甘薯、番茄和拟南芥中丝氨酸羟甲基转移酶基因家族功能研究

丝氨酸羟甲基转移酶(serine hydroxymethyltransferase, SHMT)普遍存在于植物中,在高等植物的一碳代谢和光呼吸过程中起着重要作用,然而该家族在甘薯中的功能尚不清楚。文章通过同源比对获取甘薯、番茄、拟南芥中21个SHMT基因家族的信息,通过系统进化树分析,发现21个SHMT蛋白形成4个分支;利用蛋白motif分析、蛋白结构域分析、基因外显子内含子结构分析、蛋白的二级结构和三级结构预测、蛋白质理化性质分析、核定位序列(nuclear localization sequence, NLS)、亚细胞定位分析预测,发现蛋白高级结构和基因结构在同一分支内更为保守,即同源性越高的蛋白,其结构、性质更为接近。通过对番茄中SHMT基因进行表达量分析,发现SHMT基因可能在番茄种子发育、开花、果实成熟方面发挥作用。另外,通过对拟南芥SHMT(AtSHMT)家族在胁迫条件下的表达水平进行分析,推断多个AtSHMT基因对胁迫尤其是盐胁迫、冷胁迫、热胁迫产生应答,表明SHMT基因家族在胁迫应答中起到调控作用。综上,文章将甘薯、番茄、拟南芥中SHMT基因家族的生物信息学分析及基因表...     

O-GlcNAc丝氨酸单体的合成

O-GlcNAc是最常见的翻译后修饰之一,几乎在从原始细菌到哺乳动物和植物的所有的生物系统中都能发现.参考Schmidt的合成方法,利用乙硫基3,4,6-三-O-乙酰基-2-脱氧-2-(2,2,2-三氯乙氧)甲酰胺基-β-D-葡萄吡喃糖苷作为糖苷供体,合成了O-GlcNAc修饰丝氨酸单体Fmoc-Ser(Ac3-β-O-GlcNAc)-OH.得到的反应中间体和最终产物,通过电喷雾质谱(ESI-MS)鉴定.     

一株高产丝氨酸羟甲基转移酶基因工程菌的构建及发酵产酶条件优化

以E.coli AB90054基因组中DNA为模板,采用PCR方法扩增得到glyA基因,将该基因克隆到表达载体pET28a(+)中,转化表达菌株BL21(DE3)后筛选阳性重组子,并对筛选所得高表达基因工程菌G16进行培养条件和表达条件的优化。结果表明,当培养条件为38℃、pH为7.0、转速为150r/min时,基因工程菌的生长速度和菌液浓度最佳;当表达条件的诱导温度为30℃、诱导剂浓度为0.5mmol/L、诱导时间为5h时,基因工程菌诱导目的蛋白表达效果最好。通过SDS-PAGE分析和酶活测定后发现,在优化条件下基因工程菌G16发酵产丝氨酸羟甲基转移酶能力占菌体总蛋白的60%左右,且蛋白活性正常。     

铒丝氨酸配合物的合成与结构研究

在水溶液中合成了标题配合物［Ｅｒ＿２（Ｓｅｒ）＿３（Ｈ＿２Ｏ）＿４（ＣｌＯ＿４）＿６，并测定了红外光谱和单晶结构。晶体属空间群。晶胞参数：ａ＝１．１３４４（７）ｎｍ，ｂ＝１．１３９９（６）ｎｍ，ｃ＝１．０７１６（６）ｎｍ，ａ＝９７．９９（４）°，β＝１０５．４８（４）°，γ＝ｌ１８．５１（５）°，Ｚ＝１。该配合物为双核分子，诸丝氨酸均以桥式配位与两个Ｅｒ￣（３＋）离子相连，每个铒离子周围各有４个配位水分子，配位数为７，形成单帽三棱柱的配位多面体。     

碳酸二乙酯合成3-羟甲基-3-乙基氧杂环丁烷的工艺研究

对以三羟甲基丙烷与碳酸二乙酯为原料合成3-羟甲基-3-乙基氧杂环丁烷的工艺进行了研究。研究表明,合成3-羟甲基-3-乙基氧杂环丁烷的较佳工艺条件为:当碳酸二乙酯用量为0.2 mol时,碳酸二乙酯与三羟甲基丙烷的摩尔比为1.0:1.0,反应时间1 h,催化剂为KOH,用量为0.1 g,溶剂为甲醇,用量为3 mL。在此反应条件下,收率达60.6%。经GC分析产品的纯度为91.33%.     

