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用酵母双杂交系统探索P ICK 1分子中BAR结构域与PDZ结构域的相互作用.分别构建了pGAD-PDZ和pGBK-BAR重组子,共转入酵母细胞后,涂布于SD(L eu-,T rp-,H is-)固体平板培养基,经滤纸复印和显色反应,在8 h内观察到只有pGAD-PDZ/pGBK-BAR的表达产物呈阳性,而其它对照pGADT 7/pGBKT 7、pGAD-PDZ/pGBKT 7和pGADT 7/pGBK-BAR均呈阴性反应,说明BAR与PDZ结构域具有相互作用. 相似文献
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以中华根瘤菌(Sinorhizobium morelense)SS—ori总DNA为模板,用PCR法扩增D-海因酶基因,分别克隆到5种不同的载体,并转入5种不同的Escherichia coli菌株,获得25株工程菌,进行培养与诱导表达.细胞经超声处理后,通过SDS—PAGE和酶活性两种指标比较表达产物.结果表明,除3株工程菌具有D-海因酶活性外,其它均为无酶活性的不溶性包涵体,包涵体经变性、复性后,可部分获得有活性的D-海因酶,其比活为0.90U/mg,复性率约为20%.此外,对包涵体产生的原因及可能解决办法也进行了讨论. 相似文献
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以山东经济学院的学科发展为目标,提出了图书馆必须强化服务意识,深化服务内容,提高服务水平,建立丰富可利用的资源保障体系,在搞好本院教学科研服务的同时拓展社会化的信息服务的建议。 相似文献
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从自然发酵的大豆中分离一株产蛋白酶活性较高的菌株BN-2,经16SrRNA基因序列分析初步确定该菌株为Bacillus subtilis subsp.natto BEST195。将该菌株中碱性蛋白酶(Alkaline protease,AP)基因,插入pBE2R中构建成重组表达载体pBE2R-AP,并转染枯草芽孢杆菌WB600进行分泌性表达。以糊精、可溶性淀粉作为碳源,每毫升发酵液中重组蛋白酶比出发菌株中蛋白酶酶活高1.2倍。该酶的最适作用pH为8.0,在pH 8.0缓冲液中保存24h,残余酶活力为94%;酶的最适作用温度为50℃,但在50℃中处理30min时残余酶活性降至51%;Ca2+、Mn2+能有效激活酶活力;洗涤剂组分中1%的TritonX-100、Tween20、Tween80对该酶活性的抑制作用相对较小。 相似文献
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无线电能传输技术综述
3 总被引:7,自引:0,他引:7
叙述了无线电能传输的概念和发展历程,着重对电磁感应式、电磁共振式和电磁辐射式三种无线电能传输进行了详细分析;电磁感应式传输距离近、效率低且需要补偿;电磁共振式是对感应式的突破,可以在几米的范围内传输中等,其研究前景较好;电磁辐射式传输距离远,功率较大,但传输较远距离时需要高效整流天线和高方向性天线,其研制难度较大。 相似文献
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一株假单胞杆菌(Pseudomonas sp.)中D—海因酶的分离纯化 总被引:6,自引:3,他引:3
菌体经超声波处理后,上清液首先用热变性作为纯化的第一步,后经硫酸铵沉淀和Q-Sepharose fast flow阴离子交换柱,Phenyl-Sepharose fast flow疏水层析,Superose12凝胶排阻层析等步骤,从Pseudomonas2262菌体中获得电泳纯的海因酶,酶活力回收15.6%,比活为18.37U/mg,提纯倍数为59.3。 相似文献
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将含麦芽糖结合蛋白-嗜热菌DNA聚合酶内蛋白子基因的pMI84、pMI94、pMI95三个重组突变体质粒转入E.coli2426经发酵及IPTG低温诱导表达,直链淀粉糖亲和纯化获得MI84(ser1/Ser538Stop)、MI94(Ser1→CysH1/Ser538Stop)、MI95(Ser1→Ala1/Ser538Stop)三种蛋白质前体。研究了PH温度、巯基试剂对内蛋白子N末端的剪切影响。 相似文献
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Periaxin属于有髓施旺细胞非致密髓鞘中的重要蛋白之一,该蛋白的突变,会引起腓骨肌萎缩症4F亚型发生.文章以小鼠periaxin基因为模板,PCR扩增编码Periaxin-PDZ及其延长型的基因序列,插入pETM-3C表达载体中.转入E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达重组蛋白.再经Ni2+-NTA亲和柱及Sephacryl S-200凝胶层析获得电泳纯的Periaxin-PDZ蛋白.荧光光谱法分析Periaxin-PDZ和脂膜的结合能力,结果显示Periaxin-PDZ(18-102aa)与脂质体的解离常数为Kd=4.415 μg/mL,延长型Periaxin-PDZ(18-129aa)与脂质体的解离常数为Kd=7.265 μg/mL,Periaxin-PDZ(18-102aa)与脂膜的结合能力略高于延长型Periaxin-PDZ(18-129aa). 相似文献
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0 引言 人们普遍认为学习和记忆包含了突触效能的长时程变化,这种效能变化体现在长时程增强(LTP)和长时程抑制(LTD)两种现象[1]. 相似文献
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以重组质粒pEI为模板,PCR扩增环亚酰胺酶基因序列,插入pMAL-s表达载体中.重组质粒转入E.Coli BL21(DE3)后,经IPTG诱导可溶性表达融合蛋白MBP-CIH,利用Amylose亲和柱一步纯化获得MBP-CIH,再经人鼻病毒3C蛋白酶切除亲和臂MBP,硫酸铵沉淀、Phenyl-Sepharose疏水层析获得电泳纯的CIH,纯化倍数为12.7,活力回收29%,比活为36.3 U/mg.重组环亚酰胺水解酶的最适pH为8.0~9.0,最适温度50 ℃,在温度低于55 ℃时酶的性质相对稳定.Ni2 、Co2 能显著提高酶活力,Mn2 、Ca2 和Mg2 对酶活没明显有影响,Cu2 、Zn2 、Cd2 、Fe2 以及金属螯合剂8-羟基喹啉、EDTA则对酶有不同程度的抑制作用.初步说明该酶是一个金属依赖性酶. 相似文献