盾叶薯蓣形态解剖和皂甙的组织化学定位及含量变化

应用显微技术组织化学定位观察,研究了盾叶薯蓣皂甙在花叶盾叶薯蓣营养器官中的积累分布状态以及不同生长期、不同器官之间的薯蓣皂甙含量的季节变化,结果显示,薯蓣皂甙主要分布在营养器官的成熟组织薄壁细胞中,表皮也有少量分布,维管束木质部中无皂甙分布;根状茎中皂甙积累最多,叶和地上茎中皂甙积累较少,须根最少;盾叶薯蓣在营养生长期,花果期,枯萎期的发育过程中,地上部分营养器官皂甙含量呈现出低一高一低的变化趋势,二年生的地下茎适合在秋冬季采收,其药材品质最佳.     

盾叶薯蓣中薯蓣皂甙元的提取研究进展(综述)

简述了从盾叶薯蓣中提取薯蓣皂甙元的意义,对薯蓣皂甙元的化学结构、性质、提取和测定方法及应用领域进行了评述,概括了盾叶薯蓣中薯蓣皂甙元的提取与分离的研究现状.     

盾叶薯蓣组织培养及废液利用初探

盾叶薯蓣通过组织培养 ,提取薯蓣皂甙元的同时 ,综合利用盾叶薯蓣酸水解液中的糖分 ,作碳源营养培养基培养食用菌。接种培养 ,生长良好。     

栽培盾叶薯蓣中皂甙元含量与质量的动态变化

对２２个栽培盾叶薯蓣样品测定结果表明：植株中薯蓣皂甙元的含量随植株性别和取材时期的不同而变化。雄株中皂甙元含量高于雌株，种植时期越长，皂甙元含量越高，１０月采收的样品皂式元含量最高。按传统方法从样品中提出的皂甙元的熔点几乎相同。均在１９６－２００℃范围内，栽培３年以上的盾叶薯蓣可以用于工业上生产薯蓣皂甙元。     

药用薯蓣高皂素新种质选育的研究

利用盾叶薯蓣的茎段为外植体诱导愈伤组织,转移到分化培养基培养获得了试管苗和微块茎．取带绿色芽点的微块茎或愈伤组织置于0．05％或0．02％的秋水仙碱诱变处理24～72h,经过培养筛选获得了大量的变异试管苗,诱变率达57．4％．细胞学鉴定后获得了染色体数目为2n=4z=48(z=12)的同源四倍体盾叶薯蓣新材料．该材料的生长势强,块茎粗大,在相同生长条件下其幼嫩块茎的皂素含量比对照提高了20％,是高皂素药用薯蓣新种质,将在医药种质资源生产上具有重要的推广价值．四倍体盾叶薯蓣无菌短枝生根困难,采用微块茎为繁殖体,其生根率达100％,并有较高的移栽成活率,所以,诱导微块茎是四倍体盾叶薯蓣快速繁殖的理想途径．     

MS、1／2MS及活性碳对诱导盾叶薯蓣组培苗生根的影响

通过试验分析表明MS、1／2MS培养基对盾叶薯蓣组培苗生根影响差异不显著．但MS培养基更有利于提高盾叶薯蓣组培苗根系生长质量。同时试验发现活性碳对盾叶薯蓣组培苗根的诱导具明显抑制作用，这与当前一些植物组织培养的研究结果持相反的观点。     

Ce(NO_3)_3对盾叶薯蓣茎段愈伤组织生长和不定根诱导影响的研究

为研究硝酸铈对盾叶薯蓣快速繁殖的影响,采用以盾叶薯蓣茎段为外植体,在其愈伤诱导培养基、丛生芽培养基及生根培养基中添加不同浓度的Ce3+.结果表明,含Ce3+为5 mg/L的培养基可显著提高愈伤组织诱导率,含Ce3+1 mg/L的培养基丛生芽诱导率最高;1~15 mg/L的Ce3+对盾叶薯蓣组培苗生根有明显的促进作用,5 mg/L的Ce3+显示出最强的促进效应.可以认为,一定浓度Ce3+对诱导愈伤组织生长、丛生芽萌发及不定根生长有促进作用,但高浓度的Ce3+均对其呈现抑制效应.     

