铁线莲'Multi-Blue'体细胞胚诱导和植株再生

以铁线莲品种'Multi-Blue'的茎尖为外植体,1/2MS为基本培养基,进行胚性愈伤组织和体细胞胚的诱导及植株再生条件的选择.结果表明:茎尖外植体在1/2MS+TDZ(1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)+2%蔗糖+0.7%琼脂的固体培养基中培养时可形成淡黄色块状至颗粒状愈伤组织,经继代培养后可逐渐形成胚性愈伤组织;体细胞胚诱导以1/2MS+TDZ(0.2mg/L)+IBA(0.1mg/L)+ABA(0.3mg/L)+CH(0.5g/L)为佳,诱导率可达96%;而适宜的体细胞胚萌发培养基为1/2MS+6-BA(0.2mg/L)+IBA(0.05mg/L).体胚再生植株经驯化后,移栽成活率可达80%以上.     

黄毛草莓愈伤组织诱导条件优化

本研究分别以黄毛草莓叶片和茎尖生长点为外植体进行愈伤组织的诱导,并通过比较茎尖愈伤组织在不同培养基以及不同植物激素组合下的生长情况,为建立黄毛草莓高效快速的繁殖体系,筛选愈伤组织诱导的最适培养基奠定基础.结果表明,与1/2MS培养基相比,MS培养基作为基础培养基(0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA条件下)诱导的愈伤组织效果最佳;以MS为基本培养基,通过4因素3水平L9(34)正交实验研究不同浓度组合的4种植物激素对黄毛草莓愈伤组织诱导率的影响.结果表明2,4-D对黄毛草莓叶片愈伤组织的诱导影响最大.黄毛草莓叶片愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA;NAA对黄毛草莓茎尖愈伤组织的诱导影响最大,黄毛草莓茎尖愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.6 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.6 mg/L NAA.     

非洲茉莉再生体系的建立

以非洲茉莉(Stephanotis floribunda R.Br.)茎尖和带芽茎段为外植体,研究激素对非洲茉莉芽增殖和生根的影响.实验结果表明,非洲茉莉愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L(单位下同)+IAA 0.5,诱导率可达100%.适合愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.0+IAA 0.1,分化率可达80%.适合芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 0.5+IBA 0.1,增殖系数为5.9.生根培养基为1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.2,生根率可达40%,且根生长健壮.     

珙桐叶片的脱分化和分化诱导研究

研究了以濒危植物珙桐叶片作为外植体诱导愈伤组织及分化再生植株.结果表明:本实验中,诱导愈伤组织的最佳培养基为1/2MS+2.0 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA;愈伤组织继代的最佳培养基为1/2MS+3.0 mg/L IBA+1.5 mg/L 6-BA最佳分化培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA+0.2 mg/L GA_3,芽分化率为6.2%;生根最佳培养基为1/2MS+0.4 mg/L IBA,生根率为60%.     

美洲商陆高频再生体系的建立

美洲商陆为商陆科多年生草本植物,在工业、农业和医药上具有很高的应用价值.本实验拟从外植体选择、激素组合、GA3和AgNO3等物质应用角度进行试验,分析各条件对愈伤组织诱导,不定芽分化、伸长以及不定根诱导等方面的影响,旨在构建美洲商陆稳定高效的再生体系.实验结果表明:愈伤组织诱导和不定芽分化的最适外植体为茎节;将无菌苗的上部经诱导培养基转接、壮苗后,再取茎节进行愈伤组织诱导和不定芽分化,可以显著提早不定芽分化、提高芽增殖系数;不定芽诱导分化最佳培养基为MS+6-BA(3.0 mg/L)+NAA(0.01 mg/L)+TDZ(0.02 mg/L),增殖系数达12.7;不定芽伸长的最佳培养基为MS+TDZ(0.02 mg/L)+6-BA(3.0 mg/L)+NAA(0.01 mg/L)+GA3(2.0 mg/L);生根最佳培养基为1/2MS+NAA(0.4 mg/L),生根率可达91.7%以上.AgNO3处理抑制了美洲商陆不定芽的分化.     

