培养条件对发酵乳饮料中酪蛋白颗粒结构和蛋白水解产物的影响

报导了培养条件对发酵乳饮料中酪蛋白颗粒结构和酪蛋白水解程度的影响．结果表明，粒径小的酪蛋白颗粒可在３７℃下而不是在菌种的最适温度下获得．在培养基中添加柠檬酸钠可导致拉径大的酪蛋白颗粒的形成．添加糖则使形成的酪蛋白颗粒的粒径变小．发酵ｓｄ后蛋白质水解物的浓度达到最高值．     

催化共振散射光谱法测定木瓜蛋白酶活力

木瓜蛋白酶催化水解酪蛋白生成小分子氨基酸和肽,剩余底物酪蛋白与三氯乙酸结合形成粒径约为1740nm的缔合物微粒。该微粒在360、400、420、470、520nm处产生5个共振散射峰,其中最强峰位于470nm。在选定条件下,随着木瓜蛋白酶量的增加,体系中剩余酪蛋白浓度降低,470nm处的共振散射光强度,Ⅰ470nm降低。木瓜蛋白酶的酶活力在0．024～4．8 USP／mL范围内与470nm处的共振散射光强度降低值△Ⅰ470nm呈现良好线性关系,检出限为0．0083 USP／mL。该共振散射光谱法用于嫩肉粉中木瓜蛋白酶活力测定,结果满意。     

DEAE-Sepharose CL-6B离子交换色谱分离αs酪蛋白的研究

本文建立了酪蛋白中主要组分αs酪蛋白离子交换色谱分离的方法.结果表明,用Z系列φ1.0×40cm色谱柱,DEAE-Sepharose CL-6B为离子交换介质,以含3mol/L尿素,0.1%β-巯基乙醇,pH值为8.0的50mmol/L的tris-HCl缓冲液为平衡液,用含不同浓度NaCl的平衡液进行洗脱,流速为2mL/min,在280nm紫外检测波长下检测,当NaCl浓度为0.3mol/L时洗脱得到αs-酪蛋白,其纯度可达100%.此方法可高效快速的分离出αs酪蛋白,为酪蛋白组分进一步分离及αs酪蛋白相关的功能性食品的开发奠定了基础.     

干酪素水解产物的膜分离

以干酪素酶解产物为介质对膜分离进行了研究。讨论了碱性和中性条件下膜分离过程中膜两侧浓度、流通量（Ｊ）和总氮截留率（σ）的变化。发现ｐＨ值低法染度高，截留分子量大的膜污染度大。用０．１ｍｏｌ／Ｌ的氢氧化钠和５ｍＬ／Ｌ的８４消毒液浸泡洗涤可使膜的水通量恢复９４％。在干酪素水解的超滤中，阻力主要来自于凝胶层。凝胶层的阻力大１至２个数量级。     

AN-g-casein浓溶液在毛细管流动中的粘弹行为

采用气压式毛细管流变仪，测定了丙烯腈－酷素接枝共聚物（ＡＮ－ｇ－ｃａｓｅｉｎ）浓溶液的流变性能。求得了适合高剪切速率的弹性模量（Ｇ），发现Ｇ随剪切速率的增加而升高，纠正了早原（由于在高剪切速率下仍采用同一个入口校正所造成）的相反结论；定量地求得了表观弹性活化能（Ｅｅ）；在高剪切速率下，可复弹性形变较之表观粘度对于的变化更敏感，是引起孔口膨化的主要原因，采用本文方法，可估算纺丝过程的膨化比，再由此选     

牛酪蛋白cDNA基因克隆的改建

牛酪蛋白全长cDNA克隆pB_aS_1C184经Bgl Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切,回收其中的酪蛋白基因编码片段,与经BamH Ⅰ、SmaⅠ双酶切的植物表达载体pBI121.2分两步连接:第一步载体的BamHⅠ末端与酪蛋白基因的BglⅠ粘性末端连接;第二步用T_4DNA多聚酶补平酪蛋白基因的EcoR Ⅰ末端,再与载体SmaⅠ进行平末端连接而环化,转化JM109菌株,从得到的33个转化子中,通过~(32)P标记的酪蛋白cDNA基因为探针,点杂交筛选到一个阳性克隆。经酶切鉴定,确认酪蛋白cDNA基因编码区已正确插入到pBI121.2中。     

Specific localization of the catalytic subunits of protein kinase CK2 at the centrosomes

The protein kinase CK2 holoenzyme is composed of two regulatory β subunits and two catalytic α or α' subunits. Although experimental evidence for involvement of the enzyme in the regulation of cell proliferation is accumulating, the exact mechanism of its action is still unclear. The subcellular localization of the enzyme may be a key to its function. We have recently shown that the CK2 holoenzyme is tightly associated with the Golgi complex and the endoplasmic reticulum. Centrosomes, which organize spindle formation during the cell cycle and microtubule cytoskeleton formation and, thereby, the location and orientation of different organelles in the cell, are in close vicinity to the Golgi complex. Because several kinases and phosphatases have been described to regulate the functions of the centrosome, we analysed the association of CK2 with these organelles. Using biochemical cell fractionation and coimmunoprecipitation, we never found the holoenzyme but only the catalytic asubunits associated with the centrosome. These data were confirmed by immunoelectron microscopy. Thus, the present data point to a particular role of the catalytic α and α' subunit of protein kinase CK2, which may be different from their roles in the holoenzyme. Received 2 August 2002; received after revision 2 October 2002; accepted 22 October 2002 RID="*" ID="*"Corresponding author.     

固定化胰蛋白酶水解酪蛋白及亲和吸附提取磷肽

磷肽与钙离子结合成可溶性的磷肽钙，是最易为人体吸收的磷钙营养素．又是无毒有效的龋齿防治剂．本文用固定化胰蛋白酶在ｐＨ８．０的硼酸缓冲液中，４０℃条件下水解酪蛋白，经ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳及葡聚糖Ｇ—１５０凝胶层析分析，其最适水解时间为１０ｈ．用硫氨络铁凝胶珠在ｐＨ４．０醋酸缓冲液含０．５ｍｏｌ／ＬＫ２ＳＯ４条件下亲和吸附磷肽，用ｐＨ７．６Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ缓冲液洗脱，磷肽的吸附量为１．７ｍｇ／ｍＬ湿珠．每克磷肽含磷量为５５．５ｍｇ．每克酪蛋白的含磷量为６．９ｍｇ．磷肽的含磷量是酪蛋白的８倍．     

胰蛋白酶水解酪蛋白所得产物抗菌活性的研究

利用胰蛋白酶水解酪蛋白,并对水解产物进行了分离,得到产物1、2、3,比较不同水解度条件下各种产物的抗菌活性;摸索培养基起始pH值、水解产物添加量对抗菌活性的影响.结果表明在37℃、底物浓度为10%时,三种水解产物的抗菌活性均随着水解度的增大而增大,并最终趋于平缓,产物3的抗菌活性最好;培养基起始pH值为8.0时,30 mL培养基中水解产物添加量达到2 mL时,水解产物的抗菌效果有较大提高.