林蛙皮抗菌肽的纯化

从吉林林蛙干皮中提取的抗菌剂进行浓缩、除盐后,上CM-52阳离子交换纤维素柱淋洗,收集透过峰,然后用不同离子强度的缓冲液进行阶段性洗脱,收集洗脱峰。用半制备型反相高效液相色谱(RP HPLC)对收集到的各峰进行纯化,得到抗菌肽纯品。     

柱层析分离缩杂环[艹卓]酮化合物

本文利用柱层析法分离缩杂环[艹卓]酮化合物。首先用薄层板进行点样，根据板上点的个数来确定待分离的物质所含化合物的种类，以此确定我们所要的化合物，并通过各点的距离初步确定洗脱液的极性配比。然后对样品进行柱层析分离．在洗脱过程中，根据不同极性物质谱带距离的不同．分别收集，并通过薄层板监控，确定我们需要的谱带，再经旋转蒸发仪蒸发掉洗脱液，最后对收集到的固体物质进行重结晶，得到了我们所要的纯净物。产品经红外分析后，谱图中典型官能团吸收峰的数据与文献值差距较小，从而证明收集到的化合物就是所要的纯净产品。     

沙葱多糖的SephadexG-100凝胶柱纯化和分子量的测定

对通过热水浸提、三氯乙酸除蛋白和活性炭脱色后的沙葱粗多糖,采用SephadexG—100凝胶柱层析纯化,收集合并单一峰溶液命名为SCSP,并对纯化产物SCSP进行相对分子质量的测定。结果表明,SCSP凝胶柱层析洗脱曲线为单一狭窄对称峰,说明为均一组分多糖;SCSP的相对分子质量为5.89×104克/摩尔。     

成熟中国对虾(Penaeus chinensis)卵巢中卵黄蛋白的纯化

用层析(SephadexG-150, DEAE-Cellulose-52)和电泳洗脱2种方法分别从成熟中国对虾卵巢中纯化得到了一种卵黄蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测表明,卵黄蛋白出现在SephadexG-150的第1个洗脱峰和DEAE-Cellulose-52的0.4 mol/L和0.5 mol/L NaCl洗脱峰处.比较了这2种方法的优缺点:层析法可用于蛋白的大量制备,电泳洗脱能够得到高纯度的蛋白.并对与其结合的类胡萝卜素的稳定性进行了讨论.     

基因重组人骨形成蛋白4成熟肽在大肠杆菌中的大规模发酵表达及纯化

含有编码人骨形成蛋白4成熟肽(Bone morphogenetic protein 4 mature peptide,hBMP-4m)cDNA表达质粒的菌株,经50代传代,质粒不丢失,仍然稳定高表达hBMP-4m。将此菌株导入15 L NBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵、诱导表达,测定发酵菌液OD600值为43.5,离心收集菌体,PAGE电泳结果hBMP-4m占细菌总蛋白量的39％。悬浮所收集的菌体、裂菌,洗涤后的包涵体中hBMP-4m占蛋白量的85％。将少量包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解分别上SP阳离子和Q阴离子交换柱,用连续盐浓度的洗脱液洗脱蛋白,收集各蛋白峰做蛋白电泳分析,找到洗脱液的最合适盐浓度。然后将全部包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解,上阳离子交换柱SP柱,以最佳盐浓度洗脱液洗脱,获得纯度为91％的hBMP-4m。再上阴离子交换柱Q柱,最佳盐浓度洗脱液洗脱后,所得hBMP-4m纯度为98％。     

柱层析分离缩杂环卓草酮化合物

本文利用柱层析法分离缩杂环卓草酮化合物。首先用薄层板进行点样,根据板上点的个数来确定待分离的物质所含化合物的种类,以此确定我们所要的化合物,并通过各点的距离初步确定洗脱液的极性配比。然后对样品进行柱层析分离,在洗脱过程中,根据不同极性物质谱带距离的不同,分别收集,并通过薄层板监控,确定我们需要的谱带,再经旋转蒸发仪蒸发掉洗脱液,最后对收集到的固体物质进行重结晶,得到了我们所要的纯净物。产品经红外分析后,谱图中典型官能团吸收峰的数据与文献值差距较小,从而证明收集到的化合物就是所要的纯净产品。     

高效液相色谱法分离多管藻中光合色素

以红藻多管藻(Polysiphonia urceolata Grev.)为材料,采用高效液相色谱(HPLC)法摸索了藻体色素分离和纯化的条件.用丙酮-乙醇(1:1,v:v)提取12h,提取物用HPLC法纯化,流动相为A(甲醇:0.5mol/L乙酸铵,4:1,v:v,)、B(乙腈:水,9:1,v:v)和C(乙酸乙酯).上样量1mL,流速2mL/min,用二极管阵列检测器(Photodiode Array Detector,PDAD)检测,检测波长为440nm,收集洗脱峰.由洗脱峰的吸收光谱和荧光光谱可知,获得的两个最主要组分分别为叶绿素和类胡萝卜素.为进一步了解多管藻色素的光物理性质,提供了快速简洁的分离纯化色素的方法.     

