砷剂化合物作用机制的研究概况（综述）

砷剂对急性早幼粒细胞白血病有良好的疗效,研究发现砷剂的作用机制可能包括：（1）诱导细胞凋亡和部分分化;（2）调控细胞凋亡基因的表达;（3）使线粒体内膜跨膜电位(transmembrane potential,△ψm )下降;（4）阻抑细胞增殖。     

Recombinant soluble TRAIL induces apoptosis of cancer cells

TRAIL is a tumor necrosis factor family member that selectively induces apoptosis of cancer cells but not of normal cells. To develop TRAIL into a potential cancer drug, three different sizes of soluble TRAIL fragments, including sTRAIL(74—281), sTRAIL(95—281) and sTRAIL(101—281), were expressed in E. coli and purified to homogeneity. Apoptosis assays indicated that sTRAIL(95—281) and sTRAIL(101—281), but not sTRAIL(74—281), can potently induce apoptosis of various cancer cell lines in 6 h, suggesting that the N-terminal fragment of aa101 has inhibitory effect on TRAIL-induced apoptosis. Moreover, we found that some cancer cells were resistant to TRAIL and the resistant cells could be converted into sensitive cells by treatment with the protein synthesis inhibitor cycloheximide, suggesting that one or more short-lived proteins are responsible for cells’ resistance to TRAIL.     

Conformational Changes in HL60 Cells during Differentiation and Apoptosis Induced by Genistein

IntroductionGenistein is a naturally occurring phytoestrogenpresent in a variety of plant foods,includingsoybean[1] .It is known to inhibit both tyrosineprotein kinases and DNA topoisomerase II.Akiyama et al.[2 ] described the ability of genisteinto specifically inhibit protein tyrosine kinase( PTKs) ,presumably at the level of the ATPbinding site.PTKs seem to play a key role intumorigenesis and are known to be associated withgrowth control receptors such as epidermal growthfactors[3] ,p…     

溶血磷脂酸受体2调控胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移以及增殖凋亡

为探讨LPA2是否可调节胃癌细胞SGC-7901的侵袭迁移及增殖凋亡,将LPA2 siRNA和pc DNA3.1-LPA2表达载体转染SGC-7901,转染后利用Western blotting检测LPA2、E-cadherin及Vimentin蛋白表达情况,Transwell实验检测细胞侵袭迁移能力,MTS实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测凋亡情况。结果表明LPA2 siRNA对胃癌细胞SGC-7901敲除成功后,细胞内的E-cadherin表达增高,Vimentin表达降低;同时其侵袭、迁移和增殖能力降低,凋亡能力升高。细胞SGC-7901过表达LPA2后,细胞内的E-cadherin表达降低,Vimentin表达增加,其侵袭、迁移和增殖能力升高,凋亡能力降低。可见LPA2可调控胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移以及增殖凋亡,为胃癌的治疗提供新的靶点。     

莪术油对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响

研究莪术油影响人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的机制。采用台盼蓝拒染法检测不同剂量莪术油对胃癌细胞SGC-7901的生长抑制率;光学显微镜观察细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA片段化情况;流式细胞术检测细胞线粒体膜电位的改变、细胞凋亡率以及细胞周期分布。实验结果表明：作用48h时,最佳浓度为110μg／mL,IC50值为104．958μg／mL。DNA电泳可见有梯状条带出现,流式细胞术法显示有凋亡峰出现。莪术油可诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡。     

洋地黄毒苷诱导小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖和凋亡的影响

应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测洋地黄毒苷对NCI-H446细胞增殖的抑制效果;用AO-EB染色、DNA凝胶电泳分析以及AnnexinⅤ检测法检测细胞凋亡;用碘化丙啶(PI)染色测定其周期变化,利用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)和钙离子(Ca2+)的变化.结果显示洋地黄毒苷明显抑制NCI-H446细胞增殖,AO-EB染色、DNA电泳及AnnexinV检测法显示细胞有明显的凋亡现象,PI染色显示处于S期的细胞增多,激光共聚焦显微镜观察表明细胞内活性氧和钙离子浓度均升高.表明洋地黄毒苷能明显抑制NCI-H446细胞增殖,且细胞被阻滞在S期.细胞内活性氧和钙离子浓度的增加可能与其诱导细胞凋亡有关.     

