青蒿琥酯对人白血病K562 细胞凋亡抑制蛋白表达的影响

用Western blot 法检测青蒿琥酯对白血病K562 细胞的X 染色体连锁凋亡抑制因子 (X-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP)、存活素(Survivin)、细胞凋亡抑制蛋白1 (cellular IAP1, cIAP-1)和细胞凋亡抑制蛋白2 (cellular IAP2, cIAP-2)表达的影响, 以及对K562 细胞半胱 氨酸天冬氨酸酶3 (caspase-3)和多聚ADP-核糖聚合酶裂解片段(poly ADP-ribose polymerase cleavage, PARP cleavage)的作用. 青蒿琥酯能够下调XIAP, Survivin 和cIAP-2 的表达, 上调 caspase-3 活化亚基(17 kD)和PARP cleavage (85 kD)的表达. 青蒿琥酯通过下调XIAP, Survivin 和cIAP-2 的表达来诱导白血病细胞凋亡, caspase-3 也与诱导白血病细胞凋亡有关.     

小鼠睾丸发育全过程中生精细胞的自发性凋亡

 以17组出生后不同发育阶段的昆明种正常小鼠睾丸组织为材料,采用TDT原位末端标记法在其石蜡组织切片上进行凋亡细胞原位检测,探讨小鼠睾丸发育全过程中生精细胞的自发性凋亡规律.结果发现:小鼠生精细胞从生后开始就存在自发性凋亡现象,生后1~15 d,凋亡精原细胞数目不断增加;至生后第15天时达到峰值,且15 d起个别初级精母细胞也开始出现凋亡;至27 d时,极少数次级精母细胞和精子细胞出现凋亡;至30 d时凋亡细胞基本为精原细胞;而33 d时各类型生精细胞均存在凋亡现象;至36 d时凋亡细胞又重新集中于精原细胞,并延续于此后各期.上述结果表明:小鼠睾丸发育过程中凋亡细胞主要为精原细胞;自发性凋亡活跃期发生于生后1~33 d,与生精细胞的首次发育成熟过程同步.     

四生散对肺癌细胞增殖的抑制作用及毒性研究

主要探讨中药制剂四生散对人肺癌A5 4 9细胞株的增殖抑制作用以及其急性毒性.应用改进的MTT法测定四生散对肺癌细胞增殖的影响;采用琼脂糖凝胶电泳测定四生散对诱导肿瘤细胞凋亡的影响;再用分剂量组灌胃小鼠的方法,鉴定四生散的急性毒性.实验结果表明,四生散对人肺癌A5 4 9细胞株的增殖有较强的抑制作用,并具有明显的量效和时效相关性;经四生散处理后的A5 4 9细胞呈现凋亡特征性电泳条带;在3 2倍于人的剂量时,小鼠饮食和体重均在正常水平,并无异常,证实口服四生散无急性毒性.     

围绝经期综合征舌苔脱落细胞凋亡调控蛋白与肝郁病理的相关性

通过研究围绝经期综合征舌苔脱落细胞调控蛋白与肝郁病理的相关性,为临床诊疗提供实验依据.本研究采用随机数字表法,选取50例健康妇女作为对照组,150例围绝经期综合征患者作为观察组,证素辨证计算肝郁积分,巴氏染色检测舌苔脱落细胞的成熟指数(MI)和成熟价值(MV),流式细胞仪检测舌苔脱落细胞凋亡指数,免疫组化检测舌苔脱落细胞调控蛋白.结果显示,围绝经期综合征肝郁积分明显高于健康妇女:肝郁病理改变,与舌苔脱落细胞MI的中层细胞数量呈正相关,与舌苔脱落细胞MI的表层细胞数量及MV呈负相关:肝郁病理改变,与舌苔脱落细胞凋亡指数、Fas、Bax的阳性率呈正相关,与舌苔脱落细胞中Bcl-2的阳性率呈负相关.提示肝郁病理是围绝经期综合征的核心病机之一,肝郁病理与舌苔脱落细胞的成熟度、凋亡指数及凋亡调控蛋白相关.     

神经发育过程中的分子机制

叙述了脊椎动物神经分化、神经细胞迁移、神经细胞的凋亡过程中的某些分子机制及bHLH转录调控因子、RA、NMDA受体、Copases、bcl- 2家族在神经发育中的作用 .     

