超声酶促维生素A棕榈酸酯反应的动力学

考察超声辐照下影响合成维生素A棕榈酸酯反应的因素(溶剂、底物摩尔比、底物浓度、反应时间、酶量和超声功率),并优化了反应条件:在10 mL的正己烷溶剂中,0.164 g维生素A醋酸酯和0.32 g棕榈酸,在酶与维生素A醋酸酯的质量比为1∶4的固定化脂肪酶Novozym 435催化下,超声功率为90 W,反应6 h,酯化率可达82%。并对其动力学进行了研究,由非线性拟合得到动力学参数:最大反应初速率(rmax)为0.522 mmol/(min.g);维生素A醋酸酯的米氏常数为0.404 mmol/L;棕榈酸的米氏常数为0.034 mmol/L。     

偏甘油酯脂肪酶PrLip的重组表达及酶学性质表征

偏甘油酯脂肪酶因其独特的底物偏好性具有广阔的应用前景。研究从食品安全菌娄地青霉的基因组中发现了一个假定的偏甘油酯脂肪酶prlip基因,通过全基因合成技术获得该酶基因序列,并构建了PrLip组成型表达的毕赤酵母基因工程菌。工程菌在30℃发酵培养60h,发酵活力达到22.26U/mL。利用阴离子交换层析法纯化,获得纯度大于90%的脂肪酶PrLip。酶学性质研究发现该酶的最适反应温度为45℃,最适反应pH值为7.0,40℃的半衰期为6h,水解及酯化反应证实PrLip是一种偏甘油酯脂肪酶。脂肪酶PrLip具有良好的温度耐受性及对大多数表面活性剂的耐受性,使其具有广阔的工业应用前景。     

响应面优化脂肪酶催化Baeyer-Villiger反应制备ε-己内酯

固定化T.laibaccii脂肪酶介导化学-酶Baeyer-Villiger氧化法制备ε-己内酯.运用响应面法进行了实验设计,获得了最优反应条件:环己酮初始浓度为1.22 mol/L,环己酮与过氧化氢脲的物质的量比为1∶1.3,反应温度为56.5 ℃,产率达到98.06%,浓度高达1.2 mol/L.在环己酮、乙酸乙酯反应体系中有三个反应,其中第三个反应是过氧化氢脲通过固定化脂肪酶的作用与中间产物乙酸反应,乙酸原位生成过氧乙酸.建立了二次多项式模型,其R²值为0.998 8,可以准确地预测ε-己内酯产率.该模型考虑了环己酮的初始浓度、环己酮与过氧化氢脲的物质的量比和反应温度对ε-己内酯产率的影响,环己酮与过氧化氢脲的物质的量比对ε-己内酯的产率有非常显著的影响(p<0.000 6).     

固载脂肪酶催化制备生物柴油

本实验探讨了固载脂肪酶催化蓖麻油和甲醇酯交换反应制备生物柴油，研究了醇油摩尔比、反应时间与温度等因素对酯化反应的影响.通过固载脂肪酶，很大程度上增强了其稳定性和抗酸碱性，提高了酶的重复使用率，节约成本.结果表明：固载脂肪酶催化酯交换反应最佳反应条件为醇油物质的量比为6∶1，固载酶2%（油重），反应时间为2 h，反应温度为50℃，蓖麻油的转化率最高为92.44%.     

激光打印废纸脂肪酶脱墨的工艺条件

研究脂肪酶对激光打印废纸的脱墨作用,优化脂肪酶脱墨的工艺条件,并与中性脱墨与碱法脱墨进行比较.结果表明,激光打印废纸的脂肪酶脱墨优于中性脱墨与碱法脱墨.脂肪酶脱墨的最佳工艺条件是:碎浆浓度10%～12%,碎浆温度55,℃,碎浆时间40,min,酶用量0.03%,浮选时间8,min.在适宜的脱墨条件下可使脱墨浆ISO白度达到93.42%,残余油墨面积为0.01%.     

