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目的:在大肠杆菌中高产表达人表皮生长因子(hEGF),并探索提高外源基因在pET-3c:BL(DE3)表达系统的表达水平的途径。方法:根据大肠杆菌对密码的偏爱性,合成编码53个氨基酸的hEGF基因,分别以非融合蛋白和融合蛋白两种方式表达。计算机两者mRNA的翻译起始区(translation initiation region,TIR)的结构。结果:融合蛋白表达产量为27%,非融合蛋白的表达用SDS-PAGE检测不到,两者均具有促细胞增殖的活性。融合蛋白mRNA的TIR的△G值较非融合蛋白的高。结论:在pET-3c:BL21(DE3)大肠杆菌表达系统中,以融合蛋白方式表达人表皮生长因子,表达效率高且不影响其活性,此外,mRNA的TIR的结构可能是影响外源基因在本研究的表达系统的表达效率的一个重要因素。 相似文献
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MTT法检测Rh-bFGF提高Balb/c3T3细胞酶活性及促细胞增殖作用 总被引:1,自引:1,他引:0
以Balb/c3T3细胞为靶细胞,采用体外细胞培养方法,观察重组人碱性成纤维细胞生长因子的促分裂和提高酶活性作用。结果发现:重组人碱性成纤维细胞生长因子提高Balb/c3T3细胞酶活性的最佳作用浓度为6.25ng/mL(μg/L),而促分裂增殖的最佳作用浓度为100ng/mL(μg/L)。两者分别与应的对照组比较P<0.01,具有统计学意义。从而证实了重组人碱性成纤维细胞生长因子具有促分裂和增强酶活性的作用。 相似文献
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利用大肠杆菌BL21(DE3)pLysS生产重组牛碱性成纤维细胞生长因子(BbFGF),对此工程菌的发酵条件进行了研究,在前期试验的基础上,重点探索培养基、诱导剂及区葡萄糖添加方式对T7启动子指导下的bFGF合成的影响,根据摇瓶试验和分批发酵试验结果,建立了一套变速加葡萄糖的高密度补料分批发酵工艺,在此工艺下,经11h发酵,可得光密度为30.7、bFGF产量为95mg/L的发酵产物,两步法纯化目的蛋白,得到纯度为95%的重组bFGF,其生物活性和标准品一致。 相似文献
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基因重组碱性成纤维细胞生长因子对大鼠脊髓损伤神经保护作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :探索碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对大鼠脊髓损伤的神经保护作用 方法 :将吸入bFGF的胶原蛋白海绵或空白海绵贴敷于大鼠脊髓损伤处 ,术后 1、2、3周 ,对大鼠机能进行评分 ,并对大脑运动皮质进行电镜观察分析 结果 :术后 1、2、3周 ,bFGF组大鼠运动评分均明显优于对照组 (Ρ <0 .0 5) ,运动皮质电镜结果显示bFGF组线粒体、内质网轻度肿胀 ,神经毡结构正常 ,无明显胶质细胞增生 程度较对照组明显减轻 结论 :bFGF对大鼠脊髓受损神经纤维起源脑区—运动皮质的神经细胞具有明显的保护作用 ,进而使大鼠运动功能受损明显减轻 相似文献
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模糊推理是不确定性推理领域的一种很重要的方法.直觉模糊推理基于Atanassov直觉模糊逻辑,具有灵活性、合理性和可信性的优点,但并没有克服推理结果依赖于蕴涵关系的选取及有时不能满足推理一致性要求的缺点.通过理论推导,提出基于神经网络的直觉模糊推理方法,证明了该方法在正规直觉模糊集上满足推理的一致性.通过算例分析,验证了该方法的合理性. 相似文献
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为了对印刷品颜色进行快速、准确检测,应用近红外光谱技术(NIR)并结合偏最小二乘法(PLS)建立印刷品颜色检测模型.对近红外光谱获取的144个样本光谱曲线,应用主成分分析方法进行降维,维数为5.选取的主成分作为光谱优化特征子集以替代原来复杂的光谱数据.随后,将144个样本数据随机分为定标集和预测集,利用偏最小二乘法在103个定标集样本数据基础上建立印刷品颜色预测模型,应用此模型对41个预测集样本颜色进行预测.研究结果表明:利用PLS模型得到样本的实测值和预测值之间的预测决定系数(R~2)为99.74%,预测平均相对误差为0.636%,表明利用近红外光谱技术检测印刷品颜色是可行的. 相似文献
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货物配装问题是指一批不同类型的货物如何用最少车辆完成配载的问题。大批量货物是指1单货物由多个同体积和质量的单元(件数)组成,总量大于单个车辆装载量。针对大批量货物配装除了货物类型配装,还存在拆单(数量配装)问题。首先,利用线性规划方法分别按货物体积和质量进行车辆规划,根据货物的总容重比确定采用车辆规划类型,然后,以货物的总容重比和车辆容重比制定容重比平衡规则,当1单货物不满足容重比平衡规则时,用后向反馈法进行拆单,即根据后续待装货物容重比,确定当前载入货物的数量。该方法与其他两种方法对比,体积装载率分别提高18.7%和16.09%,质量装载率分别提高0.95%和8.57%,用实际商业物流配送数据试验,体积与质量装载率都达到87%以上。 相似文献