黄酮对力竭运动大鼠心肌抗氧化与细胞凋亡的影响

以健康雄性SD大鼠为研究对象,通过建立灌胃罗汉果叶黄酮(FSGL)的干预力竭性运动大鼠,来探讨不同剂量FSGL对力竭运动大鼠心肌抗氧化酶系及心肌Bcl-2、Bax mRNA表达的影响。结果表明:不同剂量组的大鼠力竭运动后心肌SOD、CAT和GSH-PX活性与力竭运动对照组比较,均呈升高趋势,以中剂量组效果最显著;力竭运动组MDA与中剂量组比较有极显著性差异;与力竭运动组比较,各剂量组Bcl-2基因表达加强,且中剂量组显著高于力竭运动组和低剂量组。力竭运动组Bax基因表达极显著高于安静对照组和中剂量组(P<0.01),同时低剂量和高剂量组Bax的表达显著高于安静对照组(P<0.05)。FSGL各剂量组Bcl-2/Bax比值均升高,以中剂量和高剂量组最显著(P<0.01)。可见,FSGL能有效提高机体的抗氧化能力,明显地抑制因过度训练导致的心肌细胞凋亡程度。     

快速诱导细胞凋亡方法探讨

[目的]利用流式细胞仪检测细胞凋亡在基础研究、疾病诊断及预后预测及评价中具有重要的应用价值.补偿调节所需的单阳染色管的制备,是流式细胞术检测凋亡过程的一个重要步骤.探讨了快速诱导不同细胞系和原代细胞凋亡的方法,优化用于检测细胞凋亡的流式单阳染色管快速制备.[方法](1)分别用100μmol/L H_2O_2、体积分数4%多聚甲醛、75%乙醇和反复冻融的方法处理293T细胞15 min、30 min、1 h, Annexin V-PE/7-AAD双标记流式检测293T细胞凋亡率.(2)体积分数1%乙醇、5%乙醇、10%乙醇和20%乙醇处理293T细胞、RAW264.7细胞、HeLa细胞、T细胞和B细胞1 min,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.[结果](1)293T细胞经100μmol/L H_2O_2、体积分数4%多聚甲醛、75%乙醇和反复冻融法处理后,几乎所有细胞均处于凋亡状态.(2)293T细胞、RAW264.7细胞、T细胞和B细胞用1%乙醇处理1 min, HeLa细胞用20%乙醇处理1 min,可出现较明显的凋亡现象.[结论]细胞凋亡实验时,根据细胞的生长特性,可选择体积分数1%～20%的乙醇诱导1 min,作为制备单阳染色管的最佳方案.     

对凋亡细胞 TUNEL 染色操作中的体会

摘要: 凋亡细胞的 TUNEL 染色已在科学研究中广泛应用。由于 TUNEL 染色的步骤多,操作精细,影响 DNA 断裂的 因素多,实验结果往往不够准确致使实验失败。总结多年实践经验,拟从组织的取材方式、取材大小、固定剂选择、 组织离体后缺血时间、组织在固定剂内的固定时间以及实验操作中的诸多细节等方面进行介绍。     

红曲橙色素对人胃腺癌细胞AGS诱导凋亡的作用

经分离纯化获得红曲霉发酵产品中的一种橙色素,通过HPLC-MS和NMR检测,确认为Monascorubrin,分子组成为C23H26O5.体外实验表明,该色素组分能有效抑制人胃癌细胞AGS的增殖,IC50值为7.98±0.71μmol·L-1.5μmol·L-1药物处理24h,93.70%AGS细胞进入凋亡前期.细胞凋亡程度与药物浓度呈正相关关系.该色素组分对AGS细胞生长抑制效果显著优于紫杉醇(P0.01),且对人正常胃上皮细胞(GES-1)的毒性作用较紫杉醇小(P0.05).