微生物学抗击耐药性

<正>科学回归自然界,去破译和瓦解病菌逃避抗菌药物的机制。2013年10月20日,周日,美国橄榄球亚特兰大猎鹰队打败了坦帕湾海盗队。那天的比赛在亚特兰大闹市区心脏地带的乔治亚穹顶体育场举行,它不是因为比赛的精彩而被人们记住——两支队伍都在联赛中垫底,而是因为赛后发生的事情上了新闻头条。另一支"参赛队伍"——穿的不是橄榄球队服而是白色危险品防护服,进入了赛场并且对海盗     

细菌耐药性与抗生素增效剂开发

细菌耐药性是导致现代抗生素使用药效下降的最主要原因之一,几乎所有结构类别的抗生素能够诱导不同的细菌产生耐药响应.综述了细菌产生耐药性的主要途径和抗生素增效剂的研究进展.从解除耐药能力和拮抗耐药靶点两方面总结了抗生素增效剂的研发策略.展示抗生素增效剂广阔的应用前景.     

针对细菌耐药性机制的新药研发进展

目前应用于临床的抗生素已超过200种，而且仍以平均每年有10种以上新的抗菌药物问世的速度在增长。目前状况是一方面有越来越多抗菌药物投入临床应用，另一方面则是耐药菌株的不断产生。我国目前使用量、销售量列在前15位的药品中，有10种为抗生素。大城市每年药物总费用中，抗生素占30％～40％。     

猪源沙门氏菌的耐药性检测与分析

采集辽宁省大连市鲜猪肉78份,选择性培养基分离沙门氏菌,划线纯化后,通过invA 序列对菌株进行鉴定,采用纸片琼脂扩散法(K-B法)检测沙门氏菌对12种抗生素的耐药性。结果共得到15株沙门氏菌,检出率为19.23 %。沙门氏菌对各种抗生素的耐药率在0 ％～73.3 %,其中对硫酸庆大霉素的耐药率最高,为73.3 %;对其他抗菌药物的耐药率依次是盐酸诺氟沙星(60 %)、氟苯尼考、盐酸环丙沙星(53.3 %)>阿莫西林(13.3 %)>头孢噻吩、头孢噻肟、氨苄西林(6.7 %)>头孢曲松、头孢他啶、氨曲南、亚胺培南(0 %),共产生10种耐药谱。由此表明,目前大连市开发区的超市和农贸市场受沙门氏菌污染率较高,并且沙门氏菌对各类抗生素表现出了多重耐药谱,应该给予足够的重视。     

肺腺癌A549细胞膜上磷脂翻转酶的存在与顺铂耐药性

为证实肺腺癌细胞膜上是否存在磷脂翻转酶,将含有NBD-PE荧光探剂的脂质体与A549和A549/DDP细胞融合,根据外膜NBD-PE的荧光强度变化来检测细胞膜上磷脂翻转酶的存在及其活性.当含有NBD-PE的A549和A549/DDP细胞在保温0,30,60和90min时,测定外膜NBD-PE的结果表明,A549细胞的NBD-PE荧光强度在上述不同时间保温后分别为0%,1.4%,2.9%和7.8%;而A569/DDP细胞则相应为0%,10.5%,15.5%和18.3%,证实A549肺腺癌细胞膜上存在磷脂翻转酶.而且,具有抗药性的A549/DDP细胞膜上的磷脂翻转酶的活力明显高于药物敏感的A549细胞.用多药耐药逆转剂Verapamil(20μmol/L)在37℃处理A549/DDP细胞60min后测定其结果又表明,NBD-PE在膜外侧的增加较对照降低了25.0%.而用治疗肺腺癌的特异性抗癌药cisplatin(255μmol/L)处理时,NBD-PE在膜外侧的增加降低了31.6%,且随cisplatin的浓度增加进一步降低达79.4%.这与肺腺癌细胞的耐药性可能相关.     

