重组质粒pEgr-1-TRAIL辐射诱导乳腺癌细胞效应的实验研究

目的将具有辐射诱导表达特性的重组质粒p Egr-1-TRAIL转入乳腺癌MCF-7细胞中,诱导肿瘤杀伤基因TRAIL的表达,实现辐射和基因对MCF-7细胞的双重杀伤效应.方法用ELISA法检测不同剂量X射线诱导TRAIL表达的量效关系及2 Gy X射线照射后不同时间TRAIL的表达;用流式细胞仪检测不同处理组MCF-7细胞早期凋亡情况.结果不同剂量X射线照射转染p Egr-1-TRAIL重组质粒的乳腺癌细胞MCF-7,TRAIL表达量明显高于假照组(P0.001~0.05),其中5 Gy X射线照后表达量最高,TRAIL表达量为假照组的5.1倍.2 Gy X射线照射后4 h,TRAIL表达量明显升高(P0.05),并随时间延长逐渐增加,照射后32 h达峰值,表达量为照射前的4.6倍.MCF-7-p Egr-1-TRAIL/0 Gy组早期凋亡细胞百分数较MCF-7/0 Gy和MCF-7-p3.1Egr/0 Gy组明显增加(P0.01),随着照射剂量的增加,MCF-7-p Egr-1-TRAIL/5 Gy组细胞早期凋亡率与其他处理组比较均存在统计学意义(P0.001~0.05),MCF-7/0 Gy组细胞生长最快,而MCF-7-p Egr-1-TRAIL/8 Gy组细胞生长最慢.结论乳腺癌细胞转染p Egr-1-TRAIL重组表达质粒联合X射线照射能够增加MCF-7细胞凋亡,抑制其生长.     

猕猴A型和B型精原细胞对X射线的敏感性

本实验用100仑X射线对猕猴(M.mulatta)进行全身照射,在照射后不同时期(6 小时到20天)取出睾丸,观察A型和B型精原细胞以及畸变细胞的数量变化。结果表明:(1)猕猴的B型精原细胞的辐射敏感性大于A型精原细胞,但这差别不是十分显著。(2)猕猴精原细胞在100仑X射线照射后数量减少情况来看,可以认为是辐射直接杀死细胞和抑制细胞分裂的综合效应的后果。     

低剂量软X射线对人外周血淋巴细胞DNA合成能力的影响

本试验用人血离体淋巴细胞培养和~3H 同位素示踪技术,探讨了软 X 射线对淋巴细胞 DNA合成能力的影响。试验表明,在22伦至440伦的剂量范围内,软 X 射线照射都可导致淋巴细胞 DNA 合成能力的下降。培养前照射和培养后48小时照射,细胞的 DNA 合成受抑率不一。结果表明,培养前(细胞密度较高)照射,细胞对射线的敏感度要高于培养后照射(~3H-TdR(~3H-胸腺嘧啶核苷)平均相对掺入率分别降为40. 58～70. 04%:82. 73～87. 32%);已启动分裂的、培养48小时后受照射的细胞,比未启动分裂的、培养24小时受照的细胞要敏感一些(~3H-TdR 平均相对掺入率分别为67. 52%:82. 88%)。受软 X 射线照射的淋巴细胞 DNA 合成能力的受抑率与前人用~(60) Co-γ射线和硬 X 射线相比,前者略高于后者,在低剂量范围内,R.B.E.约为1. 1～1. 3。     

X射线对弥猴(Macaca mulatta)精子发生的效应

1.本实验以弥猴(Macaca mudatta)为材料,用200侖X-射线直接照射睾丸后,在照射后第5,10,20,30,40,50和60天取出睾丸观察各类细胞的数量与形态变化。 2.本文证实了弥猴生殖细胞的辐射敏感性与(?)齿动物的实验结论大体相符。精子发生各个阶段的辐射敏感性随着生殖细胞的成熟而逐渐递减。但在200命X-射线照射后第5天时,精细胞及精子的数量亦开始下降,同样表现有相当程度的敏感性。此外,照射后的精细管呈现出紴缩,因而,支持细胞就相应地增多。在生殖细胞数量减少,精细管切面直经缩小以及支持细胞数量增多三者之间有平行的关系,可以作为幅射效应的一个指标。 3.观察照射后不同天数的各类生殖细胞胞的数量变化,可以看到增减的同步现象。这主要是由于幅射对精原细胞的武接致死效应,还是抑制有丝分裂所造成的,由于我们没有深入分析各种类型的精原细胞,也没有研究畸变等出现在有丝分裂那一时期,所似对之还不能作出肯定的结论。同时我们发现精细管的各个部份和精细管腔内各个区域的辐射敏感性和恢复能力存在着导质现象。 4.200侖X-射线直接照射弥猴睾丸后,第40天时细胞总数及精子均降到最低水平,以后,不再减少逐渐呈现恢复趋势。由此我们推论弥猴精子发生的一个周期大约在50天左右。     

