槲皮素对脂多糖诱导人脑微血管内皮细胞的作用机制

为研究槲皮素对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导人脑微血管内皮细胞(Human brain microvascular endothelial cell,HBMEC)的作用机制,体外培养HBMEC,用LPS诱导HBMEC造模,将细胞分为正常组、模型组、槲皮素组及依达拉奉组,采用噻唑蓝法检测LPS诱导炎症因子变化的时间和槲皮素对HBMEC增殖能力的影响,用实时定量PCR法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α) mRNA、趋化因子C—C基元配体20(chemokine C—C motif ligand 20,CCL20) mRNA和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8) mRNA的表达,用酶联免疫吸附法检测TNF-α,CCL20和IL-8的含量,用蛋白免疫印迹法检测p-NF-ΚB p65,NF-ΚB p65,p-IKKα和IKKα的蛋白表达。结果发现,与正常组比,1 mg·L-1的LPS组细胞活力明显下降(P0.01);模型8 h组TNF-αmRNA,CCL20mRNA,IL-8 mRNA表达显著上升(P0.01);槲皮素各给药组(12.5,25,50,100,200,400μmol·L-1)细胞活力变化不明显。与模型组相比,200μmol·L-1槲皮素组的模型细胞增殖明显(P0.01);槲皮素组和依达拉奉组TNF-αmRNA,CCL20 mRNA,IL-8 mRNA表达和TNF-α,CCL20,IL-8的含量显著下降(P0.05);槲皮素组蛋白数量比n(pNF-ΚBp65)/n(NF-ΚBp65),n (p-IKKα)/n (IKKα)显著减小(P 0. 01),而依达拉奉组n (p-NF-ΚBp65)/n (NF-ΚBp65),n(p-IKKα)/n(IKKα)无明显变化。说明槲皮素具有抑制LPS诱导HBMEC的损伤作用,可能是通过下调IKKα/NF-ΚB p65信号通路减少炎症相关因子TNF-α,CCL20和IL-8的表达。这为槲皮素应用于脑血管病变引起的帕金森病临床防治提供了实验依据。     

肿瘤坏死因子-α与强直性脊柱炎中医辨证分型相关性的研究

探究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与强直性脊柱炎(AS)疾病活动及中医辨证分型的相关性。选取AS患者68例和健康对照30例,根据强直性脊柱炎疾病活动性指数(BASDAI)评分将患者分为活动组和稳定组,按照患者临床症状进行中医辨证分型,分为风湿热痹组、风寒湿痹组及肝肾亏虚组。采用双抗夹心酶联免疫法分别测定各组血清TNF-α水平。结果显示AS患者活动组、稳定组和对照组中TNF-α质量浓度分别为(315.82±36.82)pg/mL、(120.35±20.12)pg/mL、(68.56±16.21)pg/mL,表明AS患者血清TNF-α水平显著高于正常人,且AS活动期TNF-α水平明显高于AS稳定期,其差异均具有统计学意义(p0.05)。在中医辩证分型中,风湿热痹组、风寒热痹组、肝肾亏虚组和对照组中TNF-α质量浓度分别为(338.23±40.20)pg/mL、(305.49±37.56)pg/mL、(125.67±30.62)pg/mL、(68.56±16.21)pg/mL,表明风湿热痹组和风寒湿痹组血清TNF-α水平高于肝肾亏虚组,肝肾亏虚组高于对照组,其差异均有统计学意义(p0.05);而风湿热痹组血清TNF-α水平高于风寒湿痹组,其差异无统计学意义(p0.05)。结果表明,血清TNF-α水平可作为AS疾病活动的判断指标,并可以指导AS中医辨证分型。     

