新型亲和技术及其应用

亲和层析是基于生物分子间特异性的亲和作用而建立的分离纯化技术。综述了该技术与其它分离纯化方法相结合而产生的新型亲和技术及其应用     

新型亲和技术及其应用

亲和层析是基于生物分子间特异性的亲和作用而建立的分离纯化技术。综述了该技术与其它分离纯化方法相结合而产生的新型亲和技术及其应用。     

两种亲和色谱在中草药活性成分分离和纯化中的应用

亲和色谱多用于生物大分子的分离与纯化.随着技术的发展,出现了多种新型的亲和色谱,其应用范围也不断拓展.本文简要介绍了分子烙印亲和色谱和免疫亲和色谱的基本原理,以及它们在中草药活性成分分离和纯化中的应用概况.     

两种亲和色谱在中草药活性成分分离和纯化中的应用

亲和色谱多用于生物大分子的分离与纯化.随着技术的发展,出现了多种新型的亲和色谱,其应用范围也不断拓展.本文简要介绍了分子烙印亲和色谱和免疫亲和色谱的基本原理,以及它们在中草药活性成分分离和纯化中的应用概况.     

两种亲和色谱在中草药活性成分分离和纯化中的应用

亲和色谱多用于生物大分子的分离与纯化。随着技术的发展,出现了多种新型的亲和色谱,其应用范围也不断拓展。本文简要介绍了分子烙印亲和色谱和免疫亲和色谱的基本原理,以及它们在中草药活性成分分离和纯化中的应用概况。     

利用生物信息学数据及工具合成表达链霉亲和素基因

目的:人工合成表达链霉亲和素基因,制备链霉亲和素磁珠复合物用于核酸分离.方法:利用NCBI、BCM等提供的生物信息及软件工具,将链霉亲和素蛋白的基因进行密码子优化,并分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链,采用化学和酶促合成相结合的方法合成编码链霉亲和素蛋白基因.将纯化的链霉亲和素通过偶联剂与带羧基的磁粒共价结合,用于快速...     

亲和温敏聚合物PNIPAA,-co-AA,的制备及表征

制备一种新型的蛋白质分离纯化材料。探讨亲和温敏双水相体系对牛血清白蛋白（BSA）的分配特性。优化分离纯化BSA条件,同时测定BSA的回收率以及纯化倍数,并通过电泳SDS-PAGE对BSA蛋白进行了表征。     

自制纤维素金属螯合亲和膜的部分吸附性能及纯化牛血SOD

×10-6 g/cm2,但蛋白解吸率前者低于后者,表明一定浓度的NaCl有助于亲和膜对蛋白质的吸附,同时也使被吸附的蛋白的解吸率有所降低.吸附-解吸方式(静态法)分离纯化SOD,解吸样品比活达8 770 U/mg,纯度为81%;吸附-洗脱方式(动态法)分离纯化SOD,穿柱流出样品比活达12 418 U/mg,纯度为85%.自制纤维素亲和膜有较好的吸附性能和纯化效果,重复使用性能良好,制备和纯化过程简便易行,具有广阔应用前景.     

固定化金属离子亲和色谱研究进展

 固定化金属离子亲和色谱是将过渡金属离子通过配体螯合在固相基质上,通过过渡金属离子与靶分子的组氨酸或半胱氨酸特异性结合形成相对稳定的复合物,最后以竞争性洗脱方式实现靶分子的富集与纯化,其核心为金属螯合亲和基质材料制备。具有亲和选择性高、生物兼容性好、可逆再生等优势,迄今已发展了40余年,广泛应用于靶分子的特异性富集、分离与纯化,本文综述了近3年固定化金属离子亲和色谱纳米材料、微球色谱基质、棉纤维、分子印迹材料、整体材料、共价有机骨架等方面的研究进展。     

自制核心链霉亲和素的性质

在实验室分离和纯化链霉亲和素的基础上对其性质进行了鉴定．在SDS-PAGE中链霉亲和素只有一条带，单体的分子量为14500Da，链霉亲和素的相对分子量约为58000Da；其等电点为5．9～6．2；结合生物素的活性为15．7U／mg．结果表明自制链霉亲和素为核心链霉亲和素，在纯度、活性等方面达到了理想的效果．     

酵母培养液中胰蛋白酶初探

利用鸡卵黏蛋白对于胰蛋白酶有天然抑制性的特点,从鸡蛋清中分离纯化了鸡卵黏蛋白,将其偶联至Sepharose 4B制作成亲和层析介质,用于从不同种类酵母,处于不同时间段的培养液中,分离纯化得到了具有胰蛋白酶活性的物质。由此初步证明了酵母培养液中确有可能存在胰蛋白酶。因此,利用酵母工程菌生产蛋白质的时候,若加入一定量的胰蛋白酶抑制剂,有可能提高目的蛋白的产率。     

