多重PCR检测病死鸡中沙门氏菌方法的研究

为了建立能够同时检测病死鸡样品中的沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的多重PCR 方法.采用煮沸法提取 DNA 做为模板,选择分别针对沙门氏菌属、鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的特异性基因(invA、fliC、sdfⅠ)设计引物,优化反应体系和反应参数,建立多重PCR检测方法.应用该方法对国内17家鸡场369份病死鸡样品进行沙门氏菌的检测,检测结果与传统细菌培养法的结果进行比较.结果表明,优化过的多重 PCR 可同时对沙门氏菌种、属进行鉴定,灵敏度为4.6×102 CFU/mL;多重 PCR 方法共检测出沙门氏菌34株,其中鸡白痢沙门氏菌21株、肠炎沙门氏菌5株,与传统细菌培养法检测结果的符合率分别为91.2%、90.5%和80.0%.     

禽康对鸡肠道性疾病的防治效果研究

根据中兽医学的基本理论和多年临床实践,筛选出一种纯中药制剂—禽康,用于防治鸡肠道性疾病,取得了满意的治疗效果.试验表明：该制剂对鸡白痢、沙门氏菌、大肠杆菌病具有显著的防治效果,能提高机体免疫功能,并能促进雏鸡生长,提高产蛋率,具有明显的经济效益和社会效益,在临床上具有较大的推广应用价值.     

人工孵化后期死亡鸡胚的细菌分离试验

对后期死亡鸡胚的卵黄囊和肝脏进行细菌分离纯化,通过化生试验进行初步鉴定,在15枚死胚中,大肠运往希氏菌（Escherichia Coli)的检出率为33．3％,鸡白痢沙门氏菌（Salmonella Pullorum)检出率为40％。     

鸡白痢沙门氏菌直接-多重PCR检测体系的建立

通过对鸡白痢沙门氏菌毒力质粒pSPUV上入侵质粒抗原J蛋白和质粒共转移调控因子的编码基因ipaJ和traJ的序列分析,在特异区域设计PCR引物,经沙门氏菌属不同种及常见肠道致病菌的交叉验证,筛选出三对鸡白痢沙门氏菌特异检测引物ipaJ-417、traJ-387、traJ-476.并且调试出一种利用两种DNA聚合酶的直接三重PCR检测体系:invA-211/traJ-387/16S-495,可以对鸡白痢沙门氏菌进行快速准确的鉴定.     

鸡沙门氏菌与大肠杆菌混合感染症的病原分离鉴定

对某鸡场送检的60日龄患呼吸道病的病鸡进行病理剖检及细菌分离鉴定。采用微生物学方法鉴定出沙门氏菌和大肠杆菌,确定该病是由两种细菌感染引起的。药敏试验指导用药,投以呋喃妥因、氧氟沙星治愈。药物治疗效果与药敏试验结果一致。     

某鸡场鸡传染性法氏囊病弱毒疫苗饮水免疫后发生…

１９９１年４月上旬，四川某鸡场对３５７０只１３日龄依莎雏鸡作法氏囊病弱毒疫苗饮水免疫，１４日龄时发病死亡９只，到２３日龄９天内共死亡８１４只，病死率达２２．８％对２０只送检病死鸡的沙门氏菌分离率为１／２０株（５％）。但病料人工感染小白鼠试验为阴性，证明非病原菌所致。用病料与新城疫血清作用后接种非免疫健康鸡１组的存活率为７５％，直接接种未与新城疫血清作用病料的２组存活率为５０％。剖检回归本动物试验自     

活菌制剂对雏鸡白痢沙门氏菌的体外拮抗及预防效果试验

从健康鸡的新鲜粪便中分离到乳酸杆菌和粪链球菌,佐以地衣芽孢杆菌,按不同比例制成活菌制剂。比较其对雏鸡白痢沙门氏菌的体外拮抗作用。结果表明,复合菌的组合适宜,对雏鸡白痢沙门氏菌的生长有很强的抑制作用。用此复合菌培养物预防人工感染的雏鸡白痢病,其预防保护率为８５％。     

