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泡桐遗传转化系统的建立 总被引:7,自引:0,他引:7
通过农杆菌Ti质粒介导,将模式基因(新霉素磷酸转移酶+β-葡萄糖酸苷酶基因)导入泡桐,并对影响转化及选择再生的一系列因子进行优化,创建了泡桐的遗传转化系统。优化后的系统为:用泡桐完整叶片作外植体,侵染转化的菌液浓度OD600值控制在0.1~0.2,经20mmol/L Ca^2+处理,共培养6d;在10mg/L卡那霉素+250mg/L羧苄青霉素的选择压下培养数天,随后在仅含Kan的选择压下继续培养, 相似文献
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通过农杆菌 Ti 质粒介导,将模式基因( 新霉素磷酸转移酶+ β葡萄糖酸苷酶基因) 导入泡桐,并对影响转化及选择再生的一系列因子进行优化,创建了泡桐的遗传转化系统.优化后的系统为:用泡桐完整叶片作外植体,侵染转化的菌液浓度 O D600 值控制在0 .1 ~0 .2 ,经20 m m ol/ L Ca2 + 处理,共培养6d ;在10m g/ L 卡那霉素+ 250 m g/ L 羧苄青霉素的选择压下培养数天,随后在仅含 Kan的选择压下继续培养,直至抗性芽的再生.通过此遗传转化系统,获得了抗 Kan的泡桐芽,转化频率可达84 % .组织化学法检测表明, G U S 报告基因不仅在侵染的叶片中得到短暂表达,而且在抗性芽和抗性愈伤组织中得到稳定表达 相似文献
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