外源钙对盐胁迫下草木樨(Mellilotus officinalis L.)叶片超微结构的影响

以草木樨(Mellilotus officinalis L.)为研究对象,观测了外源钙离子(0、10、20mmol/L CaCl_2)对盐胁迫下(0、50、100、150、200 mmol/L NaCl),草木樨叶片表皮细胞、气孔特性、表皮毛形态结构的影响.结果表明,当Na~+浓度不超过100 mmol/L时,叶表皮细胞、气孔及表皮毛形态结构与对照组相比无明显改变.当Na~+浓度超过150 mmol/L时,表皮毛出现明显损伤,表皮细胞及气孔下腔分泌物明显增多,气孔趋于关闭.外源Ca~(2+)对盐胁迫下草木樨叶片的损伤具有一定的缓解作用,维持细胞正常的形态结构,提高气孔密度和气孔指数,有效地减小盐胁迫的伤害,增强了植物的耐盐性.尤其是10 mmol/L Ca~(2+)的保护作用优于20 mmol/L Ca~(2+),较高浓度的Ca~(2+)也会对植物造成胁迫.因此,采用外源Ca~(2+)增强植物耐盐性时,应根据植物特性,选择适宜浓度,避免造成双重胁迫.     

帕罗西汀对酒精依赖性抑郁及小胶质细胞激活的影响

探究帕罗西汀对酒精依赖性抑郁及小胶质细胞活化的影响。用连续酒精蒸汽处理法建立酒精依赖大鼠模型,10天造模过程中,每天急性酒精蒸汽处理大鼠模型3 h,第11天开始检测各分组行为学变化。实验结束后取血清测皮质酮含量,取脑组织,行免疫组化及蛋白、mRNA表达分析。结果显示:酒精依赖组与对照组和帕罗西汀治疗组相比,大鼠强迫游泳实验中绝望行为时间明显增加[Wistar:(49±8.5)s比(19±3.6)s、(25.3±2.5)s;WKY:(55.3±7.5)s比(27.7±2.5)s、(36±4)s],且具有统计学意义(P0.01);酒精依赖组与对照组及帕罗西汀治疗组比较,糖水偏爱度显著降低[Wistar:(48.9±7)%比(91.7±5)%、(86.5±8.7)%;WKY:(40.2±4.8)%比(80.5±4.9)%、(77.3±4.6)%](P0.01)。酒精组WKY大鼠血清中皮质酮含量与对照组和帕罗西汀治疗组相比显著升高[Wistar:(491.3±34.8)ng/mL比(400.7±31.9)ng/mL、(292±32.7)ng/mL;WKY:(621.7±29.5)ng/mL比(474±24.2)ng/mL、(297.3±37)ng/mL](P0.05或P0.01)。酒精依赖组与对照组和帕罗西汀治疗组相比,WKY大鼠海马区单位面积小胶质细胞数量无明显变化[(16±2)比(17.3±2.5)、(13.3±2.1)],而小胶质细胞活化程度增加,活化标志蛋白Iba-1表达量酒精依赖组与对照组和帕罗西汀治疗组相比有显著性差异[(1.62±0.2)比(0.55±0.05)、(0.99±0.13)](P0.01)。酒精依赖组与对照组和帕罗西汀组相比,WKY大鼠海马区肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)含量明显增高[TNF-α:(2.45±0.42)比(1±0.25)、(1.27±0.13);IL-1β:(2.95±0.43)比(1±0.21)、(1.76±0.13)](P0.01)。WKY大鼠前额皮质TNF-α和IL-1β含量也明显增高[TNF-α:(2.06±0.15)比(1±0.15)、(1.29±0.15);IL-1β:(3.3±0.6)比(1±0.3)、(1.46±0.32)](P0.01)。研究表明帕罗西汀可缓解酒精依赖引起的大鼠行为学改变,可能通过抑制小胶质细胞激活和炎性因子表达完成。     