两种东方系百合组织培养快繁技术

以东方系百合索邦和西伯利亚的种球鳞片为外植体,以MS为基本培养基,添加NAA、6-BA、TDZ、KT、IBA、2,4-D等不同植物生长调节剂,筛选鳞片愈伤组织诱导、增殖、分化及再生苗生根的最佳培养基,为百合种质保存、组培快繁及脱毒奠定基础.结果表明,索邦百合在MS+IBA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果最好,在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织增殖最好,在MS+NAA 0.3 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+KT 0.2 mg/L培养基中分化最好;西伯利亚百合在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织的诱导和增殖最好,在MS+IBA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L培养基中分化效果最好.二者均在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.01 mg/L培养基中生根最好.     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

普通油茶体胚再生体系研究

为构建农杆菌介导的油茶遗传转化受体系统,选择普通油茶‘长林'4号、53号和166号的幼胚为外植体材料,进行多因素多水平的组织培养试验。结果表明:培养基的pH对愈伤组织诱导率影响不显著,愈伤组织的诱导率受油茶品种影响极显著; ‘长林'53号的幼胚极易实现胚性愈伤组织诱导和完整植株再生,MS培养基是最佳培养基,2,4-D和TDZ为幼胚较敏感的植物激素,对愈伤组织诱导影响最大; 当MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ处理时,‘长林'53号体胚诱导率为98%; MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+500 mg/L CH处理时,‘长林'53号体胚诱导率为89.6%。在不同2,4-D、KT、TDZ和添加物水平的L₉(3⁴)正交试验中,除3个处理外,其他处理组合的‘长林'53号体胚诱导率都达到100%。已分化的胚性愈伤组织在不含任何激素的MS培养基上,可以实现胚状体的萌发、生长及完整植株再生。     

大叶常绿杜鹃叶片离体培养及不定芽再生

以大叶常绿杜鹃无菌苗的嫩叶为试验起始材料,研究了其离体培养和不定芽再生的过程。结果表明:培养基为MS+ZT(1.0 mg/L)+ NAA(0.1 mg/L)时,大叶常绿杜鹃叶片可直接诱导再生不定芽,诱导率达70%; 也可以通过愈伤组织途径间接诱导出不定芽,愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D(2.0 mg/L)+KT(0.2 mg/L),增殖最佳培养基为MS+ZT(0.5 mg/L)+IBA(0.1 mg/L),愈伤组织分化的最佳培养基为MS+ZT(0.04 mg/L)+NAA(0.01 mg/L); 分化率最高为70%,分化苗数为6～10株; 生根培养基为MS+NAA(0.2 mg/L)+IBA(0.4 mg/L)时,生根率可达90%。腐殖土、黄沙、珍珠岩配比为4:1:1的混合基质较适合常绿杜鹃试管苗的炼苗移栽,成活率为90%。     

日本结缕草茎节和愈伤组织再生体系的优化

分别以日本结缕草的成熟胚和茎节为外植体,建立并优化了2套组培再生体系.实验结果表明:利用成熟胚诱导愈伤组织,适宜诱导培养基为MS基本培养基添加2 mg/L 2,4-D配合0.2 mg/L 6-BA,诱导率为42.5%;继代培养可改善愈伤组织状态,增加胚性,其中增加培养基渗透压,并适当添加ABA(0.2 mg/L),可明显提高胚性愈伤组织比率;继代2次后的愈伤组织在3种细胞分裂素6-BA,KT,ZT适当配比的分化培养基上,分化率可达到50%~75%.在以茎节为外植体的组培体系中消毒处理和预培养是比较关键的环节;预培养时MS培养基效果优于1/2 MS,在MS基本培养基中添加0.25 mg/L KT,1.0 mg/L ZT和0.1 mg/L NAA为比较适合的芽诱导培养基,诱导率可达37.9%.同时,比较了两套再生体系的优缺点,为日后日本结缕草的遗传转化奠定基础.     