大孔树脂法分离纯化杨梅红色素的研究

用X-5、AB-8、S-8三种不同型号树脂对杨梅红色素进行吸附与解吸。其结果表明,不同型号树脂对该色素的吸附及解吸效果均有所不同。各种型号树脂对该色素的静态吸附效果顺序为AB-8﹥X-5﹥S-8,解吸效果为X-5﹥S-8﹥AB-8。采用X-5树脂对杨梅红色素进行动态吸附与洗脱。其结果表明,X-5树脂对杨梅红色素的动态吸附量随上柱样液浓度的降低、上柱流速的增加而减少。不同浓度的洗脱液对杨梅红色素的解吸效果也有一定的影响。用70%的乙醇进行洗脱,其洗脱峰窄,洗脱曲线对称性好,解吸效果最好。     

不同型号大孔吸附树脂对天麻素的吸附纯化研究

目的研究D-101、LSA-10、LSA-21三种型号大孔吸附树脂对天麻提取物中的天麻素的不同吸附性能。方法天麻药材用乙醇回流提取后,经不同的大孔树脂吸附,用不同浓度的乙醇进行洗脱,然后用HPLC测定各收集液中的天麻素含量,比较其吸附性能。结果三种型号的大孔树脂对天麻素均有不同程度的吸附作用,不同浓度的乙醇也具有不同的洗脱能力。结论采用LSA-10型号大孔树脂,以10%乙醇洗脱天麻提取物纯化效果最好。     

吲哚乙酸氧化酶和过氧化物酶同工酶的分离及其对底物的特性

用CM-纤维素柱从花椰菜的游离型过氧化物酶提取液中分离得到6个酶峰,分别出现于不同洗脱浓度的NaCl洗脱液中,它们都具有过氧化物酶和吲哚乙酸氧化酶活性。从结合型过氧化物酶提取液中分离得到5个酶峰,其中被115mmol.l~(-1)NaCl洗脱的为一高活性吲哚乙酸氧化酶峰,它的过氧化物酶活性很低。其余的酶峰都具有两种酶的活性。用不同的底物测定同工酶的活性,得到很不相同的结果。不同的同工酶的最适pH因底物不同而异,愈创木酚为pH5.0～6.0,咖啡酸为pH4.5～5.0,阿魏酸为pH8.5～9.0,但各同工酶之间没有明显差异。     

吲哚乙酸氧化酶和过氧化物酶同工酶的分离及其对底物的特性

用CM-纤维素柱从花椰菜的游离型过氧化物酶提取液中分离得到6个酶峰,分别出现于不同洗脱浓度的NaCl洗脱液中,它们都具有过氧化物酶和吲哚乙酸氧化酶活性。从结合型过氧化物酶提取液中分离得到5个酶峰,其中被115mmol.l~(-1)NaCl洗脱的为一高活性吲哚乙酸氧化酶峰,它的过氧化物酶活性很低。其余的酶峰都具有两种酶的活性。用不同的底物测定同工酶的活性,得到很不相同的结果。不同的同工酶的最适pH因底物不同而异,愈创木酚为pH5.0～6.0,咖啡酸为pH4.5～5.0,阿魏酸为pH8.5～9.0,但各同工酶之间没有明显差异。     

光度法测定鱼腥草中有效成分的质量分数

用石油醚（30－60℃）浸泡切细的鲜鱼腥草以提取挥发油，用石油醚－氯仿混配液作为洗脱剂再进行柱析净油，收集淡黄色馏分癸酰乙醛，用对2，4－二硝基苯肼与癸酰乙醛在水浴55℃，超声波中反应45min，在改良试剂发色作用下得到酒红色的腙。浓度与色度成正比，癸酰乙醛浓度在0．01－0．1mg/ml符合Lamb-Beer定律，用分光光度法可测出鱼腥草素的含量。     

大豆磷脂酰乙醇胺分子种组成分析

用高效液相色谱法(HPLC)在反相Prodigy ODS(3)柱上，以甲醇-氯仿-乙腈-水为流动相，梯度洗脱程序分析了大豆磷脂酰乙醇胺的分子种组成，蒸发光散射检测器用做HPLC峰的检测，峰面积归一化法定量。组分定性由气．相色谱(GC)测定的HPLC峰的脂肪酸组成确定。分析结果表明，大豆磷脂酰乙醇胺由9个分子种组成，其中C18：2C18：2,C18：1C18：2,C16：0C18：2，C16：0C18：1，C18：0C18：2分子种是主要组分。     

