮培养的细胞生物与培养液电导率变化的相关性。     

中国红豆杉悬浮细胞高密度培养

采用３０ｇ／Ｌ起始糖浓度,通过在细胞对数生长后期补料的方法成功地在２５０ｍＬ摇瓶和１．５Ｌ搅拌式生物反应器中进行了细胞高密度培养,经２０ｄ培养,细胞干重超过２５ｇ／Ｌ。在反应器培养中,次生代谢产物紫杉烷的产量较低。通过高密度培养,明显增加了细胞量,还可以提高反应器中紫杉烷的产量。     

中国红豆杉悬浮细胞固定化培养生产紫杉醇

对海藻酸钠包埋法固定中国红豆杉悬浮细胞的条件进行研究,建立了一套合适的固定化操作条件,即海藻酸钠浓度为３０ｇ／Ｌ,聚乙烯醇（ＰＶＡ）浓度为８０ｇ／Ｌ,ＣａＣｌ２浓度为２０ｇ／Ｌ,包埋密度为０．２ｋｇ／Ｌ,接种密度为０．１ｋｇ／Ｌ．在此基础上,对中国红豆杉细胞固定化培养的培养基进行了优化,结果表明,从红豆杉树皮中分离出的真菌培养物作为诱导物能限制细胞生长,且明显促进紫杉醇合成,并诱导紫杉醇分泌到培养液中．在培养基中适量地添加前体亦能提高紫杉醇的产量．对红豆杉细胞固定化培养中紫杉醇合成与分泌进行了动力学研究．     

红豆杉细胞植板方法的研究

在红豆杉细胞植板中,适宜的培养基是优化的ＭＳ培养基,其中ＮＡＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ,６ＢＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ;培养细胞生长周期约４０ｄ;培养基中最优碳源浓度是：蔗糖３０ｇ／Ｌ、葡萄糖１０ｇ／Ｌ．无机盐最佳浓度是：ＮＨ＋４１０ｍｍｏｌ／Ｌ,ＮＯ－３４０ｍｍｏｌ／Ｌ,ＰＯ３－４１．２５ｍｍｏｌ／Ｌ．研究表明,培养基的ｐＨ值与植板率密切相关．氨基酸及维生素等有机成分能明显促进细胞生长．来自细胞悬浮培养物的条件培养基能显著地促进红豆杉培养细胞的单细胞在低密度植板时的克隆形成     

双载体固定化中国红豆杉细胞的初步研究

对采用海藻酸钠和聚乙烯醇（ＰＶＡ）混合的双勒体包埋中国红豆杉悬浮细胞的条件进行了初步研究,建立了一套合适的国家化细胞条件,海藻酸钠浓度为３０ｇ／Ｌ,聚乙烯醇（ＰＶＡ）浓度为７０ｇ／Ｌ,ＣａＣｌ２浓度２０／Ｌ,包埋浓度为０．１８ｇ／Ｌ,接种密度为０．１２ｇ／Ｌ,在此基础上,对中国红豆杉细胞固定化２的培养基进行了优化,实验结果表明,从红豆杉树皮中分离出的真菌物作为诱导物能限制细胞生长,且明显促进紫杉醇     

红豆杉细胞在反应器中培养动力学的研究

应用气升式生物反应器及搅拌式生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,得到细胞生长和紫杉醇合成动力学曲线.经过反应器动力学的比较,结果表明红豆杉细胞较适于在机械搅拌式反应器中培养.     

不同类型光生物反应器的螺旋藻培养特性研究

采用了５种不同类型光生物反应器进行螺旋藻分批培养,发现在相同条件下：光强１００００ｌｘ,温度２５℃,以气升式外循环光生物反应器与鼓泡柱式光生物反应器效果较好,细胞干重分别为２．４３ｇ／Ｌ和２．１５ｇ／Ｌ;当光强为１５０００ｌｘ时,干重可达５．０７ｇ／Ｌ和２．７３ｇ／Ｌ。     

红豆杉细胞植板方法的研究

在红豆杉细胞植板中、适宜的培养基是优化的ＭＳ培养基,其中ＮＡＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ,６ＢＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ,培养细胞生长周期为４０ｄ;培养在中最优碳源浓度是：蔗糖３０ｇ／Ｌ,葡萄糖１０ｇ／Ｌ,无机盐最佳浓度是：ＮＨ＾＋４１０ｍｍｏｌ／Ｌ,ＮＬ＾－３４０ｍｍｏｌ／Ｌ,ＰＯ＾３－４１．２５ｍｍｏｌ／Ｌ。研究表明,培养基的ｐＨ值与植板率在。氨基酸及维生素等有机成分能明显促进细胞生长。     

连续灌注培养红豆杉细胞生产紫杉醇的研究

利用由一圆形柱和三角瓶组成的生物反应器对红豆杉细胞进行连续灌注培养，结果显示，培养基的pH值，糖和磷的变化幅度较平缓，细胞的生长期长，说明该反应器适于细胞生长，根据该反应器具有培养液提取简便的特点，首次提出诱导子可按照培养基中残糖和残磷的体积质量加入，而且发现高含量紫杉醇仅发生在特定的残糖和残磷体积质量下，结果还显示该反应器用于诱导和萃取结合处理细胞，与搅拌式和气升式反应器相比，得到较高的生物量和紫杉醇产量，这些结果表明该反应器可用于连续灌注培养红豆杉细胞生长紫杉醇。     