中华乌塘鳢成鱼消化酶活性的研究

对中华乌塘鳢(Bostrichthys sinensis)食道、胃、肝脏和肠道内的15种消化酶进行分布和活性测定.结果表明:胃蛋白酶和淀粉酶的最适pH分别为2.0和6.5~7.5,肠蛋白酶和淀粉酶的最适pH分别为10.5和6.5,肠胰蛋白酶、糜蛋白酶的最适pH分别为8.5和8.0.胃的酸性蛋白酶活性显著高于食道、肠道和肝脏(p<0.05),胃的氨基肽酶和碱性磷酸酶活性分别与肠Ⅰ和肠Ⅱ的无显著差异(p>0.05).肠Ⅰ的胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧肽酶A、脂肪酶、麦芽糖酶、蔗糖酶、海藻糖酶和纤维二糖酶等8种消化酶活性均显著高于肠Ⅱ和肠Ⅲ(p<0.05),肠Ⅱ的氨基肽酶、γ-谷氨酰转肽酶和碱性磷酸酶等3种消化酶活性均显著高于肠Ⅰ和肠Ⅲ(p<0.05),三段肠的淀粉酶活性无显著差异(p>0.05).     

异常毕赤酵母产生耐温酸性脂肪酶的研究

采用 Rhodamine B指示剂染料法和三丁酸甘油酯琼脂平板透明圈法 ,从 2 3 7份土壤样品中分离得到一株酵母菌 1 0 1 3号 ,能较稳定地产生耐温酸性的脂肪酶 .该菌株经中国科学院微生物研究所鉴定为异常毕赤酵母 ( Pichia anomala) .其产酶培养基组成 ( % ) :豆饼粉 2 .0 ,麦麸 1 .0 ,NH4 NO3 0 .4 ,KH2 PO4 0 .3 ,Mg SO4 · 7H2 O 0 .2 5,豆油 1 .0 .产酶最佳条件 :发酵起始 p H 5.8,温度 2 8℃ ,周期 3 6h.酶最适作用温度4 8℃ ,最适 p H 4 .8.在 p H 4 .8,50℃条件下 4 0 min能保持 60 %以上酶活 .Mg2 + 和 Na+ 对酶有激活作用 ,Zn2 + 、Fe2 + 、 Cu2 + 和 EDTA有抑制作用 .     

双水相体系纯化天冬氨酸酶、纤维素酶和脂肪酶

用聚乙二醇(PEG)/磷酸钾双水相抽提技术分别从天冬氨酸粗酶、商品纤维素酶和脂肪酶中分离纯化出天冬氨酸酶(Aspartase)、纤维素酶(Cellulase)和脂肪酶(Lipase)。研究了PEG分子量及浓度、磷酸钾浓度、蛋白质含量、pH、氯化钠浓度等因素对分配系数,酶活回收率和分离效果等参数的影响,并设计出双水相体系抽提三种酶的相组成系统。     

酶的反胶团提取

:研究了表面活性剂AOT的浓度及相体积比对AOT异辛烷反胶团体系提取脂肪酶的影响;随表面活性剂浓度增加提取率增大;表面活性剂浓度一定时,pH值低提取率高;提取率一定时,pH值低所需表面活性剂浓度也低.相体积比(V油V水)增大,提取率增大.初步探讨了提取机理.     

非水介质中酶促酯化反应机制及醇抑制动力学

以非极性大孔吸附树脂吸附固定化脂肪酶在异辛烷／四氯化碳混合溶剂中选择性催化Ｓ－２（６－甲氧基－２－萘基）丙酸与正辛酯化为反应模型,对非常规溶剂中酶催化反应机制及动力学进行了初步研究。结果表明：在有机溶剂中该脂肪酶催化萘普森与正辛醇的酯化反应同样符合米氏方程,此酯化反应符合双底物乒乓反应机制,但值得提出的是酰基受体的过量存在会对酯化产生竞争性抑制作用。