_60_Co_射线不同时间辐照蚕豆萌动种子的细胞学研究

本试验采用~(60)CO—γ射线同一剂量(1850伦)和剂量率(90伦/分)昼夜每隔2小时照射萌动的蚕豆种子.以一天为一周期,共观察了两个周期的细胞变异情况.试验结果表明:辐照对根尖细胞有丝分裂有明显的抑制效应,但处于不同时期的细胞对辐射的敏感性有明显的差异,DNA合成期(S期)对辐射较敏感.畸变频率与畸变类型成正相关,但不同时期辐照所产生的畸变类型也有一定的特异性,在早S期照射则染色体畸变较多,占总畸变率的48.4%,在染色体畸变中,又以断片出现较多,占染色体畸变的50%;而在S期后受照则出现核畸变较多,占总畸变率89.2%,在核畸变中,又以微核出现最多,占整个核畸变的82.8%.所以,进行辐射育种工作时,如照射萌动种子,注意从细胞周期的动态上去考虑,选取适当的时期进行照射也是很重要的.     

60Coγ射线照射促进小鼠骨髓脂肪化研究

目的:通过观察60Coγ射线照射对小鼠骨髓脂肪化的影响,建立骨髓脂肪化实验动物模型.方法:将8周龄SPF级雌性Babl/c纯系小鼠随机分为对照组和实验组,实验组小鼠初期即接受6.0 Gy 60Coγ射线全身照射处理,对照组小鼠在初期不进行照射处理.在首次60Coγ射线辐射处理后不同时间点做骨髓切片、观察比较两组小鼠骨髓病理形态的改变,应用PAS-8000病理图象分析系统分别测定各组髓腔内脂肪细胞面积.为了排除生命过程中时间的影响,在实验组小鼠首次照射处理后第48天,对照组和实验组剩余小鼠均同时接受6.0 Gy 60Coγ射线全身辐射,6天后做骨髓切片、并观察检测.结果:6.0 Gy 60Coγ射线照射后第6天可在小鼠骨髓组织中检测到明显脂肪组织,随着时间延长,脂肪组织越来越多,第24天达最高水平,但第48天脂肪组织则显著减少;而对照组骨髓组织从第6天到第48天均脂肪组织少见,6.0 Gy 60Coγ射线全身照射后第6天才检测到明显脂肪组织. 结论:60Coγ射线照射可使小鼠骨髓发生脂肪化.     

生物细胞在极低频电磁场中的效应

探讨极低频电磁场对洋葱根尖细胞及人肺成纤维细胞生物学特性的影响.对生长发育过程中洋葱根和体外培养的人肺成纤维细胞进行50 Hz,3 mT极低频电磁场(ELFMFS)处理,对洋葱根的外部形态及细胞有丝分裂指数、染色体形态等进行观察分析,对人肺成纤维细胞进行增殖量比较及凋亡分析.结果表明:50 Hz,3 mT ELFMFS在20 ℃时对洋葱根的生长量无明显影响,但在30 ℃下对洋葱根的生长起抑制作用且可导致根生长异常;正常培养条件下,ELFMFS照射组人肺成纤维细胞生长受到抑制,有细胞凋亡发生.ELFMFS与温度的叠加效应(50 Hz,3 mT,30 ℃)可对洋葱根的生长及根尖细胞的增殖产生重要作用,ELFMFS对人肺成纤维细胞的生长起抑制作用并可引起细胞凋亡.     

