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经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96 H5N1亚型1.7kb HA基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序。亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacA的蜜蜂蜂毒素分泌信号下游中,测序正确后与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTM DNA)共转染Sf9昆虫细胞。将重组杆状病毒感染HFive细胞,72h左右收获细胞,超声波裂解,SDS—PAGE结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFive细胞中获得表达。蛋白胶薄层扫描分析显示:表达的HA蛋白占重组杆状病毒感染细胞总蛋白含量的17.1%。Western-blot 及血凝实验结果显示,表达的禽流感H5N1亚型病毒HA蛋白具有生物学活性。表达的H5 HA蛋白定量乳化后,皮下多点注射免疫SPF 级BALB/c雌性小鼠,免疫后产生了H5 HA特异抗体,并在三免前后达到并保持较高水平。用致死剂量的HPAIV H5N1攻击小鼠,免疫组小鼠提供了100%的保护力,而对照组小鼠先后发病且死亡:为研制禽流感H5N1亚型病毒亚单位疫苗,防制禽流感奠定了基础。 相似文献
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本文探讨了有关禽流感的基本概念,描述了其特点、变异机制、现实危害、对人类的潜在威胁和直接感染,并对该病的出现和流行所引发的思考进行了归纳和总结。 相似文献
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新甲型H1N1流感病毒血凝素基因(HA)突变网络结构 总被引:1,自引:0,他引:1
流感研究上海协作组 何云刚 丁国徽 边超 黄忠 蓝柯 孙兵 王学才 李亦学 王红艳 王小宁 杨忠 钟扬 金维荣 熊慧 戴建新 郭亚军 王皓 车小燕 吴凡 袁政安 张曦 曹志伟 周晓农 周佳海 马志永 童光志 赵国屏 金力 《科学通报》2009,54(12):1645-1647
构建了新甲型H1N1流感病毒血凝素基因的变异网络图. 同源性比对表明, 来自墨西哥的一个病毒序列类型为此次新流感病毒的原始序列类型. 通过血凝素基因658A和1408T突变可将此新流感病毒序列分为墨西哥类型、过渡类型和纽约类型3个主要类型. 这3个类型在地理分布上具有明显差别. 相似文献
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本课题的研究起始于1996年,得到“九五”国家高技术研究发展计划(863计划)课题(课题名称:鸡传染性喉气管炎、马立克氏病和新城疫二价、三价基因工程疫苗的研究)的支持(1996~2000年)。后来,该成果又得到了“十五”国家863计划课题(课题名称:鸡痘病毒载体多价基因工程疫苗及禽流感等亚单位疫苗的研制)的支持(2001~2005年)和农业科技成果转化资金项目课题(课题名称:传染性喉气管炎重组鸡痘病毒二价疫苗)(2001年~2003年)的资助。 相似文献
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流感研究上海协作组 严安 丁国徽 周正峰 董辉 张亚坤 祝雷 何云刚 边超 张国庆 李亦学 孙兵 黄忠 蓝柯 金力 王红艳 王小宁 杨忠 钟扬 戴建新 郭亚军 王皓 车小燕 吴凡 袁政安 张曦 曹志伟 周晓农 周佳海 马志永 童光志 赵国屏 金维荣 熊慧 《科学通报》2009,54(12):1648-1648
针对甲型流感病毒HA基因的H1, H2, H3, H5, H7和H9亚型的序列特征, 设计专用PCR引物, 通过RT-PCR特异扩增相应片段并测定序列, 可以准确地区分H1和H3感染人类的流感病毒及其亚型. 这种基于流感病毒核酸序列测定的特异性检测方法, 不仅可以用于新型甲型H1N1病毒的快速确诊和分型, 并且还可推广应用于今后其他流感病毒或具有爆发潜力的新型流感病毒的监测. 相似文献
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甲型H1N1流感病毒HA蛋白结构模建与构象表位分析 总被引:2,自引:0,他引:2
流感研究上海协作组 吴迪 徐天磊 孙静 戴建新 丁国徽 何云刚 周正峰 熊慧 董辉 金维荣 边超 金力 王红艳 王小宁 杨忠 钟扬 王皓 车小燕 黄忠 蓝柯 孙兵 吴凡 袁政安 张曦 周晓农 周佳海 马志永 童光志 郭亚军 赵国屏 李亦学 曹志伟 《科学通报》2009,54(12):1642-1644
最近几个月来, 一种新型流感病毒H1N1在全球流行. 本文运用生物信息技术, 从NCBI发布的新型A H1N1流感病毒基因序列出发, 通过同源模建方法构建了HA蛋白三维结构, 利用自主开发的蛋白抗原空间表位预测程序SEPPA预测了HA蛋白潜在空间表位氨基酸, 并与以往流感病毒HA蛋白潜在构象表位进行了比较. 结果发现HA蛋白中58个氨基酸残基具有较强的免疫原性, 大部分在HA蛋白球状头部表面上聚集成簇, 构成空间抗原表位. 与以往流感病毒HA蛋白潜在空间表位相比, 虽然坐落位置相似, 但新的抗原表位在静电势性质上明显不同于以往流感病毒HA蛋白抗原表位. 相似文献
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