盾叶薯蓣组织培养快速繁殖技术的优化研究

探索了盾叶薯蓣离体培养快速繁殖的有效途径.结果表明：在附加6-BA的MS培养基上,外植体可诱导出大量的致密愈伤组织,而且致密愈伤组织在分化培养基中能分化产生大量园球茎和幼苗;而在附加2,4-D的MS培养基中,外植体被诱导出疏松愈伤组织,在随后的分化培养基上只能产生数量有限的幼苗.带枝条的园球茎在MS＋NAA0.5 mg/L＋IAA0.5 mg/L生根培养基上的生根率达到88.2%;移栽成活率达85%.     

种用根状茎质量对盾叶薯蓣优质高产的影响

于2002年11月在广西南丹县河池林业科学研究所浅山丘陵区的缓坡杉木林地,按照的种植方法,用1级、2级、3级和4级种用根茎进行盾叶薯蓣(Discoria zingiberensis C.H.Wright)大田种植对比试验,分别测定盾叶薯蓣栽培1年和栽培2年的产量和薯蓣皂素含量.结果显示,播种第1年栽培期盾叶薯蓣出苗率为1级种＞2级种＞3级种＞4级种,在栽培满1年后的生长期中各级别的植株苗蔓长势差别不明显;盾叶薯蓣栽培满1年时各级别种茎产量为1级种＞2级种＞3级种＞4级种,薯蓣皂素含量为2级种=3级种＞4级种＞1级种;栽培2年的产量为1级种＞2级种＞3级种＞4级种,1级种和2级种产量差异不显著,其他各级别种茎之间产量差异极显著;栽培2年后薯蓣皂素含量为4级种＞3级种＞2级种＞1级种,3级种和4级种含量较高但差异不显著,其他各级别种茎之间有效成分含量差异极显著.建议选用2年生根状茎作种时,宜选用当年新萌生形成的芽头作种.     

盾叶薯蓣种子萌发条件及诱导外植体愈伤的研究

作者研究了盾叶薯蓣种子在MS培养基中的萌发条件，并且对其茎、叶片、叶柄进行愈伤组织的诱导．结果表明：(1)在25℃下，用无菌水浸泡的种子在MS 6mg／L赤霉素上获得最高的萌发率；(2)MS 2，4-D 4mg／L为较理想的愈伤组织诱导培养基，在此培养基上，茎、叶片、叶柄的诱导率分别是：100％、40％、20％．     

微生物发酵转化黄姜生成薯蓣皂苷元的工艺研究

筛选到一株能高效转化薯蓣皂苷生成薯蓣皂苷元的菌株,并进行液体发酵转化,HPLC检测发酵前后薯蓣皂苷及薯蓣皂苷元含量的变化,表明经菌株的转化作用后,黄姜中的薯蓣皂苷生成薯蓣皂苷元.本研究对发酵条件包括培养基成份,底物浓度,装量,接种量,转速进行优化,并找到充分利用黄姜的生态环保的预处理方法,建立了一种高效清洁的薯蓣皂苷元生产工艺.     

根癌病土壤杆菌诱导转化毛状根能力的评价

以鸟头(Aconitum carmichaeli)、Bidens sulphureus和洋金花Datura metal)三个植物种为材料(用A.rhizogenes的九个菌株和A tumefaciens的一个突变系为感染源.诱导出转化毛状根.根据所诱导出的转化毛状根数量来评价各菌株诱导产生转化毛状根的能力.结果表明同一菌株对不同植物和同一植物接受不同菌株的感染力有明显差异.A. rhizogenes ATCC15834、ATCC 25818、A 42017和A.tumefaciens、TMR 338诱导产生转化毛状根的能力最强,A.rhizogenes R1000、TR 105次之.ATCC 11325、ATCC 13332、ATCC 13333和Melon;2—1较差 作者认为,目前仍可依照Dawso (1942)、在烟草Nicotiana tabacum离体根培养 得出的结论 按生长率、干重和分枝数作为建立转化毛状根无性系的初选形态学标准.     

