分泌型Survivin真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达

目的:构建含6个组氨酸标签(His6)的小鼠存活素(Survivin)融合蛋白的真核表达载体,及其在真核细胞中的表达。方法:根据小鼠Survivin序列设计引物,经过RT-PCR克隆Survivin的cDNA并进一步构建分泌型Sur-vivin的真核表达载体,经测序鉴定后在大肠杆菌中扩增在HeLa细胞中表达;以金属离子螯合层析富集,再用免疫印迹法鉴定。结果:克隆到Survivin编码区全长序列,经DNA测序后证明与已报道序列相同。构建氨基端融合小鼠IL-2信号肽,羧基端带有His6标签的Survivin融合蛋白的真核表达载体,在HeLa细胞中转染成功并且表达;细胞上清经HisTrap HP柱层析富集后,进行免疫印迹分析,表明该融合蛋白以分泌型方式在HeLa细胞中表达。结论:成功克隆Survivin的cDNA,并构建其分泌型真核表达载体。     

构建的Flt3L胞外域原核表达载体在大肠杆菌中的表达

目的：构建含组氨酸标签的FMS样酪氨酸激酶3配体（Fms—like tyrosine kinase 3 ligand,Fh3L）胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。方法：依据Fh3L基因序列设计引物,以RT—PCR的方法从小鼠脾脏总RNA中克隆Fh3L基因并构建其胞外域原核表达载体,测序鉴定后在大肠杆菌BL21（DE3）菌株中诱导表达,用免疫印迹鉴定。结果：克隆到Flt3L编码区全长序列,经DNA测序证明与已报道的序列相同;构建羧基端带有His6标签的Flt3L胞外域蛋白的原核表达载体,转化大肠杆菌后SDS-PAGE分析显示在BL21（ED3）中获得较高表达;免疫印迹分析表明IPTG诱导后表达的Flt3L胞外域蛋白的相对分子质量（Mr）为19000,与理论值相符,此蛋白与抗His6标签的抗体发生特异性反应。结论：成功克隆Flt3L基因,构建其胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得表达。     

沼气规模化干法发酵技术与装备研究

1 立项背景和课题研究进展 我国是世界上农业废弃物产出量大的国家,畜禽粪便、农作物秸秆、蔬菜废弃物、乡镇生活垃圾和人粪等都是生产有机肥料或沼气的理想原料。迫于能源和环境保护的双重压力,既能生产清洁能源——沼气,又可得到优质有机肥料,并能有效减少农业废弃物对环境的污染规模化干法沼气发酵技术,受到国内外的高度关注。     

以羧酸为酰化试剂的Friedel-Crafts酰基化反应

分别介绍了以脂肪族和芳香族羧酸为酰化试剂的Friedel-Crafts酰基化反应,重点比较了各种催化剂的优缺点,指出以羧酸为酰化试剂、以环境友好的固体酸为催化剂的Friedel-Crafts酰基化反应是今后芳香酮类化合物合成的发展方向.     

单、双季戊四醇联产工艺的优化

以甲醛、乙醛和氢氧化钠为原料,对单、双季戊四醇的合成工艺进行了研究.系统考察了反应物的物质的量之比、反应终温、单季戊四醇加入量等对反应的影响,确定了最佳反应条件:在反应终温为46℃,n（甲醛）∶n（乙醛）∶n（氢氧化钠）=6.0∶1.0∶1.2时,加入质量分数为6％的单季戊四醇,乙醛的转化率达到100％,单季戊四醇的选...     

模糊集的贴近度及多维综合贴近度

通过对传统F集贴近度的公理化定义进行改造,从而用普通函数的形式对两个F集之间的贴近度进行了更加全面、合理的描述。然后,将描述两个F集之间贴近度的函数推广到多维领域,使得所定义的综合贴近度能够对受多种因素影响的全体F集的综合贴近度进行度量。从而为模糊诊断的自学习功能提供了一条很好的解决途径。     

随机波动方程的非线性滤波的极限行为

研究一类白噪声驱动的随机波动方程.在获得随机波动方程依分布收敛到其极限系统后，使用指数鞅技术、Kallianpur-Striebel公式和Skorokhod表示定理，证明了随机波动方程和其极限系统在带有Lévy噪声的观测系统中所生成的非线性滤波的收敛行为.     

纳米硅铝酸盐的水热制备及催化性能

采用水热法制备了一系列纳米硅铝酸盐材料,考察了晶化时间、模板剂、硅源、铝源、稀土离子掺杂等对材料制备的影响.发现以TEAOH为模板剂,白炭黑为硅源,硫酸铝为铝源,铈离子掺杂制备的硅铝酸盐在苯甲醛与吲哚的Friedel-Crafts烷基化反应中的催化活性最好.通过XRD,BET和SEM表征了该材料的结构特性.     

杭丽热电热网概况和汽轮机选型

本文介绍丽水市杭丽热电有限公司热网工程概况和汽轮机的选型分析,为项目投产后机组的高效率运行打下坚实的基础。     

国家的经济发展水平对学校体育的影响及其战略性对策

学校体育是教育的重要组成部分,是国民体育的基础,它的发展同样受经济规律所制约。我国目前正大力进行现代化建设,经济的发展赋予教育以新的历史使命。为完成学校体育所承担的使命,必须分析我国在科学技术进步的条件下,社会进程和经济的发展对学校体育的影响;研究社会主义经济规律在教育和学校体育领域中发生作用的特点以及经济发展为学校体育所能提供的经济水平等问题,这是制定学校体育发展战略目标应当考虑的一个基本因素。