中药新药前列栓给药途径选择的药动学依据

采用RP-HPLC法,比较研究前列栓经口和经肛门给药的药动学差异.结果表明: (1) 经肛门途径用药,小檗碱在多数兔体内为一室开放模型,少数呈现为二房室模型,个别只能用统计矩拟合,其中一房室模型药代参数为 t 1/2 K e=(96.2±37.8)mi n, c max =(178.9±88.9)μg·L-1 ,AUC=(47917.4±23255.6) μg·L-1·min;(2)经灌胃途径给药,多数兔血药浓度在检测限以下,仅有2只能测到完整曲线,可用一房室模型拟合,药代参数为 t 1/2 K e =(573.4±212.2) min, c max =(7.0±2.5)μg·L-1 ,AUC=(7725.2±4764.6)μg·L-1·min,灌胃与肛塞相比的相对生物利用度仅为26.07%和6.18%;(3) 前列腺组织药物浓度,经肛塞途径能测到部分1～2h时间点的小檗碱浓度,但不足以构成可分析的浓度-时间曲线,而灌胃途径则根本无法测到小檗碱浓度,两组间差异极显著.经肛塞给药有以下优点: 吸收速度快、血药浓度高、血药有效浓度维持时间长、靶器官前列腺组织内药物浓度相对较高,且药动学参数随兔不同而有较大的差异.研究为前列栓的经肛门途径给药和栓剂剂型的确立,提供了药代动力学依据.     

肾癌特异相关新基因GYLZ-RCC18的克隆及功能研究

在前期应用抑制性消减杂交技术（SSH）克隆肾癌相关新基因片段GYLZ－RCC18的基础上,应用SMART RACE技术克隆GYLZ－RCC18的全长约3．5kb(GenBank登录号：BE 825133）;应用免疫荧光原位杂交技术进行染色体定位;应用逆转录PCR的方法特异扩增其第1可读框区504 bp（碱基对）长序列片段,检测其在肾癌组织和细胞系中的表达特点,以及与肾癌组织分级、分期的关系。结果表明GYLZ－RCC18定位于第14号染色体末端,它在肾癌特异高表达,正常肾表达量极低甚至不表达,两者表达量差别在1－9倍之间;GYLZ－RCC18在高分级、高分期肾癌中表达明显高于低分级、低分期肾癌的表达。通过转染GYLZ－RCC18的反义寡核苷酸阻断其表达,可明显抑制GRC－1的生长、降低其增殖活性、减少核分裂、并诱导其持续性凋亡。研究表明GYLZ－RCC18是与肾癌发生发展密切相关的重要癌基因,它的表达与肾癌细胞的生存、增殖、抗凋亡发展密切相关,它的成功克隆为阐明肾癌发生发展的分子生物学机制开辟了新的途径。     

应用抑制性消减杂交技术克隆鉴定肾癌特异表达基因

应用抑制性消减杂交技术（ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｈｙｂｒｉｄｄｉｚａｔｉｏｎ,ＳＳＨ）,成功地构建了高消减效率的人肾癌细胞与正常肾组织差异表达的ｃＤＮＡ消减文库,从中随机挑取２００个克隆进行酶切分析,结果显示其中１９０个均得到５０～４００ｂｐ插入片段,１０个无插入片段。对其中１０个插入的ｃＤＮＡ片段进行测序后经ＧｅｎＢａｎｋ检索表明１０个片段均为未知新序列,其中ＲＣＣ１８为