鼻咽癌的角蛋白-粘液组化观察

作者采用同时显示角蛋白和粘液的PAP和ABC免疫组化染色法观察了14例经石蜡包埋的鼻咽癌组织切片,初步结果如下: 1.鼻咽柱状细胞和单纯化生的鳞状细胞均含人体角蛋白.当细胞的核呈异型性变时,角蛋白含量明显减少. 2.鼻咽分化差的鳞癌细胞一般含有角蛋白,虽然各个癌细胞之间含量有差异,但如果采用8型和18型单克隆抗体时,则情况有所不同,一些癌细胞呈阳性而另一些癌细胞则为阴性. 3.在呈异型性变的上皮中仍可找到少数几个粘液细胞,但在癌巢中却未见有粘液细胞. 本文讨论了上述结果在鼻咽癌组织发生学中的意义.     

Keratinase production and keratin degradation by a mutant strain of Bacillus subtilis

A new feather-degrading bacterium was isolated from a local feather waste site and identified as Bacillus subtilis based on morphological, physiochemical, and phylogenetic characteristics. Screening for mutants with elevated keratinolytic activity using N-methyl-N＇-nitro-N-nitrosoguanidine mutagenesis resulted in a mutant strain KD-N2 producing keratinolytic activity about 2.5 times that of the wild-type strain. The mutant strain produced inducible keratinase in different substrates of feathers, hair, wool and silk under submerged cultivation. Scanning electron microscopy studies showed the degradation of feathers, hair and silk by the keratinase. The optimal conditions for keratinase production include initial pH of 7.5, inoculum size of 2% （v/v）, age of inoculum of 16 h, and cultivation at 23 ℃. The maximum keratinolytic activity of KD-N2 was achieved after 30 h. Essential amino acids like threonine, valine, methionine as well as ammonia were produced when feathers were used as substrates. Strain KD-N2, therefore, shows great promise of finding potential applications in keratin hydrolysis and keratinase production.     

抗爪蟾角蛋白单克隆抗体的研究

本实验以非洲爪蟾(Xenopus laevis)成体皮肤角蛋白免疫的BALB/c鼠脾细胞与小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞在PEG的作用下进行融合,经HAT选择培养、ELISA筛选、反复克隆化及冻存复苏,获得四株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株。对其中一株杂交瘤细胞KD_(10)及其分泌的抗体进行了较全面的研究。     

银染巢式RT-PCR检测胃淋巴结微转移方法

以Ｋｅｒａｔｉｎ１９ｃＤＮＡ的套式引物建立了巢式ＲＴ－ＰＣＲ扩增Ｋｅｒａｔｉｎ１９ｍＲＮＡ的体系及ＰＡＧＥ－银染检测扩增产物的方法；对扩增体系进行优化后，分析了扩增特异性及检测敏感性，并对临床样品作了初步检测．结果表明：该扩增体系具有较好的特异性，其敏感性可达１０－６μｇＲＮＡ，即可从１０５个淋巴细胞中检出１个胃癌细胞；对临床样品检测的结果与病理检查结果相符．显示该法具有较好的可靠性．     

爪蟾胚胎发生中角蛋白的表达

本文应用二株抗角蛋白单克隆抗体(MAb D10为抗爪蟾角蛋白,MAb AF5为抗人角蛋白)对爪蟾卵母细胞、受精卵、不同发育期胚胎作免疫转移印迹观察,研究其角蛋白多肽亚单位的组成。发现不同发育期胚胎角蛋白表达有变化。同时应用免疫组织化学染色技术研究角蛋白在胚胎中的分布。发现角蛋白分布于表皮、脊索、嗅板、垂体原基、粘腺、咽上皮、神经管内表面等部位。     

体外培养人涎腺多形性腺瘤细胞及表面标记物的初步研究

体外培养15例人涎腺多形性腺瘤原发肿瘤组织,探讨体外培养的细胞与原发肿瘤组织的表面标志物表达情况。运用免疫组化法检测CK5/6、CK7、CK8/18、CK14、CK20,vimentin及肌上皮表面标记物α-SMA、calponin及p63在细胞和肿瘤组织中的表达。结果发现体外培养的多形性腺瘤细胞呈多样形,可同时表达角蛋白、肌上皮表面标记物及波形蛋白,与原发肿瘤表达基本一致。提示体外培养的多形性腺瘤细胞可能大部分来源于肌上皮细胞及导管上皮细胞等,这为研究涎腺多形性腺瘤肿瘤生物学多样性提供了实验依据。