Icariin suppresses bone resorption activity of rabbit osteoclasts in vitro

The effect of icariin on the bone resorption activity of rabbit osteoclasts is assessed in vitro. Osteoclasts were isolated from Japanese white rabbits and cultured on plates with a sterilized bone slice in each well. After treatment with icariin at various concentrations, the bone resorption activity of osteoclasts was evaluated by examining pit areas, superoxide anion (·O2-) generation, size and number of actin rings and intracellular calcium concentration [Ca2 ]i. As revealed by these data, icariin elicited continuous decline of [Ca2 ]i, making actin ring constricted and ·O2- generation decreased. These events resulted in smaller and fewer pits which indicate suppressed bone resorption activity of rabbit osteoclasts by icariin.     

淫羊藿苷与脱水淫羊藿素的体外抗氧化研究

为研究淫羊藿苷和脱水淫羊藿素的体外抗氧化活性,分别测定了两者对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)、超氧阴离子自由基(O2.)、羟自由基(OH.)的清除能力、对脂质过氧化的抑制能力、还原力以及总抗氧化能力.实验结果表明,淫羊藿苷具有很强的清除DPPH.、超氧阴离子自由基,还原力和总抗氧化的能力,有较强的清除OH.的能力,且均呈剂量依赖性.脱水淫羊藿素对DPPH.的清除能力很强,对OH.、超氧阴离子和脂质过氧化有较强的清除和抑制作用,表明淫羊藿苷和脱水淫羊藿素具有明显的抗氧化活性.     

高效液相色谱法同时测定安神补脑液中淫羊藿苷和二苯乙烯苷的含量

建立了同时测定安神补脑液中淫羊藿苷和二苯乙烯苷含量的方法。采用高效液相色谱法(HPLC),迪马DiamonsilTMC18色谱柱(4.5 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长为350 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃。淫羊藿苷质量浓度为1.07~9.63μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 5);平均加样回收率为102.2%,RSD为2.7%。二苯乙烯苷质量浓度为10~90μg/mL时与峰面积线性关系良好(r=0.999 8);平均加样回收率为99.72%,RSD为2.3%。该方法精密度高,重复性好,可用于安神补脑液的质量控制。     

箭叶淫羊藿黄酮类化学成分研究

研究箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum.)的化学成分,为阐明其有效成分提供依据.利用硅胶柱色谱、高效液相色谱分离和纯化,通过理化方法及波谱数据分析鉴定其结构.从正丁醇部分得到9个化合物,经波谱鉴定为:淫羊藿苷(Ⅰ)、箭藿苷B(Ⅱ)、2″-O-rhamnosylicariside II(Ⅲ)、淫羊藿苷A(Ⅳ)、箭藿苷A(Ⅴ)、茂藿苷B(Ⅵ)、朝藿定A(Ⅶ)、朝藿定B(Ⅷ)、朝藿定C(Ⅸ).化合物Ⅵ为首次从该植物分离得到.     

淫羊藿总黄酮提取工艺对总黄酮和淫羊藿苷含量的影响

目的:研究不同提取方法对淫羊藿总黄酮和淫羊藿苷含量的影响.方法:以紫外分光光度法测定淫羊藿总黄酮的含量,HPLC法测淫羊藿苷的含量,通过对提取分离过程中淫羊藿总黄酮和淫羊藿苷的含量的检测,来确定提取工艺.结果:淫羊藿总黄酮的最佳提取工艺为20倍量(V/W),70%乙醇提取3次,每次0.5 h.聚酰胺对淫羊藿总黄酮的富集能力明显优于大孔树脂DHP-100,DHP-600和D101.结论:聚酰胺分离纯化工艺具有转移率高,成本低的优点,适宜用于产业化生产.     

