不同发酵条件对地热田H-1菌种产碱性蛋白酶活性研究

对一株地热田产碱性蛋白酶菌株H-1的发酵条件进行了单因素试验,研究了不同氮源、pH值、温度对产碱性蛋白酶活性的影响.结果表明：液体发酵菌株H-1产碱性蛋白酶的最适温度为40℃、最适pH值为8.0、最适的无机氮源、有机氮源分别为硫酸铵、豆饼粉.     

高产碱性蛋白酶工程菌的构建及鉴定

利用原生质体融合技术，使碱性蛋白酶生产菌2709与枯草杆菌BD105(含有碱性蛋白酶基因克隆载体pDW2)杂交，得到1株高产碱性蛋白酶的工程菌A16．A16的表型与生长特征与2709相似，相同条件下发酵酶活性比2709菌株高50％，摇瓶发酵的产酶水平最高可达30000u／mL。用菌落的原位杂交鉴定出该菌株携有双亲的遗传物质．     

一株纤维素降解菌的分离、鉴定及降解特性初步研究

从长沙宁乡灰汤温泉附近的水样中分离获得1株具有较强纤维素降解能力的菌株,命名为NX1-1,该菌株最适生长温度为40℃,最适生长pH5.0~8.0.菌株形态学以及ITS rDNA和28S rDNA D1/D2序列分析的鉴定结果表明,该菌株属于Aspergillus fumigatus这个种.对该菌株产酶特性进行了初步研究,最适产酶条件为:氮源(NH4)2SO4,接种量10%,40℃,初始pH6.0,培养60~96 h.     

一株产淀粉酶中度嗜盐菌Nesterenkonia sp.DQ-1的分离鉴定

利用平板筛选法从大庆盐碱地土壤中筛选到一株产淀粉酶并能在广泛NaCl浓度范围(0～25%)和广泛pH值范围(pH值为6～10)生长的耐盐碱菌DQ-1,对其进行形态学、生理生化鉴定和16SrDNA序列分析,DQ-1呈球形,大小约为0.5～0.8μm,最适培养条件为:NaCl 3%,30℃,pH=7.5;同源性比对结果表明,该菌株与多种涅斯捷连科氏菌的16SrDNA序列同源性高达99%。结合生理生化指标,初步确定DQ-1菌株可能是耐盐涅斯捷连科氏菌属的一个亚种。DQ-1产生的淀粉酶最佳反应条件为NaCl 2%、pH值在7～7.5、温度40℃,酶在0～12%的NaCl中具有活性,在pH值为5～12不失活,说明DQ-1产生的淀粉酶是一种能广泛耐盐碱的极端酶。     

花生几丁质酶的纯化及酶学性质研究

本课题利用亲和色谱和凝胶过滤色谱法从花生种子中分离得到了几丁质酶.经SDS-PAGE鉴定,该酶蛋白已达电泳纯,分子量约34.4 kD.在还原和非还原状态下均显示单一区带,表明其为单体蛋白.此外,通过等电聚焦法可测得该酶等电点为5.1.而酶学性质的相关研究则表明：该酶最适pH为5.4,最适反应温度为40～50℃.     

烟草节杆菌02181肌酸酶的纯化及理化特性

采用DEAE-纤维素和羟基磷灰石层析联合使用的纯化程序,从烟草节杆菌02181株提取纯化了肌酸酶.比活性由0.92 U/mg上升至124.44 U/mg,酶被提纯了135.26倍,在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈单一区带,最终收率达52.95%.特性研究显示此酶的相对分子量为84500,等电点为4.80,在磷酸盐缓冲体系中,最适pH为6.50,pH7.00环境下耐受性最好,最适温度为35℃,米氏常数(Km)为46.50 mmol/L,最大反应速度(Vmax)为8.20 μmol/min.Cu2 、SDS可使酶完全失活,Hg2 、Cd2 、Zn2 和Fe3 明显抑制酶活性,Mg2 、Mn2 、Brij 35、Triton X-100和邻菲饶啉对酶活性有一定的抑制作用,EDTA对酶活性无明显影响,而Ca2 和NaN3对酶有一定的激活作用.络合剂邻菲饶啉和EDTA对酶活性的抑制试验表明此酶属于金属酶类.     

海南琼海温泉嗜热菌研究

从海南琼海官塘温泉（70℃～90℃）分离到八株菌,均为革兰氏阳性菌,具芽孢,最高生长温度为90℃。经过生理生化鉴定,初步证实是具有嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillusstearothermphilus）特征的菌株。     

沤麻系统中一株甘露聚糖酶产生菌产酶条件的优化

从实验室温水沤麻液中分离到了一株产甘露聚糖酶(mannanase)的芽孢杆菌HDYM-03菌株,经生理生化试验及16S rDNA序列分析鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis).研究了菌株72 h连续发酵过程中产酶及生长的动态变化,通过单因素及正交实验优化得到其实验室最优产酶条件为:碳源6%魔芋粉,氮源3%蛋白胨,初始pH值8.0,装液量100 mL/250 mL三角瓶,接种量2%,37℃振荡培养48 h.在研究条件下发酵液酶活力为5 122 U/mL,比优化前提高了2.1倍.     