基于黄芪甲苷治疗CHF大鼠的分子机制的实验研究

以慢性心力衰竭(CHF)大鼠模型为研究对象,应用生物信号检测系统检测黄芪甲苷治疗后大鼠的心功能,TUNEL试剂盒检测心肌细胞的凋亡指数,Western blot检测Bcl-2、Cleaved Caspase3、AMPK、p-AMPK蛋白表达,以此探究黄芪甲苷对心力衰竭的治疗作用和机制.实验结果表明:大鼠血流动力学指标+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)、LVSP及Bcl-2和p-AMPK蛋白表达均显著低于假手术组,LVEDP、TNF-α、MIF、IL-6、细胞凋亡率及Cleaved Caspase3表达显著高于假手术组(P0.05);低剂量黄芪甲苷组、高剂量黄芪甲苷组和地高辛组+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)、LVSP及Bcl-2和p-AMPK蛋白表达显著高于模型组,LVEDP、TNF-α、MIF、IL-6、细胞凋亡率及Cleaved Caspase3表达显著低于模型组(P0.05);高剂量黄芪甲苷组+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)、LVSP及Bcl-2和p-AMPK蛋白表达显著高于低剂量黄芪甲苷组,LVEDP、TNF-α、MIF、IL-6、细胞凋亡率及Cleaved Caspase3表达显著低于低剂量黄芪甲苷组(P0.05).该探索为心力衰竭提供了新的治疗策略.     

血清GPI、CRP在活动期类风湿关节炎中的诊断意义

探讨葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)、C反应蛋白(CRP)在类风湿关节炎(RA)中的临床意义.研究采用酶联免疫方法检测人血清中的GPI浓度,用散射比浊法测血清CRP浓度.结果显示RA患者GPI、CRP水平分别为(2.05±1.85)mg/L、(25.3±8.24)mg/dL,GPI、CRP阳性率分别为64.29%、71.4...     

正交设计优化苜蓿ISSR-PCR反应体系的研究

以苜蓿基因组DNA为模板,利用正交设计,对影响ISSR反应体系的主要因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引物和模板)从4个水平上进行筛选和优化,建立了适合苜蓿的最佳ISSR反应体系:20μL反应体系中加83.4 nkat Taq酶,2.0 mmol/L Mg2+,10×PCR Buffer 2.0μL,0.4 mmol/L dNTP,0.2 mmol/L引物,2.5 ng DNA模板.PCR扩增反应程序为:94℃预变性4 min(94℃变性1 min,45~53℃退火1 min,72℃延伸1 min)40个循环,于72℃延伸7 min,4℃保存.在此反应体系下,可以得到重复性好、稳定且多态性高的条带.     

两种强度健身跑运动改善中年男子血脂代谢的研究

探讨两种强度健身跑运动对中年男性血脂异常患者血脂代谢的影响.方法：将45名中年男性血脂异常患者随机分成乳酸阈强度组（L4组）、阈下强度组（L2组）和对照组（C组）三组.L2组和L4组分别以2mmol/L和4mmol/L乳酸对应强度,进行为期16周健身跑运动,C组不参加任何运动.结果：16周运动干预后,L2组和L4组血脂指标均有改善,而且16周运动后L4组TG、TC/HDL-c、LDL-c/HDL-c和血脂综合指数（LCI=TC.TG.LDL-c/HDL-c）的降低量明显高于L2组（p〈0.05）.同时体脂百分比、体重及体重指数亦明显降低（p〈0.01）.16周前后,C组血脂、身体成分各指标亦无显著性差异（P〉0.05）.运动干预后,体脂百分比的降低与TG、HDL-c与LDL-c/HDL-c密切相关（p〈0.05）.结论：16周健身跑运动对中年血脂异常患者的血脂、身体成分有良好的改善作用,且以4mmol/L乳酸对应强度运动效果最为明显;但对于血脂与体脂百分比改变的相关性有待于进一步的研究.     