肺腺癌A549细胞膜上磷脂翻转酶的存在与顺铂耐药性

为证实肺腺癌细胞膜上是否存在磷脂翻转酶,将含有NBD－PE荧光探剂的脂质体与A549和A549／DDP细胞融合,根据外膜NBD－PE的荧光强度变化来检测细胞膜上磷脂翻转酶的存在及其活性。当含有NBD－PE的A549和A549／DDP细胞在保温0,30,60和90 min时,测定外膜NBD－PE的结果表明,A549细胞的NBD－PE荧光强度在上述不同时间保温后分别为0％,1．4％,2．9％和7．8％;而A549／DDP细胞则相应为0％,10．5％,15．5％和18．3％,证实A549肺腺癌细胞上存在磷脂翻转酶。而且,具有抗药性的A549／DDP细胞膜上的磷脂酶的活力明显高于药物敏感的A549细胞。用多药耐药逆剂Verapamil(20μmol/L）在37℃处理A549／DDP细胞60min后测定其结果又表明,NBD－PE在膜外侧的增加较对照降低了25．0％,而用治疗肺腺癌的特异性抗癌药cisplatin(25 μmol/L)处理时,NBD－PE在膜外侧的增加降低了31．6％,且随cisplatin的浓度增加进一步降低达79．4％。这与肺腺癌细胞的耐药性可能相关。     

茶多酚对肿瘤细胞多药耐药性逆转作用的研究

用免疫组化法和流式细胞仪对肿瘤细胞系MCF－7和MCF－7／Adr的P－糖蛋白表达水平进行定性定量研究。用噻唑蓝比色法（MTT）研究茶多酚的细胞毒性及其对耐药性的逆转作用,并与Pgp抑制剂－奎尼定进行了比较。免疫组化法检测P－糖蛋白表达水平,MCF－7／Adr呈强阳性,而CF－7呈阴性;流式细胞仪定量检测结果MCF－7／Adr细胞系细胞阳性率为15％,MCF－7细胞系细胞阳性率为1.8%。MCF－7／Adr细胞系存在Pgp的过度表达。噻唑蓝比色法（MTT）检测结果茶多酚、奎尼定的加入对阿霉素对MCF－7的细胞毒性几乎没有影响。而茶多酚、奎尼定的加入明显增加了MCF－U／Adr对阿霉素的敏感性。免疫组化与流式细胞技术结合,可用于肿瘤细胞系P－糖蛋白表达水平的定性定量检测。茶多酚不仅具有一定的抗癌活性,还与奎尼定一样具有多药耐药性逆转作用。     

肿瘤细胞抗药性的分子机理及其应用

关于肿瘤细胞多药抗性机制的研究是肿瘤研究的焦点之一，而糖蛋白P的发现使细胞多药抗性研究取得了重大进展。糖蛋白P是耐药基因mdr的产物，起到药物外排泵的作用，把药物主动排出产生抗药性的肿瘤细胞外，而且糖蛋白P的表面具有组织特异性。在正常组织中，作为一个广谱特异性转运分子参与机体代谢。这些研究无疑会推进癌肿基础研究的进展。     

巾帼不让须眉——解放军总院临床药理研究室主任王睿研究员

细菌耐药是21世纪人类面临最重要的公共卫生问题之一，WHO在每年世界卫生大会及卫生报告中，反复要求各成员国必须重视对细菌耐药的控制，否则细菌耐药将成为威胁国家的公共安全问题。如今世界上许多国家都投入到了细菌耐药性的研究，我国科研走在最前列的是中国人民解放军总医院临床药理研究室主任、研究员，博士生导师、教授，享受国务院特殊津贴专家王睿和她率领的精英科研团队。     

OmpC高表达与大肠埃希氏菌四环素耐药的关系

大肠埃希氏菌(Escherichia coli)外膜蛋白OmpC与细菌耐药关系密切,但有关其高表达与大肠埃希氏菌耐药的关系研究尚不清楚.为深入探讨OmpC的耐药功能,将ompC克隆到pET-28a载体上进行诱导表达,采用MALDI-TOF质谱分析证明,重组OmpC能够在外膜上大量表达.以此高表达菌株进行四环素耐药试验发现,ompC-pET-28a-BL21的最低抑菌浓度(MIC)值是对照菌株pET-28a-BL21的64倍.研究结果从蛋白质水平进一步证明OmpC在大肠埃希氏菌耐药中的重要作用.