鸡白痢沙门氏菌O12特异性噬菌体的分离及生物学特性研究

采用双层平板培养法从成都某养鸡场的污水样本中分离得到一株鸡白痢沙门氏菌O12 (宿主菌)的噬菌体(Ph-1), 并对菌斑形态及理化特性进行了初步研究. 试验结果显示, 纯化后该噬菌体的噬菌斑直径约3mm; 经高于60℃温度处理1h 后噬菌体失活; PH5-7时该噬菌体可保持较高效价和较强的紫外线耐受性; 该噬菌体的最佳感染复数(MOI)为 0.01-0.001; 一步生长曲线显示该噬菌体的潜伏期为40min, 裂解期持续60min.     

鸡白痢沙门氏菌O12特异性噬菌体的分离及生物学特性研究

采用双层平板培养法从成都某养鸡场的污水样本中分离得到一株鸡白痢沙门氏菌O₁₂(宿主菌)的噬菌体(Ph-1), 并对菌斑形态及理化特性进行了初步研究. 试验结果显示, 纯化后该噬菌体的噬菌斑直径约3mm; 经高于60℃温度处理1h 后噬菌体失活; PH5-7时该噬菌体可保持较高效价和较强的紫外线耐受性; 该噬菌体的最佳感染复数(MOI)为 0.01-0.001; 一步生长曲线显示该噬菌体的潜伏期为40min, 裂解期持续60min.     

鸡白痢沙门氏菌O_(12)特异性噬菌体的分离及生物学特性研究

采用双层平板培养法从成都某养鸡场的污水样本中分离得到一株鸡白痢沙门氏菌O12(宿主菌)的噬菌体(Ph-1),并对菌斑形态及理化特性进行了初步研究.试验结果显示,纯化后该噬菌体的噬菌斑直径约3mm;经高于60℃温度处理1h后噬菌体失活;PH5-7时该噬菌体可保持较高效价和较强的紫外线耐受性;该噬菌体的最佳感染复数(MOI)为0.01-0.001;一步生长曲线显示该噬菌体的潜伏期为40min,裂解期持续60min.     

鸡与鹌鹑杂交种早期胚胎发育特异表达基因的初步筛选

利用mRNA差异显示技术，对入孵67～91h的鸡（♀）与鹌鹑（♂）杂交种胚胎中mRNA差异表达进行比较，筛选出与杂交种胚胎早期发育相关的特异表达基因，并克隆测序这些序列，分析这些基因在杂交受精蛋早期胚胎发育中的作用，及其对杂交种早期胚胎死亡是否有影响。分析结果表明，已经获得6个杂交种孵化不同时期的基因片段与鸡的mRNA序列具有高度同源性。其中，孵化第72h时胚胎mRNA表达的序列与鸡雌激素受体结合位点相关抗原mRNA具有高度同源性，孵化第79h时产生的差异片段经过比对，发现：与鸡（♀）肽酰-脯氨酰异构酶类似的mRNA序列具有高度同源性。而杂交种胚胎发育到第72h时，可检测到鸡雌激素受体结合位点相关抗原mRNA的表达，比前人所得到的表达时间（胚胎发育在第84h时检测到）提前了12h，这很可能是造成杂交种早期胚胎大量死亡的原因之一。     

十种中草药对雏沙门氏菌的体外抑菌试验

采用琼脂平板打孔法、牛津杯法和药敏片法,检测鸡矢藤、地骨皮、白头翁、大青叶、蒲公英、五味子、乌梅、艾叶、黄连、丹参10种中草药对雏沙门氏菌的体外抑菌效果,并从中筛选具有较好体外抑菌作用的单味中草药。结果表明,五味子和乌梅对雏沙门氏菌的抑菌效果敏感性较强,丹参和黄连的敏感性一般,其他6种中草药均不敏感。试验结果表明,五味子和乌梅等对雏沙门氏菌具有一定的抗菌作用,且不同的中草药抑菌效果不同。该研究为临床治疗鸡白痢以及开发中草药制剂提供了依据。     