水仙胚性愈伤的获得及农杆菌介导GUS基因的遗传转化

用正交实验设计对前期影响水仙胚性愈伤诱导和分化关联性大的因素进行综合分析,结果显示,培养基类型、激素及处理方式、不同添加物等对水仙外植体胚性愈伤诱导及分化的影响是基于培养基的多因素协同效应。水仙适宜胚性愈伤诱导培养基是:改良MB+NAA(0.2 mg/L)+6BA(2 mg/L)+ABA (2 mg/L)+AgNO3(5 mg/L);适宜的分化培养基是：改良N6+2,4D(0.5 mg/L)+6BA(2.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)+ABA(2 mg/L)。实验中观察到水仙体细胞胚的发生,在胚性愈伤诱导和分化体系优化基础上实现农杆菌介导GUS基因转化,稳定表达抗性愈伤GUS染色显示最佳胚性愈伤诱导培养基能促进水仙外植体感受态的形成,有利于外源基因的接受,PCR检测表明实验中获得3株转GUS基因阳性植株。     

凌风草组织培养体系的建立

以凌风草为材料,通过对该植株再生条件的优化,获得适宜凌风草愈伤组织再生的外植体材料和基本培养基,建立凌风草愈伤组织再生体系.试验结果表明:愈伤组织诱导的最适外植体为凌风草种子,最适基本培养基为MS培养基,最佳培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L+6-BA0.3 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+NAA0.1 mg/L+6-BA1.0 mg/L+KT2.0 mg/L;生根最佳培养基为MS+NAA0.2 mg/L+C 0.2 g/L.     

簸箕柳组培再生体系的建立

【目的】建立簸箕柳组培再生体系,为在簸箕柳中开展功能基因组研究奠定基础。【方法】分别以簸箕柳带腋芽茎段和种子为外植体,比较不同消毒方法、基本培养基类型、光照条件及植物生长调节剂等因素对不同外植体脱分化和再分化能力的影响。【结果】簸箕柳组培基本培养基成分以MS+蔗糖(30 g/L)+Phytagel(植物凝胶)(4.4 g/L)为宜。以幼嫩茎段为外植体,最佳消毒方法为70%(体积分数)酒精处理30 s+20%(质量分数)的次氯酸钠处理10 min,适宜诱导腋芽的生长调节剂组合为6-BA(1 mg/L)+NAA(0.01 mg/L),丛生芽继代增殖的适宜生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.05 mg/L),适宜腋芽生根的生长调节剂组合为IBA(0.2 mg/L)+NAA(0.03 mg/L)。以种子为外植体,最佳消毒方法为70%(体积分数)酒精处理10 s+20%(质量分数)的次氯酸钠处理2 min,光照条件下诱导愈伤组织的生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+ NAA(0.3 mg/L),并利用6-BA(0.5 mg/L)+ NAA(0.5 mg/L)和6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.8 mg/L)两种组合方式交替使用进行愈伤组织的继代培养; 愈伤组织分化成芽的生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+ TDZ(0.2 mg/L),生根培养基只需添加NAA(0.01 mg/L)。【结论】以茎段和种子作为外植体,通过不同的再生途径,均可以建立簸箕柳组织培养再生体系。     

太行菊顶芽离体高效再生系的建立

采用太行菊茎尖组培快繁技术,建立了太行菊无菌顶芽离体试管苗再生体系.通过MS培养基和激素配比实验,筛选出太行菊组织培养与快速繁殖的最佳培养基配方.结果表明:最适宜的外植体是幼嫩太行菊植株的茎顶芽;诱导愈伤组织的最适培养基为:MS NAA 0.2 mg/L 6-BA 2.0 mg/L;诱导丛生芽的最适培养基为:MS NAA 0.2mg/L 6-BA 2.0 mg/L IBA 0.1 mg/L,MS NAA 0.2 mg/L 6-BA 1.0 mg/L;诱导试管苗生根的最适培养基为:1/2 MS NAA 0.2mg/L;Ca2 可明显提高芽的再生率;电子显微镜进行病毒检测后,筛选出3个脱病毒株系可提供优质种苗的种源.     

