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在羊肾细胞培养液中繁殖的兔化猪瘟弱毒,经10%～15%聚乙二醇沉淀后,置低温-20℃冰箱过夜,离心3000r·p·m×15分钟,弃上清,沉淀用磷酸缓冲液溶解,透析后再经过 Sephadex G-50层析柱纯化,可得兔化猪瘟弱毒浓缩液。此浓缩液经50000倍稀释后作抗原感染家兔,获得定型热升温曲线,在兔降温后,再攻标准兔毒40×1毫升不再升温,证明达到50000倍对兔最小感染量(m、i、d、)的疫苗要求,与原来疫苗感染力相似,即聚乙二醇(PEG-6000)的回收率达100%,而相应的上清液几乎没有感染力,与 SDS-PAGE 电泳检查结果一致.目前国外猪瘟病毒多用蓖麻籽凝集素(CBA)作沉淀剂,方法虽简,但成本较高,不合我国国情。本文提出的方法,既经济而有效,其组分经蛋白质化学和免疫学方法鉴定,证实可作为亚单位成分疫苗. 相似文献
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