H5N1亚型禽流感的诊断及临床病理学研究

对一起鸡传染病进行了病原鉴定并对其自然死亡的46例蛋鸡进行了临床病理学研究，结果表明，本起鸡病为A型禽流感，H5N1亚型，属高致死性(HPAI)；急性热性出血性败血症；急性坏死性胰腺炎；非化脓性脑炎；卡他性上呼吸道炎；卡他性、间质性肺炎。     

鸡大肠杆菌病和鸡霍乱的病原学检验

对发生于同一鸡场不同日龄鸡群的大肠杆菌病和鸡霍乱病例,进行了发病情况及病理变化方面的检验.同时取新鲜病死鸡的脏器组织为材料进行细菌分离,经对36株分离菌的形态特征、理化特性等的鉴定,结果表明：分别为大肠杆菌（E.coli）和多杀巴斯德氏菌败血亚种（P.multocida subsp.septica）,并通过人工感染试验证明分离菌为相应感染症的致病菌.     

我国鸡白痢沙门氏菌病诊断与防治研究概况

鸡白痢沙门氏菌可感染各日龄、不同品种的鸡、其临床症状表现不尽相同、均严重影响鸡的生产性能．细菌学方法仍是不可或缺的诊断手段．随着血清学技术、PCR技术、快速检测试剂盒逐步应用于鸡白痢的检疫之后，对鸡白痢的防制巳跃上了一个新台阶，鸡白痢沙门氏菌的毒力质粒和耐药性研究，为药物、疫苗防治打开了新思路．减毒菌苗、灭活菌苗、脂多糖(LPS)抗原、卵黄抗体、活菌生物制剂、抗生素、磺胺药、中草药、有机酸等措施在鸡白痢的防治中发挥着重要作用。     

人工感染鸡传染性喉气管炎的病理组织学观察

采用人工感染的方法诱发鸡传染性喉气管炎,注射含传染性喉气管炎病毒鸡胚尿囊液后3d发病,其发病率为95%,主要症状为呼吸困难、气喘、咳出血样渗出物,剖检以喉头气管有黄白色假膜为特征,受侵害的气管粘膜肿胀、出血,导致糜烂,以致鸡死亡,死亡率为25%。分别取病死鸡的气管、肺脏、心脏、肝脏、肾脏和脾脏,采用石蜡包埋,HE染色法,在显微镜下进行病理组织学观察。结果显示:实质器官为渗出性炎症;上皮细胞肿胀、变性、坏死、脱落和血液循环障碍。     

黄瓜根结线虫拮抗菌筛选及作用机理初探

采用击倒、驱避、温室盆栽和田间小区试验相结合的方法,对已获得的多株拮抗菌株进行了防治黄瓜根结线虫(Meloidogyne incognita)的筛选实验,并对优势菌株的作用机理进行了初步研究.结果表明,在室内共同培养条件下,S506,Cm05和Ms2菌株表现优秀,对线虫的校正死亡率均在30%以上,其中S506最高,达48.8%;对线虫的驱避实验,以Cm05+S506组合最好;在连茬4,8,11 a的温室土壤上进行的盆栽和田间小区实验表明,S506的防效最高、最稳定,田间校正防效最高达85.29%,显著优于阿维菌素14.89%的防效.S506的抗线虫物质主要是胞外代谢产物.     

人和鸡溶菌酶结构保守性的对比研究

人体内的溶菌酶在第56位、第67位残基发生自发突变的情况下可以通过分子间的聚集形成淀粉样病变,产生一系列的临床症状甚至导致死亡.本研究基于STAMP结构比对算法,使用VMD软件主要从结构角度比较了人、鸡、狗、鼠四种脊椎动物溶菌酶的相似程度及亲缘关系,结果发现鸡的溶菌酶与人的溶菌酶结构最相似,亲缘关系最接近,并且人和鸡的溶菌酶的第56位和第67位两个残基位点在结构上高度保守.该发现为现在流行的以鸡溶菌酶为模型研究人溶菌酶引起的淀粉样病变的致病机制及治愈方法的可行性提供了必要的理论依据.