用Blue一Sepharose·CL·6B亲和层析法分离纯化甲鱼和北京鸭LDH＿1、LDH＿5A亚基

用ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ·ＣＬ．６Ｂ亲和层析方法分离纯化的甲鱼ＬＤＨ＿５、甲鱼ＬＤＨ＿１和北京鸭ＬＤＨ＿５，进行比较研究。从分子量、等电点、氨基酸组成、平均摩尔差异百分比及在ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ·ＣＬ·６Ｂ层析柱上洗脱特性几方面进行比较，结果表明，两个不同纲的动物（甲鱼和北京鸭）的ＬＤＨ＿５的Ａ亚基之间的差异大于同一种动物的ＬＤＨ＿５的Ａ亚基和Ｂ亚基之间的差异，并说明不同纲的动物ＬＤＨ＿５之间具有同源性。     

玉米Mn-SOD的分离纯化与性质分析

利用金属螯合亲和层析,结合DEAE-纤维素离子交换层析,从玉米匀浆液中分离纯化到电泳纯的Mn-SOD组分.双向电泳和SDS-PAGE分析表明:玉米Mn-SOD的亚基分子质量为26.2 kD,等电点为5.3;热稳定性、酸碱稳定性高于玉米Cu/Zn-SOD.     

锥形床亲和层析过程的场协同分析

为了对亲和层析过程的强化提供理论依据,应用非平衡热力学唯象理论,分析了该过程中温度场、化学势场及重力场等各种场之间的协同关系,以及各自场内不同分量之间的协同关系.得到了亲和层析过程的总熵变表达式,多场协同条件下质量通量和热量通量的唯象表达式以及相应的传质和传热系数.分析结果表明:重力场的存在,维持了体系的非平衡状态、保证了锥形床的稳定操作,避免了柱子堵塞及压密化.上流锥形床亲和层析在多场协同下,其传质、传热以及吸附反应相互影响,过程的最终传递方向将取决于各场之间综合作用的结果.     

Chiral separation of racemic drugs using molecular imprinting

Molecularly imprinted polymers (MIPs) of (S)-ketoprofen and (S)-naproxen are prepared using non-covalent imprinting in the presence of template molecules. The prepared MIPs are used as the chiral stationary phase to separate ramemic naproxen and ketoprofen. The results show that racemic naproxen and ketoprofen are efficiently resolved on MIPs. The effect of concentration of acetic acid in the mobile phase is studied, and the data are analyzed using the affinity chromatography model, and the close agreement is achieved between the simulated and experimental curves. The results suggest that the affinity chromatography mechanism controls the retention in this system. Moreover, the affinity chromatography equilibrium constants on (S)-naproxen and (S)-ketoprofen are estimated.     

Heparin-Argarose亲和层析法分离人甲状腺肿瘤组织中的bFGFs

本文介绍了甲状腺肿瘤组织中碱性纤维母细胞生长因子(basis Fibroblast Growth Factors.bFGFs)的提取过程和分子量鉴定。研究表明:bFGFs对肝素具有强的亲和力,组织匀浆通过Heparin-Argarose亲和层析柱后,用2.0mol/L的NaCl即可洗脱下来,收集其亲和峰值的洗脱组分,经三氯醋酸沉淀后即可得到bFGFs,经Western-blot方法分析其分子量有三种,分别为14KD、17KD、18KD。     

大肠杆菌硫氧还蛋白thioredoxin基因的克隆及表达

以大肠杆菌XL1blue为模板，通过PCR技术扩增大肠杆菌硫氧还蛋白基因，并将目的基因分别连接到克隆载体pUC18和表达载体pTrcHisC上，构建重组质粒．重组质粒pTrcHisC-TRX在大肠杆菌中高效表达，最后利用固定化金属螫合亲和层析技术(IMAC)获得较纯的目的蛋白，为进一步研究硫氧还蛋白的功能及其应用提供了条件．     

以壳聚糖为基质对蚯蚓纤溶酶进行亲和层析

蚯蚓纤溶酶(Earthworm fibrinolytic enzymes)有多种同工酶,分离纯化相对比较困难.我们采用壳聚糖作为基质,大豆胰蛋白酶抑制剂为配体,戊二醛为偶联剂,分别研究了酸性和碱性条件下对蚯蚓纤溶酶的纯化效果.实验表明经壳聚糖为载体所制备的亲和吸附剂对蚓激酶具有较高的分离纯化选择性.并且在酸性条件下提取比在碱性条件下提取所得同工酶要少.