过度训练状态下大鼠心肌线粒体内钙和MDA、心肌ACP和β—葡萄糖醛酸酶变化的动态观察

为了研究过度训练状态下心肌组织损伤的变化规律，采用建立一般训练和过度训练大鼠模型，应用形态学手段和分子生化技术，对训练后两组大鼠心肌线粒体内钙含量、脂质过氧化反应产物丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－px）、超氧化物歧化酶（SOD）、心肌组织匀浆内酸性磷酸酶（Acid Phosphatase,ACP)和β葡萄糖醛酸酶(Beta-glucuronidase) 做了定位和定量研究。结果表明，第4周末，一般训练组和过度训练组大鼠心肌线粒体内钙含量、MDA和GSH－px、SOD活性和心肌ACP、β－葡萄糖醛酸酶的活性未见异常改变（Ｐ＞0．05）。但是第8周末，过度训练组心肌线粒体内钙和MDA含量明显升高，GSH含量和SOD活性明显降低；心肌ACP和β葡萄糖醛酸酶明显增加。结果提示过度训练后心肌细胞发生了病理性变化，这些变化可能与线粒体内钙积聚和自由基损伤有关。     

靶向CK1α基因shRNA表达载体的构建及其对A549细胞增殖的影响

通过RNA干扰实验沉默酪蛋白激酶1α(Casein Kinase 1,CK1α)基因,探讨其对肺癌细胞A549生长增殖的影响.首先构建3个针对CK1α基因不同位点的短发夹表达载体pGenesil-CK1α-S1、pGenesil-CK1α-S2、pGen-esil-CK1α-S3和一个无义错配载体pGenesil-NK,分别转染A549细胞,用G418筛选出阳性克隆,得到A549-S1、A549-S2、A549-S3及A549-NK细胞株.再通过RT-PCR和Western blotting方法,分别检测了CK1α基因的mRNA和蛋白的表达情况.比对A549-NK,A549-S1、A549-S2及A549-S3 mRNA水平的抑制率分别为84.3%、57.9%和61.8%(P<0.001);蛋白质水平的抑制率分别为78.4%、51.3%和59.9%(P<0.001).选择干扰效率较好的A549-S1细胞进行后续实验.细胞计数绘制生长曲线、CCK-8法观察细胞增殖状况和流式细胞仪检测细胞所处周期时相来分析转染CK1α基因shRNA表达载体对A549细胞生长增殖的影响.实验结果显示,A549-S1与A549和A549-NK两对照组的平均值比较,细胞计数抑制率为(37.7±2.2)%(P<0.01);CCK-8抑制率为(26.2±1.5)%(P<0.05);S期减少(75.0±4.0)%(P<0.01);G2/M期减少(45.2±5.4)%(P<0.05).因此,转染CK1α基因shRNA表达载体可导致CK1α基因的沉默,明显抑制A549细胞的生长和增殖.     

糖尿病患者C-肽、空腹血糖、糖化血清蛋白和糖化血红蛋白的相关性分析

分析糖尿病患者中C-肽、空腹血糖(FBG)、糖化血清蛋白(GSP)及糖化血红蛋白(HbA1c)水平的相关性.收集糖尿病患者及查体健康人群的血,用化学发光分析法检测C-肽和胰岛素水平,用高效液相层析法检测HbA1c,用生化仪检测FBG和GSP.结果显示糖尿病患者血中C-肽值和胰岛素水平分别为(320.6±103.6)pmol/L、(5.18±1.39)mU/L,分别明显低于健康人群(P0.05);但血中FBG、GSP、HbA1c水平分别为(9.69±2.14)mmol/L、(8.27±1.53)%、(3.75±0.64)mmol/L,分别明显高于健康人群(P0.05).C-肽与FBG呈负相关(r=-0.565,P0.01);HbA1c与GSP呈正相关(r=0.523,P0.01).结果提示联合检测C-肽、FBG、HbA1c及GSP,能更准确反映患者血糖的控制水平,提高糖尿病的诊疗水平.     