EGF-induced programmed cell death of human mammary carcinoma MDA-MB-468 cells is preceded by activation of AP-1

MDA-MB-468 is a human mammary adenocarcinoma cell line that overexpresses the epidermal growth factor (EGF) receptor and undergoes programmed cell death (apoptosis) in response to EGF treatment. Programmed cell death was shown to be greatly enhanced when cells were growth-arrested prior to EGF treatment. Apoptosis was characterized by an initial rounding up and detachment of the cells from their substrate starting about 12 h after EGF treatment, followed by chromatin condensation, nuclear fragmentation and oligonucleosomal fragmentation of the DNA at about 24 to 48 h. Cell death was dependent on de novo protein synthesis. We found a rapid induction of c-fos, c-jun and junB at the mRNA level after about 30 min of EGF treatment and a more delayed upregulation of fosB and fra-1. The junD gene was expressed in the absence of EGF, and it was moderately induced within 30 min of growth factor addition. The increase of the different fos and jun mRNAs were paralleled by an increase of activator protein-1 (AP-1) DNA binding activity. A characterization of the AP-1 complex revealed similar levels of several Fos and Jun proteins. Based on the kinetics of AP-1 accumulation and cell death, it seems likely that AP-1 contributes to the apoptotic cell death of EGF receptor-overexpressing MDA-MB-468 cells. Received 21 July 1997; received after revision 6 November 1997; accepted 6 November 1997     

敏感和抗性的白血病HL60细胞对staurosporine诱导凋亡的不同反应(英)

用对蛋白激酶具有强烈抑制、作用广泛的抑制剂staurosporine（Sta）,研究敏感和抗三尖杉酯碱的人白血病HL60细胞中凋亡和多药抗药性的关系．Sta均能诱导2种细胞发生典型的凋亡,但抗性细胞发生凋亡需更长的时间,凋亡的细胞数减少．Sta增加柔红霉素在抗性细胞内的积聚,说明其能逆转多药抗药性．在抗性细胞凋亡过程中,mdrl基因表达没有变化,c-myc基因表达稍有增加．结果显示：Sta能诱导敏感和抗三尖杉酯碱的HL60细胞发生凋亡,mdrl基因表达与凋亡过程无关．     

野西瓜总皂苷诱导SGC-7901凋亡的初步研究

探讨野西瓜总皂苷诱导人胃癌SGC-7901细胞的凋亡作用.采用MTT法检测野西瓜总皂苷对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;采用荧光倒置显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;采用流式细胞术分析野西瓜总皂苷对SGC-7901细胞凋亡率的影响;采用激光共聚焦显微镜观测细胞内[Ca2+]i的变化.5、25、50、100、200和400 μg/mL的野西瓜总皂苷作用于SGC-7901细胞72 h后,野西瓜总皂苷可抑制SGC-7901细胞的增殖,其IC50为31.542 μg/mL;野西瓜总皂苷作用SGC-7901细胞40 h后,细胞出现早期凋亡细胞的形态;15、30、60 μg/mL的野西瓜总皂苷作用于SGC-7901细胞72 h后,细胞凋亡率分别为58.6%、92.298%、95.898%;15、30、60 μg/mL野西瓜总皂苷作用SGC-7901细胞24 h后,细胞内[Ca2+]i升高,并随野西瓜总皂苷给药剂量的增加而升高.野西瓜总皂苷能够促进SGC-7901细胞的凋亡,其作用机制可能与野西瓜总皂苷升高细胞内[Ca2+]i有关.     

PAMD对缺血性脑损伤Bcl-2和Bax基因表达的作用

探讨蝙蝠葛酚性碱预处理对脑缺血后大脑皮质神经元Bcl-2和Bax基因表达的影响．采用Zea Longa等介绍的线栓阻塞大脑中动脉方法制备大鼠脑缺血模型,并用受试药物术前连续预处理模型大鼠7d．采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法测定假手术组、模型组和蝙蝠葛酚性碱高、中、低剂量、尼莫地平、银杏叶片预处理组大鼠缺血后24h大脑皮质中Bcl-2和Bax的mRNA表达变化．行大脑中动脉闭塞后24h大鼠大脑皮质神经元Bcl-2和Bax的mRNA均被诱导表达,Bcl-2 mRNA表达量下降;而Bax mRNA表达量升高．蝙蝠葛酚性碱预处理7d后,缺血后24h大鼠大脑皮质神经元Bcl-2 mRNA表达水平较模型组明显上调,而Bax mRNA表达于缺血后24h明显下调．蝙蝠葛酚性碱能有效调控缺血脑损伤后大脑皮质神经元Bcl-2和Bax的基因表达水平,从而在缺血性脑损伤中起到神经保护作用．