中药新药前列栓给药途径选择的药动学依据

采用RP-HPLC法,比较研究前列栓经口和经肛门给药的药动学差异.结果表明: (1) 经肛门途径用药,小檗碱在多数兔体内为一室开放模型,少数呈现为二房室模型,个别只能用统计矩拟合,其中一房室模型药代参数为 t 1/2 K e=(96.2±37.8)mi n, c max =(178.9±88.9)μg·L-1 ,AUC=(47917.4±23255.6) μg·L-1·min;(2)经灌胃途径给药,多数兔血药浓度在检测限以下,仅有2只能测到完整曲线,可用一房室模型拟合,药代参数为 t 1/2 K e =(573.4±212.2) min, c max =(7.0±2.5)μg·L-1 ,AUC=(7725.2±4764.6)μg·L-1·min,灌胃与肛塞相比的相对生物利用度仅为26.07%和6.18%;(3) 前列腺组织药物浓度,经肛塞途径能测到部分1～2h时间点的小檗碱浓度,但不足以构成可分析的浓度-时间曲线,而灌胃途径则根本无法测到小檗碱浓度,两组间差异极显著.经肛塞给药有以下优点: 吸收速度快、血药浓度高、血药有效浓度维持时间长、靶器官前列腺组织内药物浓度相对较高,且药动学参数随兔不同而有较大的差异.研究为前列栓的经肛门途径给药和栓剂剂型的确立,提供了药代动力学依据.     

中药复方921粗提物的抗前列腺癌作用

为确定中药复方921粗提物的抗前列腺癌作用,采用SRB法考察921方粗提物对肿瘤细胞株的体外生长抑制作用,采用小鼠可移植瘤模型肝癌H22、肉瘤S180、前列腺癌TRAMP-C2和人前列腺癌细胞PC-3M裸鼠移植模型,考察其对体内肿瘤的生长抑制作用,并了解其与CTX合用时的增效和减毒作用。结果显示： 1） 921方粗提物对DU-145,PC-3M,EJ,TRAMP-C2等细胞株的GI_50约在1∶14.2～1∶73.5（稀释度）之间; 2） 对肝癌H22小鼠移植瘤的抑制率达42％,对肉瘤S180小鼠移植瘤的抑制率达52％,对TRAMP-C2小鼠移植瘤的抑制率达36％,对人前列腺癌细胞PC-3M裸鼠移植瘤的抑制率达44.2%,与CTX合用能起到协同抗肿瘤作用并且不增加毒性。结果表明中药复方921粗提物具有一定的抗前列腺癌作用。     

淫羊藿甙对阴茎海绵体的松弛效应及其作用机制

阴茎海绵体平滑肌NO-cGMP通路在勃起过程中起重要的调控作用. NO激活鸟苷酸环化酶而合成cGMP, 磷酸二酯酶Ⅴ型(PDE5)对cGMP的特异性水解作用使其灭活来参与调节阴茎勃起. 淫羊藿甙是从天然淫羊藿中分离出来的单体, 对家兔阴茎海绵体平滑肌具有较强的松弛作用(EC50 = 4×10-4 mol/L), 其作用机制与抑制PDE5的活性而增强NO-cGMP通路活性有关.     

抗人膀胱癌单克隆抗体的锝－99m标记及荷瘤裸鼠放射免疫显像

抗人膀胱癌单克隆抗体ＢＤＩ－１通过２－巯基乙醇直接还原法标记得－９９ｍ制备了９９ｍＴｃ－ＢＤＩ－１。质量控制实验结果表明，标记率为６９．９％，分离纯化后标记抗体的放化纯度高于９０％。标记抗体的免疫活性分数为８１％，亲和常数为１．２２ｘ１０９Ｍ－１。本文在上述结果基础上，研究了标记抗体在荷人膀胱癌裸鼠体内的分布及放射免疫显像。９９ｍＴｃ－ＢＤＩ－１经尾静脉注射后，分别在４，１６及２２小时γ照相后断颈处死小鼠，取脏器称湿重并计数。９９ｍＴｃ－ＢＤＩ－１注射后２２小时肿瘤清晰显示，肿瘤对标记抗体的吸收率为２０．７％ＩＤ／ｇ：平均Ｔ／ＮＴ为１０．５２，最小Ｔ／ＮＴ为２．９０（肿瘤／肾脏）；最大Ｔ／ＮＴ为２０．７（肿瘤／小肠或肌）。上述研究结果为进一步临床应用奠定基础。     