D-氨基葡萄糖盐酸盐对小鼠淋巴细胞增殖及相关基因表达的影响

研究D-氨基葡萄糖盐酸盐( GAH)对小鼠淋巴细胞c-fos mRNA,NF-kB mRNA,p38 MAPKmRNA表达的影响,并在分子水平上进一步探讨GAH对小鼠淋巴细胞增殖的作用机制.利用RT-PCR法检测GAH作用后小鼠淋巴细胞c-fos mRNA,NF-kB mRNA,p38 MAPK mRNA表达水平的变化...     

白芍总苷对NAFLD大鼠肝脏NF—kB／p65蛋白表达及羟脯氨酸含量的影响

目的：观察白芍总苷（TGP）对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝NAFLD大鼠肝组织核转录因子-κB（NF-κB）和羟脯氨酸（Hyp）及血清血清谷草转氨酶（AsT）、谷丙转氨酶（ALT）、还原型谷胱甘肽（GSH）和白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF—α）和白介素-6（IL-6）水平的影响．方法：结果：TGP200mg·kg-1组能明显降低NAFLD模型组大鼠血清ALT和AST水平和提高GSH含量（P〈0．01）、能明显抑制肝组织中k的阳性表达及Hyp的生成（P〈0．01）、使血清IL-1B、TNF-a和IL-6水平明显降低（P〈0．01）、使肝脏的病理学改变明显减轻．TGP100mg·kg-1对上述指标无明显改变．结论：TGP能明显改善NAFLD大鼠的肝功能及病理性变化,其机制可能是通过下调NF-κB／p65的表达、降低血清IL-1β、TNF-n和IL-6水平、抑制肝脏Hyp的产生,从而对NAFLD大鼠发挥治疗作用．     

血清β2-MG、Cys-C、Hcy在高血压肾损伤中的联合应用

分析血清β2-微球蛋白（β2-MG）、胱抑素C（Cys-C）及同型半胱氨酸（Hcy）在高血压早期肾损伤中的应用.选择35例24 h尿微量白蛋白30～300 mg的高血压患者为高血压早期肾损伤组（HREI）,另取同期查体的健康人群56例为对照组（Con）.用全自动生化分析仪检测β2-MG、Cys-C、Hcy.结果显示,HREI组血清中Hcy、Cys-C、β2-MG水平分别为（27.34±3.23） μmol/L、（2.92±0.45） mg/L、（4.35±0.65） mg/L,明显高于Con （P＜0.05）.Hcy、Cys-C、β2-MG诊断HREI的敏感率分别为88.57％、94.29％和91.43％,特异性分别为92.86％、98.21％、96.43％,联合使用可提高诊断HREI的敏感性或特异性.研究结果说明血清Hcy、Cys-C、β2-MG的联合检测有助于提高HREI的诊断.     

金属离子副反应系数在配合物稳定常数测定中的直接应用

提出了利用金属离子副反应系数直接用于测定配合物稳定常数的方法.即使用金属离子副反应系数对数值对自由配体浓度负对数作一阶微分图,找出曲线上r(L)=dlgαM(L)/dpL=-i(i为配离子配位数)对应的pL值,这些pL值处有lgαM(L)︱r(l)=i,=lgβi-ipLr(L)=-i-lgφGM,max,后者被用来测定配合物稳定常数.使用了2个配合物体系用于验证,它们相邻2级稳定常数对数值之差最小仅为0.42,计算结果与真值一致.     

镍盐溶液处理ITO表面改善OLED的性能

文章介绍了用一定浓度的醋酸镍来对ITO表面进行前处理.把ITO玻璃浸泡在浓度分别为2.5 g/L,5 g/L,10 g/L的醋酸镍溶液中超声15 min,然后制备双层结构OLED器件.器件的基本结构为ITO/NPB（50 nm）/Alq3/（50 nm）/LiF（0.5 nm）/Al.经过处理的器件,开启电压变低,器件的亮度变化不大,但效率明显提高,尤其是用浓度为5 g/L的醋酸镍溶液超声后制备的器件效率最大,提高了2倍.而且用此方法制备的器件重复性很好.     