氨基酸衍生物的BZ类振荡反应（Ⅰ）振荡现象及其影响因素的研究

本文报道氨基酸的衍生物与丙酮作混合底物的ＢＺ类振荡反应［ＫＢｒＯ３－（ＣＨ３Ｏ）３ＣＣＨ（ＮＨ２）ＣＯＯＨ－ＣＨ３ＣＯＣＨ３－ＭｎＳＯ４－Ｈ２ＳＯ４］体系的振荡反应．给出了典型振荡波形及振荡浓度范围，分析了对振荡反应影响的因素、温度效应．解释了两种有机底物在振荡反应中的作用，并初步探讨了反应的机理。     

相转移卡宾法不对称合成α—甲基—α—氨基酸

本文报道了以N—苄基氯化辛可宁为手性催化剂,由相转移卡宾法来不对称合成α—甲基—α—氨基酸.探讨反应条件对化学产率和光学收率的影响.     

甲基丙烯酸十六酯的合成及结构表征

研究了以α-甲基丙烯酸和十六醇为原料采用直接酯化法合成α-甲基丙烯酸十六酯的工艺条件,主要探讨了α-甲基丙烯酸与十六醇摩尔比、催化剂和阻聚剂的用量以及反应时间对酯化反应的影响，得出了合成的最佳条件：α-甲基丙烯酸与十六醇的摩尔比为1．2：1，对甲苯磺酸的质量分数为1．4％，对苯二酚的质量分数为0．4％，反应温度为110～120℃，反应时间为5h，酯化产率可达到95％以上．酯化产物经薄层色谱分析及红外光谱、核磁共振谱测定，证明所得产物为α-甲基丙烯酸十六酯．     

N—溴代丝氨酸的分子结构MO法研究

本文应用LCAO-MC-AM1方法研究了N-溴代丝氨酸在不同位置氢解离后形成数种可能结构,即(Ⅰ)HOCH_2CH(NH_2Br)COOH[+],(Ⅱ)HOCH_2CH(NHBr) CO-OH,(Ⅲ)HOCH_2CH(NHBr)COO[-],(Ⅳ)OCH_2CH(NHBr)COO[2-],(Ⅴ)HOCH_2CHCH(NH_2Br)COO。结果表明:(1) N-Br键的形成仅对氨基的酸性有影响;(2) 结构Ⅲ是稳定结构,它对反应物的进一步离解起支配作用。     

含丝氨酸残基手性肽核酸单体的合成

对文献合成方法进行了改进．以N—Boc氨基酸与自制甲烷磺酸酯反应，制备N—Boc氨基酸丙烯酯，以混合酸酐法实现关键中间体与1-胸腺嘧啶乙酸的缩合，总收率为26．4％，比文献方法提高了12％，成本降低，制备了含丝氨酸残基碱基为胸腺嘧啶的手性肽核酸单体．     

中和渗析法中部分氨基酸的传质过程研究(英文)

对甘氨酸、丙氨酸和丝氨酸在中和渗析法中的传质行为进行了研究,渗析结果表明,它们在等电点处的传质速率最大,对这种现象,可通过定量比较不同的pH条件下甘氨酸在离子交换膜上的浓度来予以解释,取决于溶液pH值的甘氨酸传质速度与所计算出的在不同pH条件下与阴、阳离子交换膜交换的甘氨酸浓度相一致。     

碘甲磺隆钠盐的合成新工艺

以染料中间体4,4’-二硝基二苯乙烯-2,2’-二磺酸（DNS）为起始原料,通过氧化、酰氯化、酯化、胺化,合成出4-硝基-2-磺酰胺基-苯甲酸甲酯,再将硝基还原后碘代,即制得碘甲磺胺．碘甲磺胺与三嗪缩合后与氢氧化钠反应得到碘甲磺隆钠盐．反应总收率为20％（以DNS计）,产品纯度90％．该工艺未见文献报道,原料便宜易得,操作简单,适于工业化生产．     

苯胺水溶液等离子体降解中间产物的HPLC分析

研究了苯胺溶液等离子体降解中间产物的HPLC分析，在254nm下检测到了邻苯二酚、对苯二酚、间苯二酚、对苯醌等中间产物；通过分离条件的优化选择，实验结果表明使用N，N-二甲基甲酰胺和减小pH值可缩短样品的保留时间，实验中选择流动相中N，N-二甲基甲酰胺的浓度为4%，pH=6．0。     