红阳猕猴桃叶片再生体系的建立

文章以红阳猕猴桃组培苗的叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂对愈伤组织的诱导、不定芽的分化及生根的影响。结果表明,MS+0.5mg/L ZT(玉米素)+0.5mg/L 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)诱导产生淡黄色疏松的愈伤组织,MS+3.0mg/L 6-BA(6-苄基腺嘌呤)+1.0mg/L NAA(萘乙酸)诱导产生绿色致密的愈伤组织,愈伤组织诱导率均为100%。在MS+5.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基上愈伤组织的不定芽分化率达到100%。在1/2 MS+1.2mg/L IBA(吲哚丁酸)培养基上不定芽生根率为83.3%。     

牛樟的组织培养和植株再生

以牛樟侧枝茎段为外植体,建立了牛樟高效离体再生体系,研究取材季节、消毒方式、不同激素配比等因素对茎段再生的影响。结果表明:牛樟外植体采集最佳季节为春夏两季,此时采集的外植体其污染率与褐化率均较低,且出芽快、出芽率高。依次用1 000倍甲基托布津处理10 min、75%酒精消毒30 s和0.1% HgCl₂消毒8～10 min的消毒方式能明显降低牛樟外植体的污染率,且对外植体伤害较小。MS培养基为牛樟生长最适基本培养基,牛樟外植体诱导的最佳培养基为MS + 6-BA(1.0 mg/L)+ IBA(0.1 mg/L),芽诱导率高且芽体粗壮; 丛芽增殖的最佳培养基为MS + 6-BA(1.5 mg/L)+ IBA(0.1 mg/L),丛芽增殖率高且芽体健壮; 生根培养的最佳培养基为1/2MS + ABT(0.2 mg/L)+ IBA(0.05 mg/L)+ 活性炭(0.5 g/L),30 d后生根率可达100%且根系状态较好。     

华北蓝盆花再生体系的建立及其黄酮类化合物研究

为了有效保护和利用野生华北蓝盆花(Scabiosa tschiliensis Grunning)资源,通过离体培养技术建立了华北蓝盆花再生体系.研究结果表明:以子叶为外植体,诱导愈伤组织较适宜的培养基为M S+ TDZ1.0 mg/L,诱导率达82.74％;诱导不定芽的培养基为MS+6-BA 4.0 mg/L,诱导率为86.30％;生根培养基为MS+IBA 2.0 mg/L,生根率为73.85％.愈伤组织、野生植株总黄酮含量较高,其醇提物具有较强的抗氧化活性,对DPPH自由基具有很高的清除率.     

雪莲果的组织培养

为了得到长势一致的雪莲果幼苗,采用组织培养的方法进行快速繁殖.结果表明:培养基MS+2,4-D(2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)适合愈伤组织的诱导;培养基MS+BA(2.0mg/L)+N从(0.20mg/L)适合芽的诱导;培养基1/2MS+NAA(1.0mg/L)+IBA(0.5mg/L)适合再生植株生根.田园土:粗沙:腐殖土=1:1:1对组培苗的生长最有利.     

薄荷愈伤组织诱导与分化研究

本文研究了薄荷愈伤组织诱导与分化的影响因素。以薄荷茎段为外植体,研究培养基、激素水平对愈伤组织诱导、增殖培养的影响;以叶片为外植体,探讨叶片的愈伤组织诱导;以茎段、叶片和叶柄为外植体材料,比较不同外植体的愈伤组织诱导率。实验结果表明:MS比1/2 MS、B5培养基更适于茎段的诱导培养,诱导率达80%;叶片愈伤组织的诱导率为100%,以MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.5 mg/L NAA为最佳诱导培养基;幼叶是不同外植体中诱导效果最好的,以MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA为最佳诱导培养基。     

黄蜀葵茎段植株再生体系的建立和花各部愈伤组织总黄酮含量的测定比较

以黄蜀葵种子获得无菌苗的茎段为外植体,研究了不同浓度激素配比对愈伤组织诱导及分化再生植株的影响.结果表明:以75%酒精30s+0.1%升汞10min灭菌黄蜀葵种子,可获得较高发芽率的无菌苗;愈伤组织最适诱导培养基为改良MS+KT0.8 mg/L+IAA0.6mg/L,经愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.05 mg/L;最佳生根培养基为:1/2 MS+NAA0.1 mg/L;且移栽后成活率可达95%.用紫外分光光度法测定花和各部愈伤组织总黄酮的含量,对比发现:花中总黄酮的含量高于各部愈伤组织,愈伤组织中子房愈伤组织的总黄酮含量高于其他部位.