ENA抗体与体液免疫检验在SLE诊断中的应用价值

探讨EAN抗体、抗ds—DNA与体液免疫检测在系统性红斑狼疮（SLE）诊断中的应用．选取58例诊断明确的SLE患者为SI,E组,另取健康人群21例为对照组．清晨空腹采静脉血,用免疫斑点法检测EAN抗体及抗ds—DNA,用散射比浊法在IMMAGE特种蛋白分析仪检测IgG、IgA、IgM、C3、C4．结果显示：SLE患者血清中IgG、IgA水平分别为（21．61±3．79）g／L、（2．96±0．52）g／L,明显高于对照组;C3、C4水平分别为（0．66±0．23）g／L（0．16±0．05）g／L,明显低于对照组．SLE患者组中IgG、IgA、C3及C4阳性率分别为67．2％、51．7％、69．0％、65．5％,对照组阳性率低于5．0％．SI。E患者血清中多种自身抗体呈阳性,抗ds—DNA、抗Sm阳性率分别为37．9％、32．8％,但是对照组中未检出抗ds—DNA、抗Sm、抗nRNP、抗SSA、抗SSB、抗ScL-70、抗Jo-1．结果表明：联合检测ENA抗体、抗ds—DNA和体液免疫有助于指导临床疾病诊断及疗效评估．     

已烯雌酚对蝌蚪抗敌敌畏诱导氧化损伤的作用研究

研究已烯雌酚（DES）对中华大蟾蜍（Bufobufo gargarizans）蝌蚪抗敌敌畏（0,0-二甲基-0-（2,2-二氯乙烯基）磷酸酯,DDVP）诱导的氧化损伤的作用．方法：蝌蚪（30～35期）随机分为5组：I（0mg／LDDVP＋0mg／LDES）为空白组;Ⅱ（12．9mg／LDDVP＋0mg／LDES）为单独DDVP处理组;Ⅲ（12．9mg／LDDVP＋1．0mg／LDES）;1V（12．9mg／LDDVP＋2．0mg／LDES）;V（12．9mg／LDDVP＋3．0mg／LDES）为DDVP和DES联合处理组．在染毒24h和72h时测定蝌蚪肝组织中超氧化物歧化酶（SoD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性以及丙二醛（MDA）的含量,计算抗氧化指数．其结果在DDVP（12．9mg／L）存在的条件下,随着DES（1．0mg／L）的加入和浓度的依次加大（2．0mg／L,3．0mg／L）,SOD活性呈下降趋势,72h时具显著性（P〈0．05）;GSH—Px活性呈先升高后降低的变化趋势,在24h和72h均具极显著性（P〉0．01）;MDA含量呈先降低后升高的变化趋势,72h时具显著性（P〈0．05）。其中联合处理组Ⅲ的抗氧化能力最强．结论：DES对DDVP诱导的氧化损伤作用具有拮抗效应,能有效地增强中华大蟾蜍蝌蚪的抗氧化能力．     

维生素D_3对菲律宾蛤仔三种抗氧化酶活性的影响

以维生素D3不同浓度0 IU/L、5000 IU/L、10000 IU/L、15000 IU/L、20000 IU/L浸浴菲律宾蛤仔96h,观测维生素D3对菲律宾蛤仔内脏团过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性的影响.结果表明,经维生素D3浸浴菲律宾蛤仔内脏团中的CAT、SOD活性随时间延长均表现为先升高后降低趋势,比较同一时间段10000 IU/L组CAT、SOD活性均高于其他浓度组（p〈0.05）;而在试验过程中GSH-Px活性随时间延长有一直升高的趋势,但比较同一时间段15000 IU/L组活性均高于其他浓度组（p〈0.05）.本研究表明利用维生素D3微粒悬浮于水层中被蛤仔滤食,可一定程度提高菲律宾蛤仔抗氧化活性,其剂量以10000 IU/L到15000 IU/L范围内效果较好.