pEgr1-Trail重组质粒联合电离辐射对MCF-7细胞杀伤效应的实验研究

目的研究p Egr1-Trail重组质粒联合电离辐射对MCF-7细胞的杀伤效应,为增强肿瘤放疗效果提供实验证据.方法应用Annexin V-EGFP/PI双染法检测细胞凋亡;应用酶标仪检测细胞增殖;应用流式细胞仪检测细胞周期.结果不同处理组作用MCF-7细胞后24 h、不同剂量X射线照射后24 h后,各处理组MCF-7细胞的生长抑制率呈上升态势,生长抑制由弱到强的顺序为:2.0 Gy,p Egr1-Trail+0.5 Gy,5.0 Gy,p Egr1-Trail+1.0 Gy,p Egr1-Trail+2.0 Gy,Egr1-Trail+5.0 Gy.各处理组联合2.0 Gy X射线照射后6 h,细胞凋亡率开始上升,48 h达高峰,其中p Egr1-Trail+2.0 Gy组与其他各处理组比较差异具有统计学意义,且细胞凋亡最为显著(P0.05).在细胞周期方面,2.0 Gy X射线照后6 h各处理组S期细胞百分数呈现上升趋势,24 h达高峰;照后24 h,G_2+M期细胞百分数开始上升,且各处理组比较差异均具有统计学意义(P0.05);照后48 h,G_2+M期细胞百分数达到最高,依旧是p Egr1-Trail+2.0 Gy组上升最显著.结论 p Egr1-Trail重组质粒联合电离辐射作用于肿瘤细胞表现出协同杀伤效应,促凋亡作用强于单独X射照射组或p Egr1-Trail基因干预组.     

Ca^2＋离子对蒜根生长和细胞分裂的影响

用不同浓度（100－400mg/L)的Ca(NO3)2溶液处理蒜鳞茎,研究对蒜根生长和有丝分裂的影响。结果表明：随着Ca^2 浓度的增大,有丝分裂指数先升后降（200mg/L最大）,随时间延长分裂指数升高,但400mg/L时则相反。核异常细胞比率随浓度增加而增加,随时间延长而减少,核异常的突出表现为染色体解体在各浓度时间内普遍发生。本实验结果显示：Ca^2 对细胞分裂和细胞核的影响与重金属有很大差别。     

~(60)Coγ—射线照射小麦种子对有丝分裂和减数分裂的影响

本文报道了不同剂量(1万仑、1.5万仑、2万仑、2.5万仑和3万仑)~(60)C_oγ—射线照射小麦干种子后,对发茅势、发芽率、初生根长度和根尖分生组织细胞有丝分裂和花粉母细胞减数分裂的影响. 电离辐射损伤引起根尖分生组织细胞有丝分裂的抑制作用随着剂量的增大而增强.并借助细胞学的方法观察了根尖分生组织细胞有丝分裂和花粉母细胞减数分裂中由于电离辐射所引起的染色体畸变,如小核(微核)、断片、桥、落后染色体、不均等分裂、染色质团缩、染色体环等细胞形态学变化.     

X射线一次急性照射与分次累积照射对猕猴精子发生中染色体畸变的影响

本实验以性成熟猕猴(Macaca mulatta)12只,分为对照、一次急性照射和分次累积照射三组,每组4只猴子。经200仑X 射线一次急性和分次累积(每隔24小时照射20仑,10天内累积总剂量为200仑)局部照射猕猴睾丸,以精子发生中精母细胞第一次减数分裂后期和早末期所出现的染色体畸变为指标,此较研究猕猴在总剂量和剂量强度相同的情况下,经一次急性照射和分次累积照射的细胞遗传学效应。对照组的平均染色体畸变率为0.297±0.103%,200仑X 射线一次急性照射组和分次累积照射组的平均染色体畸变率分剐为2.979±0.179%和1.276±0.144%。由此可见,两种不同处理组的染色体畸变率均高于对照组,而一次急性照射组的染色体畸变率又比分次累积照射组增加一倍以上。经统计分析指出:各组染色体畸变率之间差异是显著的,对照～处理P<0.001(对照～一次急性照射P<0.001;对照～分次累积照射P=0.005-0.001),一次急性照射～分次累积照射P=0.005-0.001。实验证明:在总剂量和剂量强度相同时,猕猴睾丸经X 射线一次急性照射所引起的细胞遗传学损伤比分次累积照射更为严重,并表明200仑X 射线分次累积照射诱发染色体畸变的效应并不是按照简单的相加法则而累积的。     

