家鱼精液超低温冷冻保存研究——Ⅱ.冷冻、解冻方法

本文对草鱼(Cenophoryngodon idellus)、鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)、青鱼(Mylopharyngodon piceus)精液超低温冷冻保存的冷冻、解冻方法进行了研究.实验结果表明,精液与防冻稀释液按1:3的比例稀释,在4℃～8℃条件下平衡10～30min 后,以24℃～32℃/min 的冷冻速度降温至-80℃以下,再转移到液氮(-196℃)中保存,可获得60%～75%的冻精复苏率.冻精用0. 65%的 NaCl 作解冻液,在38℃的水浴中解冻,解冻精子活力高,寿命长.湿解法的冻精授精率达76. 5%～83. 7%,高于干解法.     

异源四倍体鲫鲤Sox4基因部分序列及其5′端调控区启动子片段的克隆与分析

通过PCR技术从异源四倍体鲫鲤基因组DNA中分离到Sox4基因部分基序.序列分析表明,其5′端调控区具有多种启动子所特有的序列元件,如TATA框,CAAT框等,据此推测,它具有启动子活性.采用高保真PCR方法克隆了异源四倍体鱼Sox4基因5′端调控区600bp启动子片段,将其插入启动子缺失的增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-1中,构建重组载体pAtsox4EGFP-1.通过瞬时转染HeLa细胞,在倒置荧光显微镜下可检测到绿色荧光.结果表明,克隆的Atsox4基因5′端调控区具有启动子活性,并成功构建了含四倍体鱼Sox4基因启动子片段的报告基因载体,为以后研究Sox4基因表达调控的分子机制奠定了基础.     

中国大鲵（Andrias davidianus）的胚胎发育

对中国大鲵(Andrias davidianus)胚胎发育过程的外部形态及器官发育特点进行了详细地描述,为中国大鲵胚胎发育制定出完整的分期标准.中国大鲵胚胎发育过程依据形态学和组织学特征可以划分为6个阶段:卵裂阶段、囊胚阶段、原肠胚阶段、神经胚阶段、器官形成阶段、孵化阶段,共20个时期.从整体上来看,中国大鲵的胚胎发育特征与东方蝾螈(Cynops orientalis)、黑斑蛙(R.nigromaculata)大体相似,主要的差异表现在早期卵裂方式以及消化系统的发育方面.形态学及组织学观察表明,中国大鲵卵裂并非盘状卵裂类型.同时,中国大鲵胚胎发育过程中前三次卵裂均为经裂,胚胎消化系统的发生发育迟缓,无平衡器或口吸盘等,这些均为中国大鲵胚胎发育的显著特点.     

不同倍性鲫鲤鱼血液及血细胞的比较

对异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫和二倍体红鲫血液指标(红细胞数、血红蛋白值、红细胞脆性、比容)、细胞大小(红细胞及细胞核、白细胞、血栓细胞的长、短径值)及它们的显微结构进行了比较研究,并观察了四倍体鲫鲤血细胞亚显微结构.结果表明:在不同倍性鱼中,四倍体、三倍体、二倍体红细胞在数目、脆性、比容方面随倍性的降低而依次升高;血红蛋白无显著差异;在细胞大小上,四倍体、三倍体、二倍体的红细胞及细胞核、嗜中性粒细胞、单核细胞表现出4∶3∶2的比例关系;在红细胞的形态方面,异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫、二倍体红鲫存在明显差异.同时发现随着倍性的升高红细胞的短径/长径比值减小.在异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫、二倍体红鲫外周血中,均可观察到红细胞、嗜中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞和血栓细胞,未发现嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞.但三倍体湘云鲫、二倍体红鲫的嗜中性粒细胞仅有Ⅱ,Ⅲ两种类型,未见含深紫红色颗粒的Ⅰ型嗜中性粒细胞.对不同倍性鱼在血液细胞中出现的共同性和差异性进行了讨论分析.     

日本白鲫生长激素-Ⅱ基因编码区cDNA的克隆及序列分析

采用反转录．聚合酶链式反应(RT-PCR)方法，从日本白鲫脑垂体总RNA中扩增出生长激素-Ⅱ(GHⅡ)编码区cDNA，克隆到Pum-T载体上进行序列测定和分析．结果表明，克隆的cDNA的开放阅读框长度为630bp，其中包括22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟肽．与得到的生长激素-Ⅰ(GHⅠ)的碱基序列和推测的氨基酸序列相比，同源性分别达到96．9％和98．5％．白鲫的GHⅠ的碱基序列和推测的氨基酸序列与国外已发表的金鱼GHⅠ比较，同源性分别为98．7％和100％，白鲫和金鱼的GHⅡ碱基序列和推测的氨基酸序列同源性分别为95．7％和95．2％．     

河南黄河标准化堤防建设的必要性分析

本文分析了黄河下游地上悬河引起洪水灾害的严重性、河南黄河防洪存在的主要问题、以及建设黄河标准化堤防的必要性。     

团头鲂催产前后卵巢超微结构研究

运用组织学方法和透射电镜技术，对注射催产激素（ＨＣＧ，ＬＲＨ－Ａ２，ＰＧ）前后团头鲂卵巢细胞构造进行研究，分析得出滤泡层内层颗粒细胞注射激素后超结构变化明显，最主要产生类固醇激素的滤泡细胞。     

大鲵输卵管的基本组织结构及其发育变化

研究了大鲵在性未成熟期、性成熟后的产卵期以及退化期的输卵管的基本组织结构和在不同发育阶段的结构和形态变化。结果表明：1）不同时期的输卵管壁均由黏膜、肌层和浆膜3层构成；其主要区别在于黏膜的固有层是否形成分泌腺；2）产卵期输卵管明显分成伞部、中段和直段，其末端以尖端突入泄殖腔；3）在尖端突的横切面上首次发现有单管腺。