肾癌特异相关新基因GYLZ-RCC18的克隆及功能研究

在前期应用抑制性消减杂交技术（SSH）克隆肾癌相关新基因片段GYLZ－RCC18的基础上,应用SMART RACE技术克隆GYLZ－RCC18的全长约3．5kb(GenBank登录号：BE 825133）;应用免疫荧光原位杂交技术进行染色体定位;应用逆转录PCR的方法特异扩增其第1可读框区504 bp（碱基对）长序列片段,检测其在肾癌组织和细胞系中的表达特点,以及与肾癌组织分级、分期的关系。结果表明GYLZ－RCC18定位于第14号染色体末端,它在肾癌特异高表达,正常肾表达量极低甚至不表达,两者表达量差别在1－9倍之间;GYLZ－RCC18在高分级、高分期肾癌中表达明显高于低分级、低分期肾癌的表达。通过转染GYLZ－RCC18的反义寡核苷酸阻断其表达,可明显抑制GRC－1的生长、降低其增殖活性、减少核分裂、并诱导其持续性凋亡。研究表明GYLZ－RCC18是与肾癌发生发展密切相关的重要癌基因,它的表达与肾癌细胞的生存、增殖、抗凋亡发展密切相关,它的成功克隆为阐明肾癌发生发展的分子生物学机制开辟了新的途径。     

淫羊藿甙对阴茎海绵体的松弛效应及其作用机制

阴茎海绵体平滑肌NO-cGMP通路在勃起过程中起重要的调控作用.NO激活鸟苷酸环化酶而合成cGMP,磷酸二酯酶Ⅴ型(PDE5)对cGMP的特异性水解作用使其灭活来参与调节阴茎勃起.淫羊藿甙是从天然淫羊藿中分离出来的单体,对家兔阴茎海绵体平滑肌具有较强的松弛作用(EC ₅₀ = 4×10^-4 mol/L),其作用机制与抑制PDE5的活性而增强NO-cGMP通路活性有关.     

中药复方921粗提物的抗前列腺癌作用

为确定中药复方921粗提物的抗前列腺癌作用,采用SRB法考察921方粗提物对肿瘤细胞株的体外生长抑制作用,采用小鼠可移植瘤模型肝癌H22、肉瘤S180、前列腺癌TRAMP-C2和人前列腺癌细胞PC-3M裸鼠移植模型,考察其对体内肿瘤的生长抑制作用,并了解其与CTX合用时的增效和减毒作用。结果显示:1)921方粗提物对DU-145、PC-3M、EJ、TRAMP-C2等细胞株的GI50约在1:14.2～1:73.5(稀释度)之间;2)对肝癌H22小鼠移植瘤的抑制率达42%,对肉瘤S180小鼠移植瘤的抑制率达52%,对TRAMP-C2小鼠移植瘤的抑制率达36%,对人前列腺癌细胞PC-3M裸鼠移植瘤的抑制率达44.2%,与CTX合用能起到协同抗肿瘤作用并且不增加毒性。结果表明中药复方921粗提物具有一定的抗前列腺癌作用。     

PKB与SMAD3相互作用调节前列腺癌细胞株PC-3对TGF-β 的敏感性

前列腺癌对TGF-β诱导的生长抑制不敏感, 而PI3K-PKB信号通路在大多数前列腺癌中高度活化. 通过生长抑制实验和荧光素酶报告基因系统发现, PI3K-PKB信号通路抑制前列腺癌细胞PC-3对TGF-β诱导的生长抑制和细胞周期停滞的反应; PI3K-PKB信号通路抑制TGF-β诱导的基因转录. 免疫共沉淀结果显示, PKB与Smad3之间存在蛋白质相互作用, 两者之间的相互作用是通过Smad3的MH2和Linker结构域介导的; TGF-β减弱PKB与Smad3的结合, 胰岛素(模拟PKB活化)增强两者的结合; PKB与Smad3的结合是PKB激酶活性依赖的, 丧失激酶活性的PKB不能与Smad3相互作用. 结果表明, 前列腺肿瘤丧失对TGF-β的敏感性与PI3K-PKB 信号通路的过度活化明显相关. PI3K-PKB 信号通路通过PKB与Smad3的结合抑制TGF-β诱导的生长抑制和基因转录.     

应用抑制性消减杂交技术克隆鉴定肾癌特异表达基因

应用抑制性消减杂交技术（ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｈｙｂｒｉｄｄｉｚａｔｉｏｎ,ＳＳＨ）,成功地构建了高消减效率的人肾癌细胞与正常肾组织差异表达的ｃＤＮＡ消减文库,从中随机挑取２００个克隆进行酶切分析,结果显示其中１９０个均得到５０～４００ｂｐ插入片段,１０个无插入片段。对其中１０个插入的ｃＤＮＡ片段进行测序后经ＧｅｎＢａｎｋ检索表明１０个片段均为未知新序列,其中ＲＣＣ１８为     

ATF5与TCF4相互作用及其对Wnt信号通路的调控

应用酵母双杂交技术, 鉴定Wnt通路关键信号分子TCF4与cAMP效应元件结合蛋白家族新成员——激活转录因子5(ATF5)之间的相互作用, 酵母表型分析和b-半乳糖苷酶(β-gal)活性测定结果发 现, 两者的作用位于ATF5蛋白C端含有碱性亮氨酸拉链(bZIP)区域(162 ~ 282 aa). 通过受TCF启动的荧光酶报告系统分析ATF5对Wnt信号通路的影响, 结果显示ATF5蛋白C端能进一步加强TCF4对Wnt通路的激活效应. 由此提示, ATF5可能是Wnt通路下游信号的辅助激活因子(co-activator), 它能协同 b-连环蛋白/TCF4参与Wnt信号通路的激活.