一株产高温纤维素酶真菌的筛选、鉴定及酶学性质研究

从造纸厂污泥中获得一株产高温纤维素酶的真菌XM5,经形态学和ITS序列分析,鉴定其为土曲霉（Aspergillus terreus）. 在稻草液体发酵培养基中,土曲霉XM5所产纤维素酶的合成模式为同步合成型. 酶学性质研究表明,该纤维素酶的最适作用温度是65℃,在80℃下保温2h活力残留40%以上,最适作用pH为4.0,在pH4.0~7.0内较稳定,实验结果表明,该菌株所产纤维素酶具有较好的温度稳定性和pH稳定性.     

米曲霉（Aspergillusoryzae）A－9005酸性蛋白酶的初步研究

米曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ）Ａ－９００５菌株的麸曲培养物，经水浸泡抽提其酸性蛋白酶活力为６０００ｕ／ｇ左右。硫酸铵分段沉淀中，饱和度为７０％，８０％和９０％时沉淀的比活最高，得率在７０％以上，该酸性蛋白酶的最适作用温度为５０℃，最适ｐＨ为３．５～４．７．在ｐＨ３．５～５．５时酶活力稳定，ｐＨ超过６时酶活力迅速丧失。在４０～６０℃下该酶的活力相对稳定，在７０℃下酶活力半衰期仍达７４ｍｉｎ，这一结果表明该酶为一耐热性酶种。Ｍｎ~（２＋）对酶有激活作用，其它多数金属离子如Ｚｎ~（２＋），Ｆｅ~（２＋），Ｋ~＋，Ｍｇ~（２＋），Ｌｉ~＋及Ｃａ~（２＋）等对酶有轻度抑制作用或无影响。     

曲霉属糖化酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

从黑曲霉、无花果曲霉、米曲霉中提取总RNA,RT-PCR分别获得其糖化酶基因,所得序列在Gen-Bank数据库中注册,注册号分别为AY652617、AY642120和DQ211971.BLAST分析显示,克隆的曲霉属糖化酶基因与GenBank数据库相应序列同源性很高.将这些糖化酶基因与表达载体pPIC9重组后,电转化进毕赤酵母株GS115,均获得了分泌表达糖化酶的酵母工程菌株.甲醇诱导72 h后,糖化酶的分泌量达到最高,分别为(11.6±0.2)、(12.4±0.2)和(10.0±0.2)U/mL.SDS-PAGE显示,分泌表达的糖化酶分子量均约为80 kDa.     

染料脱色菌无花果曲霉的微波诱变育种

采用微波对染料脱色菌无花果曲霉(Aspergillus ficuum)进行不同时间诱变处理,确定了微波诱变的最佳诱变时间,比较了出发菌株与突变株的菌落形态及孢子形态的差异,研究了培养时间、温度、转速、pH对染料脱色的影响。结果表明:用功率为800 W的微波火力对无花果曲霉(Aspergillus ficuum)进行处理30 s,获得的突变株P30具有最佳脱色效果,突变株的菌落比原菌落直径大,分布不规则,菌落相对较少,其孢子颜色变深。突变株对染料脱色的最佳pH为6.0,最佳温度为33℃,转速为120 r/m in,时间为72 h。P30突变株对活性艳蓝KN-R的脱色率比出发菌株提高了11%。     

红曲霉产HMG-CoA还原酶抑制剂的研究

采用薄层层析-紫外吸收光谱法对一株红曲霉产生的HMG-CoA还原酶抑制剂进行分析测定,并对其发酵条件进行研究.结果表明:该菌能产生洛伐他汀或其类似物.产物合成的适宜条件为:采用固体发酵培养基b,接种量5%~10%,变温培养.在这些条件下,固体发酵10 d,该菌株产生的酶抑制剂可达0.19%以上.     

Secretive expression of Aspergillus fumigatus phytase in tobacco improves phosphorus nutrition in plant

To generate transgenic plants capable of utilizing exogenous phytate,an Aspersgillus fumigatus phytase gene(fphyA) was constitutively expressed in tobacco and recombinant enzyme was secreted from plant roots into the rhizosphere using the signal sequence from tobacco calretieulin.After 40 days of plant growth in hydroponic media,phytase activities in leaves,stems,roots and growth media of transgenic plants were 8.6-fold,7.4-fold,12.6-fold and 14.3-fold higher than those of wild-type plants.Signifi-cant improvements in plant growth and phosphoms(P)utilization were observed in the transgenic plants.When phytate was supplied as the sole P source.45-day-old transgenic tobaccos accumulated 1.0-fold and 0.5-fold more shoot and root biomass than wild-type tobaccos.with a concomitant of 1.7-fold increase in total P concentration.These results indicate that secretive expression of the A.fumigatus phytase improves acquisition and use of P from phytate in plants.     

两种生态型羊草叶片蛋白质的SDS-PAGE比较分析

SDS-PAGE电泳可区分不同相对分子质量的蛋白质,该法现已广泛应用于各种生物的蛋白质相对分子质量检测及不同生物种类蛋白质的比较研究.利用SDS-PAGE电泳比较分析了黄绿型和灰绿型两种生态型羊草在蛋白质水平上不同的分子质量的差异.对两种生态型羊草野外采集与移栽叶片的SDS-PAGE电泳图分析后,每个样品分别获得20～30条蛋白质条带,其中两个时期不同生态型之间稳定存在的差异条带有3条,并且可以大致确定其相对分子质量,初步推测其中可能有导致叶色差异的蛋白质.     

烟束曲霉HLS-6的筛选及其对Cr(VI)的吸附特性

采用富集培养方法从某下水道污泥中筛选到一株对重金属Cr(VI)吸附效率高的菌株———烟束曲霉HLS-6,考察了pH值、温度和Cr(VI)初始质量浓度对HLS-6吸附Cr(VI)的影响.结果表明,在pH为1~2、温度为25~30℃时,吸附率高达96.7%;Cr(VI)初始质量浓度增加,吸附容量增大,但吸附率减小:当Cr(VI)初始质量浓度分别为9.42和91.7mg/L时,HLS-6在48 h内对Cr(VI)的吸附率分别为100%和50.8%,吸附容量分别为4.9和23.3mg/g;吸附菌在菌龄为3~5 d时对Cr(VI)的吸附率最大.