红豆杉离体培养染色体数变异与细胞多核现象

分别对在固体培养基上静止培养和在摇瓶、１０Ｌ及１００Ｌ生物反应器内悬浮培养的红豆杉茎尖和根尖离体细胞进行染色体数目观察,发现其染色体数目主要类型和亲本株相同,为２ｎ＝２４,且存在较大比例的染色体数目变异的细胞．还发现,离体培养红豆杉细胞有丝分裂间期存在多核现象．认为染色体数目的变异可能是红豆杉离体培养细胞紫杉醇产量不稳定的主要原因．     

循环磁处理对螺旋藻培养影响的研究

采用循环磁处理技术强化螺旋藻的生长过程,重点探讨了螺旋藻磁处理培养的生长特性．研究发现,当Ｈ＝０～３２０ｋＡ／ｍ时,适当的恒定磁场处理可明显加快螺旋藻的生长速度,提高其细胞浓度．采用气升式循环磁处理光生物反应器分批培养螺旋藻,当温度θ＝２８～３０℃,光照度Ｅ＝１６ｋｌｘ时,较佳的磁处理强度Ｈ＝２００ｋＡ／ｍ,藻液切割磁力线的速度ｖ＝０．１５ｍ／ｓ,此时第６天便可达到最大细胞浓度２．７６ｇ／Ｌ（干重）,比同期非磁处理培养时的产量增加了４６．８％,与非磁处理培养时的最大细胞浓度２．２６ｇ／Ｌ（干重）相比,磁处理的最大细胞干重提高了２２．１２％,达到最大细胞干重的时间提前了２天．可见,循环磁处理培养开辟了微藻培养的新途径．     

中国红豆杉悬浮细胞固定化增减生产紫杉醇

对海藻酸钠包埋法固定中国红豆杉悬浮细胞的条件进行研究,建立了一套合适的固定化操作条件,即海藻钠浓度为３０ｇ／Ｌ聚乙烯醇浓度为８０ｇ／Ｌ,ＣａＣｌ２沈度为２０ｇ／Ｌ,包埋密度为０．２ｋｇ／Ｌ,接种密度为０．１ｋｇ／Ｌ。     

电导率法监测红豆杉细胞的生长

对红豆杉细胞在 2 5 0mL和 2L摇瓶及 1 0L反应器中的生长情况进行了研究 .应用电导率法监测红豆杉细胞的生长 ,得出在红豆杉细胞悬浮培养的细胞生物量与培养液电导率变化的相关性 .     

生物量对黄花蒿悬浮培养细胞生长的影响

黄花蒿细胞悬浮培养过程中，分别以１０、３０、６０、８０ｇ／Ｌ的接种量进行细胞生长的对比实验．在所述培养条件下的最适起始细胞浓度为鲜重６０ｇ／Ｌ培养基．起始培养的细胞浓度直接影响细胞的生长周期增殖倍数．起始浓度越高，细胞生长周期越短，但细胞的增殖倍数越小．起始细胞浓度对黄花蒿悬浮培养细胞对数生长期的比生长速率影响不大．     

种子细胞的生长时相和紫杉醇生产的关系研究

处在生长周期不同时相的红豆杉细胞作为种子细胞,接入含来自红豆杉树皮的真菌诱导子的生产培养其中,紫杉醇的生产和种子细胞的生长时相有明显的对应关系。来自对数生长后 稳定前期的细胞,胞内紫杉醇分别为２６．８μｇ．ｇ＾－１和５８．１μｇ．ｇ＾－１;来自稳定后期的细胞对诱导子反应最敏感,     

草地贪夜蛾（Spodoptera furgiperda）在生物反应器中 …

对草地贪夜蛾（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒａｇｉｐｅｒｄａ）Ｓｆ－９细胞在２－Ｌ Ｂｉｏｓｔａｔ＾Ｒ ＭＤ型搅拌式生物反应器中进行了培养,并对细胞的生长状况、葡萄糖的消耗进行了测定;对重组病毒的增殖、外源基因的表达进行了初步。结果表明：细胞在该生物反应器中生长良好,细胞群体倍增时间３３．４ｈ病毒感染率大约在８９．８％以上,并在细胞中成功地了半乳糖苷酶原因。     

红豆杉愈伤组织的诱导和培养

研究了不同的基本培养基、不同的激素种类和不同的种植体对红豆杉愈伤组织诱导的影响。实验结果表明,在愈伤组织诱导中,２ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ的诱导效果优于２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ,枝段的诱导率高于叶片。Ｂ５和ＨＥ培养基利于愈伤组织的诱导,Ｂ５和６,７－Ｖ培养基利于愈伤组织的生长,其平均生长速率分别为０．９９ｇ／（Ｌ·ｄ）和０．６０ｇ／（Ｌ·ｄ）。     

红豆杉细胞悬浮培养及动力学研究

对红豆杉细胞在５Ｌ通气机械搅拌式反应器中的培养过程及动力学进行了研究。经２４ｄ培养，细胞生物量增加３倍，紫杉醇含量可达细胞干重的１．０３５×１０＾－３，建立了描述细胞生长过程的模型，采用分段多项式函数逼近关联ｕ与ｕｍ的函数Ｆ（ｓ），建立了描述产物合成的动力学方程，采用多项式函数逼近关联产物合成速率与细胞生长速率的函数，确定了部分动力学参数。     

草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞在生物反应器中培养条件初探

对草地贪夜蛾（ Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ） Ｓｆ ９ 细胞在２ Ｌ Ｂｉｏｓｔａｔ Ｒ Ｍ Ｄ 型搅拌式生物反应器中进行了培养,并对细胞的生长状况、葡萄糖的消耗等进行了测定;对重组病毒的增殖、外源基因的表达进行了初步探索．结果表明：细胞在该生物反应器中生长良好,细胞群体倍增时间３３．４ ｈ．病毒感染率大约在 ８９．８％ 以上,并在细胞中成功地表达了半乳糖苷酶基因