高效液相色谱柱前衍生法测定水产品中的 游离甘氨酸

建立一种高效液相色谱柱前衍生法测定水产品中的游离甘氨酸。采用C18色谱柱，以乙 腈+0.01 mol/L乙酸钠溶液（pH = 4.2）（1.2.7）= 3+7作为流动相，检测波长为254 nm，利用高效液相色 谱法-二极管阵列器进行外标法定量测定。实验结果表明，甘氨酸方法检出限为50 mg/kg，在浓度为 1 ~ 50 µg/mL范围内成线性关系，回收率为90.4%~101%，相关标准偏差（RSD）为2.5% ~ 3.3%。该方 法方便，灵敏度高，定性定量准确，分析时间短，可很好地实现水产品类样品中游离甘氨酸的测定。 同时此方法样品检测结果与氨基酸分析仪样品结果偏差均在10%范围内，也可作为氨基酸分析仪法 外的补充方法。     

HPLC法测定黄豆苷元胶囊的含量

建立HPLC法测定黄豆苷元胶囊的含量.方法:采用Hypersil ODS 色谱柱,(4.6 mm ×150 mm,5 μm),流动相水-乙腈(70∶30),流速为1 mL·min-1,检测波长249 nm,柱温30 ℃,进样量15 μL.结果:在1.0～20.0 μg·min-1浓度范围内线性关系良好,方法回收率为101 98%,RSD为1.45% (n＝9),精密度良好.结论:本方法灵敏、准确、专属性强,用于该制剂含量测定结果满意.     

人参HPLC指纹图谱的研究

建立了人参的高效液相指纹图谱.研究了不同的预处理方法、流动相组成、最佳检测波长、色谱柱温度等操作因素对人参指纹谱图的影响,并对不同产地和种类的人参药材的指纹图谱进行了比较.色谱条件为:色谱柱为不锈钢填充柱(Inertsil ODS-3,250 mm×4.6 mm,5 μm);检测波长为203 nm;流动相为乙腈-(质量分数为0.05%)磷酸水溶液梯度洗脱;流速1 mL/min ;分析时间90 min;柱温为30 ℃.     

溶剂法制备硫酸钾工艺条件的优化研究

以硫酸铵和氯化钾为原料制备硫酸钾具有诸多优点,但其转化率较低,添加有机溶剂可降低硫酸钾在反应体系中的溶解度而快速析出.在前期工作的基础上,采用L16(45)正交实验法对在硫酸铵和氯化钾反应系统中添加有机溶剂制备硫酸钾的优化工艺条件进行了研究,结果表明:在添加有机溶剂S时,其优化工艺条件为:反应时间80 min、溶剂质量分数50%、硫酸铵初始质量分数20%、配料比0.98、反应温度 25 ℃.在该条件下,氧化钾收率为93.40%,产品质量符合有关标准.     

高效液相色谱法测定联苯甲酸异构体的含量

建立了3位和4位联苯甲酸同分异构体混合物的高效液相色谱法(HPLC)含量测定.色谱柱为Symmetry C18,检测波长254 nm,流动相为甲醇-磷酸二氢钾(1.2 mol/L),流速1 mL/min.3-联苯甲酸的线性范围是48～720 mg/L,4-联苯甲酸线性范围是21～685 mg/L;最低检出质量浓度均为0.01 mg/L,相关系数分别为0.999 2和0.999 8;平均回收率分别是99.4 %和98.8 %(n=6),RSD分别为0.87 %和0.93 %.     

反相高效液相色谱法测定盐酸阿朴吗啡

建立了用反相高效液相色谱测定盐酸阿朴吗啡片剂中盐酸阿朴吗啡含量的方法.用C18(4.6mm×250mm,5μm)柱,甲醇∶0.02mol/LKH     

高效液相色谱法测定硒-甲基硒代半胱氨酸

建立硒-甲基硒代半胱氨酸(SeMC)测定方法,优选合成工艺,控制成品质量。采用高效液相色谱法(HPLC),测定条件为:色谱柱为HypersilC4(4.6mm×300mm,5μm),流动相为水(用磷酸调至pH2.50)-甲醇(95:5),检测波长235nm,流速1.0ml/min,柱温25℃。结果:硒-甲基硒代半胱氨酸的线性范围为0.08μg～2μg,r=0.9995,高、中、低三种不同浓度的平均加标回收率范围为99.97%～100.62%,RSD为0.53%～0.88%。结论:该法操作便捷,结果准确,适合合成工艺评价和成品质量控制。