DNA在固体支持物上的固定化

DNA固定化在核酸化学、生物计算、基因芯片制作等方面有着不可替代的重要作用。本文综述了DNA分子在纤维素膜、金膜和玻璃片等支持物上的固定化方法和特点,以及国外最新研究进展。简要地讨论了DNA在固体支持物上固定化研究发展的趋势。     

微胶囊法和交联法固定化磷脂酶A1的比较

采用不同固定化磷脂酶A1的方法，即交联法和微胶囊法，以壳聚糖和海藻酸钠为载体，戊二醛为交联剂，固定化磷脂酶A1．通过考察固定化载体和固定化酶的性质以及固定化酶的活力回收等，比较两种固定化酶方法的优劣．结果表明，微胶囊包埋法固定化磷脂酶A1工艺较佳．     

卵磷脂的薄层扫描法测定

采用薄层扫描法测定卵磷脂质量的方法，以V（氯仿）：V（无水乙醇）：V（三乙胺）：V（水）＝10：11．3：11．7：2．7为展开剂，溴百里酚蓝碱液为显色剂，日本岛津CS－930型薄层扫描仪定量扫描。测得精密度变异系数为2．45％，稳定性变异系数为0．364％，回收率100．4％－102．2％范围内。该方法简捷方便，重现性，稳定性较好。     

铁（Ⅲ）卟啉络合物在PhIO存在下的氧化分解反应

利用ＵＶ光谱方法研究了７种具有不同立体结构的铁（Ⅲ）卟啉络合物在ＰｈＩＯ存在下的氧化分解反应。动力学初步研究表明铁（Ⅲ）卟啉络合物的氧化分解对铁（Ⅲ）卟啉络合物是二级反应，７种铁（Ⅲ）卟啉络合物的氧化分解速率常数大小顺序为（Ｔｏ－ＲＰＰＦｅＣｌ，Ｒ＝）：Ｈ》Ｍｅ（７１．１）〉Ｅｔ（５９．１）〉ｎ－Ｐｒ（４２．２）〉ｔ－Ｂｕ（２７．３）〉ｎ－Ｂｕ（２１．０）〉ｉ－Ｐｒ（９．８６）。加入某些中性有机配     

铁卟啉的空间效应对其催化羟基化反应性能的影响

研究了ＴＰＰＦｅＣｌ和６种具有不同空间结构的氯合、中位四（邻烷基苯基）卟吩合铁（Ⅲ）［Ｔ（ｏ－Ｒ）ＰＰＦｅＣｌ，Ｒ＝Ｍｅ、ＥＴ、ｎ－Ｐｒ、ｎ－Ｂｕ、ｉ－Ｐｒ和ｔ－Ｂｕ］催化亚碘酰苯使环己烷羟基化反应。发现邻位烷基取代的铁卟啉的催化速率和催化产率都比ＴＰＰＦｅＣｌ的大，这７种铁卟啉的催化速率和催化产率（％）大小顺序分别为［Ｔ（ｏ－Ｒ）ＰＰＦｅＣｌ，Ｒ＝］ｉ－ｐｒ＞Ｅｔ＞ｔ－Ｂｕ＞ｎ－ｐｒ＞Ｍｅ＞ｎ－Ｂｕ＞ＴＰＰＦｅＣｌ和ｉ－Ｐｒ（５８）＞Ｅｔ（５７）＞ｎ－Ｐｒ（５２）＞Ｍｅ（５０）＞ｎ－Ｂｕ（４８）＞ｔ－Ｂｕ（４６）＞ＴＰＰＦｅＣｌ（３５），根据研究结果，认为邻位烷基的空间作用可能加速了铁卟啉与亚碘酰苯加成中间体中碘—氧键断裂，助进了高价铁氧酰活性中间体形成，提高了催化速率和催化产率。     

羟胺-乙二胺-钴(Ⅱ)显色体系与甲醛质量浓度测定的研究

采用正交试验法研究了羟胺-乙二胺-钴(Ⅱ)的显色体系与甲醛反应的最佳条件．最 佳条件为5．00×10-2 mol／L羟胺溶液2．00 mL,1．00×10-1 mol／L乙二胺溶液3．0 mL,2．00×10-1 moL／L钴(Ⅱ)溶液5．00 mL,0．200 mol／L硫酸溶液0．80 mL,加热温度为55℃,加热时间为6 min．甲 醛质量浓度在0．080-3．200μg／mL范围内线性关系良好,检测下限为0．061 0 μg／mL,线性相关系数 为0．998 7．该法可用于饮用水加标回收率实验及脲醛树脂中的游离甲醛质量浓度检测．     

麦麸发酵产酶制备并提纯阿魏酸

采用黑曲霉固体发酵麦麸制备混合酶制剂,确定了最佳发酵条件:发酵温度36℃,时间72 h.同时,以采用所得酶制剂降解去淀粉麦麸,D201#大孔树脂离子交换法对阿魏酸分离提纯,探讨了上柱工艺和洗脱条件,确定最适离子交换操作工艺:室温下,上柱阿魏酸质量浓度在2 000~3 000 mg/L,pH 9.0,上柱流速为1 mL/m in;洗脱剂配比为V(无水乙醇)∶V(水)∶V(盐酸)=60∶36∶4,洗脱流速为1 mL/m in.在该操作工艺条件下,阿魏酸收率达97%以上,纯度大大提高.     

金属簇合物的研究与发展概况

简述了20世纪90年代以来金属簇合物的研究进展,重点介绍了近年合成的几种具有新结构形式和新成键方式的金属羰基簇合物的衍生物及手性四面体金属簇合物,探讨了金属簇合物的发展趋势.     

在载玻片上制备高杂交效率的DNA芯片

目的 :改进玻璃基质上固定DNA的方法 ,提高固定DNA的杂交效率 .方法 :玻片用 β -(对、间氯甲基苯基 )三氯硅乙烷和 β -苯基三氯硅乙烷二组分混合硅烷化试剂处理 ,再用NaI丙酮溶液处理 ,在表面自组装形成带有苄碘功能基的二组分混合单层硅烷膜 .巯基修饰的DNA共价偶联到这一自组装的硅烷膜上 .结果 :放射性分析证实玻璃基质表面共价固定DNA的优化密度为9 3× 10 - 2 μmol/m2 ,目标DNA杂交密度为 8.6× 10 - 2 μmol/m2 ,固定DNA的杂交率为 93% .结论 :采用两步竞争性反应的方法能够较容易地控制DNA在芯片上的固定密度 ,固定的DNA在芯片分布较均匀 ,因此制得的DNA芯片具有较高杂交效率和杂交密度 ,可方便地用于核酸杂交和探测研究     

一种玻璃载片共价键固定DNA的新方法

目的：建立了一种简单、快速、高效共价固定DNA到玻璃其质上的方法。方法：玻片用β-（对、间氯甲基苯基）三氯硅乙烷处理在表面自组装形成带有苄氯功能基的单层硅烷膜，然后再用NaI丙酮溶液处理将苄氯基转化为苄碘基。巯基修饰的DNA通过巯基与苄碘基反应形成硫醚键共价偶联到这一自组装的硅烷膜上。结果：放射性分析证实玻璃基质表面共价固定DNA的密度为3.2nmol/m^2。用放射性标记的目标DNA进行杂交试验表明最大杂交密度的0.77nmol/m^2。结论；本方法只需一步偶联反应，反应时间短、偶联效率高、操作简单、不需要严格的试剂，而且制得的DNA芯片有较高的温度稳定性，可方便地用于核酸杂交和探测研究。