产脂肪酶菌株的分离、鉴定及其产酶条件优化

从长沙岳麓山和湘江等地富含油脂的样品中分离得到一株产脂肪酶菌株CS 1-1,经18S rDNA序列分析,确定该菌株为黑曲霉(Aspergillus,niger).对该菌株的产酶条件进行优化,发现该菌株在以体积分数为1%的橄榄油为诱导物,5 g/L蔗糖为碳源,40 g/L蛋白胨为有机氮源,1 g/L(NH4)2SO4为无机氮源,pH为6.5的培养基中,于28℃,180 r/min摇床培养48 h,可达最大酶产量(37.6±0.8)mmol·min-1·L-1.     

Alcalase蛋白酶水解玉米皮蛋白的研究

以Alcalase碱性蛋白酶对玉米皮进行水解，制取玉米蛋白水解液。结果，该酶水解的最佳工艺条件为：在浓度5%的玉米皮中加2.67%酶制剂，pH7.5,55℃反应1h。该工艺条件下制得的蛋白水解液中，蛋白质溶出率为89.3%.水解度为9.0%。     

浒苔水溶性多糖的酶法脱蛋白工艺研究

选用反应温度、时间、pH、蛋白酶质量分数4个因素进行单因素多水平试验,在此试验的基础上,按L9(34)正交法,设计正交试验.4个因素对酶解法脱蛋白的影响程度为:pH温度酶加入量时间;最佳酶解脱蛋白工艺条件为:酶解温度50℃、时间2.5 h、pH6.5、酶加入量0.200 g(19.671×10-7 mol/s.mg-1).     

海带硫酸化多糖的提取及纯化

对海带硫酸化多糖的水提法与酶解法进行比较,发现酶提法效果较好,粗提得率较水提法提高了85．9％,纯化后得率提高了43．6％．纯化过程中,通过正交实验得出CTAB沉淀LPS的最佳最佳优化条件为1％粗糖液：5％CTAB（V／V）为3：2,沉淀时间6h,离心时间12min．经单因素实验确定了树脂D315的脱色条件为：1％多糖液与树脂的体积质量比为为100：1（V／W）,脱色时间6h,pH值5．0,温度40℃．     

鹅掌楸碱的抗氧化性及稳定性研究

采用DPPH法评价鹅掌楸碱的抗氧化活性及在不同理化条件下的稳定性.方法：采用DPPH作为自由基体系,通过测定加入鹅掌楸碱后对DPPH溶液吸光度值的改变来计算出鹅掌楸碱对DPPH自由基的清除率和IC50值,以此评价鹅掌楸碱的抗氧化活性;另外,测定鹅掌楸碱受到光,热和酸碱介质处理前后鹩掌楸碱吸光度值的改变,以此评价鹅掌楸碱在这些理化条件下的稳定性.实验表明鹅掌揪碱对DPPH自由基的IC50值为0.70mg/mL.其在弱碱性介质中可稳定存在,5小时60℃恒温处理对鹅掌楸碱稳定性无明显影响,然而在酸性介质或者室内自然光照射会引起吸光度值的下降.鹅掌楸碱具有一定的抗氧化活性,在室温,避光和弱碱性介质下可稳定存在.     

海南番木瓜总皂苷的提取工艺研究

研究了海南番木瓜总皂苷的提取工艺.以齐墩果酸为对照品,采用紫外分光光度法在545nm处测定海南番木瓜总皂苷的含量,通过单因素试验和正交试验确定最佳提取工艺.结果表明:用75%的乙醇,pH=7,温度为70℃,提取时间为120min,海南番木瓜总皂苷的提取率最高,为2.66%.     

微波辅助技术优化猪肚菇多糖提取工艺

为提高猪肚菇多糖提取率、缩短提取时间,本文利用微波辅助提取技术提取猪肚菇粗多糖,以多糖得率为指标,确定鲜品干燥预处理温度为50℃,通过单因素实验和正交实验优化提取工艺条件,确定了最优提取工艺条件为：在料液比（g：mL）为1：30,功率为520W的微波下辐射20min,并于80℃水浴下浸提时间2h后获得最大的多糖得率为13.63%.     

碳在Mn-Al-C永磁合金中的行为

用X射线衍射等方法研究了碳在Mn-Al-C合金中的行为.发现碳能提高强磁性相的稳定性、降低共析温度、影响合金相点阵参数和长程有序度,高C(>1%)合金还能析出碳化物相.本文从强磁性相的单轴应变、有序度、弥散碳化物以及晶体不完整性等几方面讨论了碳对磁性的贡献.实验研究了合金的潮解效应,提出了碳化物水解和次级裂纹产生的高碳合金的粉化机理.