超声提取对淫羊藿叶作用效果的研究

研究了超声提取法和浸泡提取法在提取淫羊藿苷后叶细胞结构的细微变化和紫外检测图谱，对两种提取法进行了比较分析。结果表明，超声在提取过程中可损伤叶细胞，促进细胞中化学成分向溶剂中溶解，加速化学成分的提取且不改变其结构，提取速度快，提出率高，这为超声提取的机理研究提供了实验依据。     

A new bone repair scaffold combined with chitosan/ hydroxyapatite and sustained releasing icariin

Icariin, a plant-derived flavonol glycoside, has been proved as an osteoinductive agent for bone tissue engineering. A new bone repair scaffold was generated by thorough mixing of icariin and chitosan/ hydroxyapatite （icariin-CS/HA） using freeze-drying technigue. Characteristics of morphology, mechanical properties, biocompatibility, drug release behavior and bone repair abilities in vivo were evaluated. The results show that drug loading process of icariin did not affect physical structure of CS/HA composite significantly but decreased mechanical properies of CS/HA composite, which happened with a high dosage; icariin-CS/HA had favorable cell compatibility and promoted osteogenic differentiation of hBMSCs; the controlled release of icariin was satisfactory and the release retained after 90 d in vitro. In addition, icariin-CS/HA scaffolds had favorable osteoconduction and osteoinduction in vivo, and could fill bone defect sites and stimulate newborn bone tissues formation at early stage. On the basis of these data, icariin-CS/HA is believed to be an optical bone repair scaffold for tissue engineering.     

淫羊藿甙及其与铁离子配合物的电喷雾质谱研究

本文利用多级串联电喷雾质谱 (ESI-MSn)研究了淫羊藿甙及其与铁离子形成的配合物 ,得到了淫羊藿甙的质谱碎裂规律 ;并对淫羊藿甙与铁离子形成的配合物结构进行了初步确定。结果表明 :淫羊藿甙与铁离子可形成比较稳定的 2 :1的配合物     

淫羊藿苷与过氧化氢酶相互作用的荧光光谱法和分子对接研究

利用过氧化氢酶的内源荧光,通过荧光光谱法对淫羊藿苷与过氧化氢酶的相互作用进行了研究.结果表明,淫羊藿苷主要以静电作用力与过氧化氢酶发生相互作用,16℃时结合常数和结合位点数分别为4.59×104 L/mol和1.00.根据F（o）rster非辐射能量转移理论,计算二者相互作用的结合距离为4.05 nm.对二者之间的相互作用进行了分子模拟,表明淫羊藿苷在过氧化氢酶4个亚基的中心区域通过静电作用力、疏水作用力和氢键作用力与过氧化氢酶发生相互作用,与荧光光谱法的研究结果相一致.     

淫羊藿甙对高浓度葡萄糖抑制MC3T3-E1细胞成骨分化的保护作用*

为了探讨淫羊藿甙对高浓度葡萄糖抑制MC3T3-E1细胞成骨分化是否具有保护左右,采用含10 mmol/Lβ-磷酸甘油、50 mg/L维生素C以及10~(-8)mol/L地塞米松的α-MEM培养基诱导MC3T3-E1细胞成骨分化。根据培养基葡糖糖含量不同分别设置对照组(5. 5 mol/L葡萄糖)、高糖组(22 mol/L葡萄糖)和药物干预组(22 mol/L葡萄糖)。药物干预组各组细胞换液时分别加入0. 1μmol/L、1. 0μmol/L和10μmol/L的淫羊藿甙。通过茜素红染色、钙含量检测方法检测诱导培养25 d后细胞外钙含量,使用Real time PCR检测诱导培养7 d后成骨标志分子表达,观察各组MC3T3-E1细胞的成骨分化情况。使用活性氧检测试剂盒检测诱导培养7 d后的各组MC3T3-E1细胞内自由氧(reactive oxygen species,ROS)生成水平。结果表明:22mmol/L葡萄糖组细胞钙含量最低,成骨标志分子ALP、Osteorix及Runx2表达降低,细胞内自由氧生成水平升高,MC3T3-E1细胞成骨分化受到抑制。使用不同浓度淫羊藿甙干预后,细胞钙含量升高,成骨标志分子ALP、Osteorix及Runx2表达升高,细胞内自由氧生成水平降低,MC3T3-E1细胞成骨分化抑制作用呈现浓度依赖性的减弱。可见淫羊藿甙能够通过降低细胞内自由氧水平,减弱高浓度葡萄糖对成骨细胞分化的抑制作用。