箬竹叶抑菌成分的分离纯化及结构分析

箬竹叶干粉加1％碳酸钙，用甲醇抽提至色淡，抽提液浓缩后经石油醚萃取，水相过聚酰胺柱，用水和95％甲醇洗脱，醇洗部回收甲醇经60℃低温干燥，得红棕色结晶性粉末，该物质纸层析，硅胶薄板层析，得单一色斑，在聚酰胺柱色谱中呈单一吸吸收峰，经高压液相色普检验，单一主峰面积比例为92．31％，用盐酸镁粉检出其为黄酮化合物，经酸水解，用硅胶薄板层析检出有木糖，用Uv-vis光谱法及化学法对其结构进行分析，该化合物具有抑菌活性，水解后抑菌活性升高。     

固相金属亲和层析纯化重组类人胶原蛋白

目的 研究利用固相金属亲和层析纯化重组类人胶原蛋白的洗脱方法 ,以优化分离纯化的条件.方法 将吸附了重组类人胶原蛋白的层析柱采用降低pH,增大离子强度和增大NH4Cl浓度3种方法 进行洗脱.结果 采用增大NH4Cl浓度的方法 进行洗脱所得的洗脱峰面积最大,洗脱体积最小,纯化后重组类人胶原蛋白的纯度达97.9%,回收率为68.6%,纯化倍数为2.78.结论 采用固相金属亲和层析纯化重组类人胶原蛋白是可行的,可有效地对重组类人胶原蛋白进行纯化.     

土鳖虫糖蛋白的提取及抗肿瘤活性初步研究

以新鲜的雌性土鳖虫原药材为研究对象,其水提物经乙醇沉淀,Sevag法除蛋白,DEAE-50纤维素离子交换层析柱等方法分离纯化后,得到糖蛋白组分,用糖蛋白组分分别对两种肿瘤Hela和食管癌Eca109细胞进行体外药物敏感性实验,结果显示,氯化钠洗脱浓度为0.4 mol/L时的洗脱峰组分在低浓度(<10 mg/L)水平对以上两种肿瘤细胞均有明显抑制作用,表明土鳖虫具有潜在的抗肿瘤作用.     

瓶尔小草提取物红外光谱解析

以瓶尔小草为原料采用醇提水沉一聚酰胺吸附、乙醇溶液梯度洗脱,得到不同洗脱物。在此基础上测定红外光谱（IR）,并与黄酮类化合物对照品槲皮素、芦丁的红外光谱进行比较。结果表明,30％和50％乙醇溶液洗脱物红外光谱相似,60％和70％乙醇溶液洗脱物的红外光谱相似,而80％和90％乙醇溶液洗脱物的红外光谱有明显差异,初步指认了不同洗脱物的吸收特征峰,为瓶尔小草原料药的提取建立分析模式。     

高浓度Cl^—对NO^—3分离测定的影响

在AS4A阴离子色谱柱上，研究了高浓度Cl^-对NO^-2和NO^-3测定的影响。提出了在高浓度基体中，同时存在自身洗脱效应和在线流动相变化两种洗脱机理，当基体与待测离子色谱峰发生重叠时，基体在抑制器处所交换的H^ 使部分弱酸型阴离子NO^-2分子化，定量测定产生偏差，而对强酸型阴离子NO^-3的定量测定没有影响。     

发酵液中鸟苷和肌苷的分离测定

初步选择了HD-8和HZ014两种树脂进行鸟苷和肌苷分离测定实验，通过模糊聚类对实验结果分析得到分离测定操作条件的较优区域：再选择适当的条件进行静态吸附实验，从3种树脂HD-8、HZ014和732中最终确定采用树脂HD-8．通过模糊聚类产生的较优区域中的不同务件下实验结果的比较，最后确定最佳分离条件为：采用树脂HD-8，树脂床高度为4cm．流速为1mL／min，前120mL采用0．05mol／L盐酸洗脱收集肌苷，120mL后至240mL采用0．74moL／L pH5．0醋酸钠缓冲液洗脱收集鸟苷。     

大孔吸附树脂浓缩火龙果色素的研究

探讨了吸附和洗脱火龙果色素的方法和条件.该色素在535nm处有最大吸收峰.S 8型大孔吸附树脂对火龙果色素具有较好的吸附能力.乙醇浓度对树脂上色素的解吸有影响,当浓度为40%时解吸效果最好.考察了不同进样速度下树脂柱的泄漏和不同的酸浓度对洗脱峰的影响,结果选择1.5mL/min的进样速度及0.2%HCl 40%乙醇溶液为洗脱剂.经吸附-洗脱循环,色素液浓缩17倍以上,回收率达93.4%,且色素浓缩液具有较好的稳定性.