发根农杆菌A4对荞麦的遗传转化

用发根农杆菌Ａ４对荞麦的下胚轴和子叶进行离体转化,得到ＲｉＴ－ＤＮＡ表达的发状根。不同的培养环境对发状根的和生长有一定的影响,表现为发状根在液体培养基上比在固体培养基上生长更为迅速,且在培养基中含一定浓度的Ｃｕ＾２＋有助于发状根的形成。     

芸芥发状根的诱导及其植株再生体系的建立

通过发根农杆菌R1000介导的遗传转化建立了芸芥发状根的诱导、培养及植株再生体系.研究了影响发状根诱导及生长的各种因素,通过PCR对所得发状根进行了分子水平的鉴定.结果表明:发根农杆菌R1000的rol B基因已被成功地转入并整合到该发根培养物的基因组中.     

银杏毛状根的诱导和培养

利用３个发根农杆菌菌株：Ｒ１５８３４,Ｒ１０００和Ａ４分别对银杏幼叶、幼芽和幼茎外植体进行成功的转化：除Ａ４外,均诱导获得了毛状根。通过对毛状根中冠瘿碱的检测,农杆菌Ｒｉ质粒的Ｔ－ＤＮＡ部分已整合到银杏细胞的基因组中。     

地黄毛状根的培养研究

发根农杆菌是一种革兰氏阴性菌,能侵染大多数的双子叶植物,诱发被感染植物的受伤部位长出毛状根.本实验用发根农杆菌感染地黄外植体诱导其产生毛状根,并加以培养,为今后选择合适的培养方式,大规模培养毛状根来生产地黄的次生物质奠定基础.     

怀牛膝毛状根诱导及培养体系的建立

以牛膝叶片为外植体,研究了不同发根农杆菌、培养基、乙酰丁香酮(AS)对毛状根诱导率及其生长的影响.结果表明,发根农杆菌不同菌种对牛膝叶片转化率有显著影响,3个供试菌种中ATCC15834菌株诱导率最高;在1/2MS无激素固体培养基上毛状根的诱导率及生长状况均优于MS培养基;100μmol·L-1 AS可以有效提高毛状根诱导率.毛状根从叶片形态学下端中脉切口处形成的愈伤组织上产生,能在无外源激素的培养基上自主生长.PCR扩增结果显示发根农杆菌Ri质粒的rolB基因已在牛膝毛状根基因组中插入、整合并得到表达.建立了牛膝毛状根诱导培养体系,为利用毛状根大规模生产药用成分奠定了基础.     

发根农杆菌A4对骆驼刺的遗传转化

用野生型发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）Ａ４菌株感染骆驼刺（Ａｌｈａｇｉ ｐｓｅｕｄｏａｌｈａｇｉ）无菌苗的子叶和下胚轴,１５ｄ左右在感染部位诱导出发根。将发根切段放在附加２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织,在３．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的ＭＳ培养基上进一步分化形成完整植株,冠瘿碱检测结果表明,不仅在初生发根中,在次生发根、来源于发率的愈     

转乙肝病毒表面抗原基因烟草发根的获得

构建了乙肝病毒表面抗原基因（HBsAg）植物表达载体,通过冻融法将HBsAg 基因转入到发根农杆菌LBA1314中,采用叶盘法将HBsAg基因导入到烟草中,获得了转基因烟草发根.对转基因烟草发根的GUS检测结果表明：转HBsAg基因烟草发根可以染成蓝色,而非转基因烟草的根没有染色反应.这说明gus基因在转HBsAg基因烟草发根获得了表达.     

发根农杆菌介导云南萝芙木的遗传转化

用发根农杆菌A4分别感染云南萝芙木幼嫩的真叶和茎段,诱导出毛状根,并对毛状根进行了离体培养, PCR检测转基因毛状根和HPLC检测毛状根中利血平的含量．结果表明:这两种外植体的转化频率及诱导出的毛状根差异极大,幼嫩的真叶叶片比茎段更适合作转化外植体用．PCR检测结果表明,诱导毛状根的基因rolB和 rolC整合到云南萝芙木基因组中,HPLC含量检测表明毛状根中利血平的含量比自然根中利血平的含量有显著的增加,因此可以作为利血平来源生产的有效途径之一．