CHO M期同步细胞的研究

引言 1953年,Howard和Pelc以蚕豆根端细胞为材料,用同位素示踪方法摻入~(32)P到蚕豆根细胞DNA中,发现只有在DNA合成时才有~(32)P的掺入,而在DNA合成后到有丝分裂期之间有一间隙(gap)存在,此时~(32)P不能掺入,因此,首先提出细胞周期的概念。1959年Oastler和Sherman利用~3H-Td标记小鼠肠腺窝上皮细胞的有丝分裂象的方法测定细胞周期各时相的时间,为细胞动力学的研究提供了重要手段,他们的实验还确定了在DNA     

x射线照射对绝缘材料聚乙烯介电常数的影响

随着现代工业的发展,X射线无损探伤技术应用越来越广,而其是否真正做到无损有待深刻研究。实验先通过X射线仪对聚乙烯材料进行不同强度和不同时间的照射,并对照射后的试样进行介电常数测试和xrd衍射表征来分析射线对试样的伤害。研究其介电常数的变化对无损探伤技术有着重大指导意义。实验发现X射线照射时间和强度对绝缘材料聚乙烯的介电常数有不同程度影响,但按照合理的照射时间和强度,可将材料性能控制在工业标准之内。     

pEgr-Endostatin重组质粒联合电离辐射抗肿瘤效应的实验研究

目的研究pEgr-Endostatin辐射诱导肿瘤的表达特性及其抗肿瘤作用,为提高临床肿瘤放疗疗效提供实验证据.方法 Western blotting法检测pEgr-Endostatin重组质粒联合电离辐射诱导黑色素瘤B16细胞蛋白表达;建立动物模型,用ELISA法检测不同处理组Endostatin的剂量水平,比较不同处理方式的差异.结果 Western blotting法检测结果显示:重组质粒转染的黑色素瘤B16细胞上清中均有Endostatin蛋白表达,而未转染重组质粒的B16细胞和转染空质粒的B16细胞上清中未见Endostatin蛋白表达.ELISA法检测结果表明:体外接受2~10 Gy X射线照射,Endostatin表达水平明显增加,且照射剂量为4 Gy时Endostatin的表达水平最高.2 Gy照射8~72 h后,Endostatin表达水平与假照射组比较明显增加,在48 h时Endostatin表达水平最高.动物实验表明:荷瘤+25 Gy照射组、荷瘤+pEgr-Endostatin照射组、荷瘤+pc DNA3.1+25 Gy照射组和荷瘤+pEgr-Endostatin+25Gy照射组肿瘤生长率显著低于单纯荷瘤组(P0.05#0.01),荷瘤+pEgr-Endostatin+25 Gy照射组亦明显低于荷瘤+25 Gy照射组和荷瘤+pEgr-Endostatin组(P0.05#0.01).结论 pEgr-Endostatin重组质粒联合电离辐射能使Endostatin蛋白表达增加,从而抑制血管内皮细胞生长、发挥抗肿瘤作用.     

磁场对蚕豆种子根生长和细胞分裂的影响

研究不同磁场强度对蚕豆种子根的生长、细胞分裂和染色体形态的影响。实验结果表明,磁场强度在3000-5000GS范围内,根的生长速率最快,根尖细胞分裂指数最高;磁场强度低于3000GS时,对种子根的生长和细胞分裂指数影响不明显;高于5000GS时,蚕豆根的生长速率和有丝分裂指数降低。不同磁场强度对染色体畸变率没有明显的变化。     

盐和过氧化氢胁迫下交替氧化酶调节根生长和细胞死亡

用不同浓度的NaCl或外源过氧化氢(H_2O_2)溶液处理野生型(WT)拟南芥和交替氧化酶(alternative oxidase,AOX)基因反义抑制突变体(AS-12)拟南芥,发现随NaCl和过氧化氢浓度的增加,两种拟南芥幼根生长速率降低,且出现了明显的细胞死亡。在50和100 mM NaCl或在50 mM H_2O_2处理下,与WT植株相比,AS-12植株幼根的生长速率更低,且组织的细胞死亡程度也更加明显。150 mM NaCl或100及200 mM H_2O_2处理导致AS-12与WT幼根的生长停止和严重的细胞死亡,但两种植株幼根在生长速率和细胞死亡程度上无明显差别。以上实验结果说明交替氧化酶在一定水平的盐胁迫和氧化压力下能够影响幼根的生长和细胞死亡的发生。     

磁场对蚕豆种子根生长和细胞分裂的影响

研究不同磁场强度对蚕豆种子根的生长、细胞分裂和染色体形态的影响.实验结果表明,磁场强度在3000～5000GS范围内,根的生长速率最快,根尖细胞分裂指数最高;磁场强度低于3000GS时,对种子根的生长和细胞分裂指数影响不明显;高于5000GS时,蚕豆根的生长速率和有丝分裂指数降低.不同磁场强度对染色体畸变率没有明显的变化.     

在极低温下照射种子的生物学效应——Ⅱ.对突变频率的影响

极低温下用~(30)CO—γ射线照射冬小麦风干种子,在确认极低温能减轻M_1代生理损伤的基础上,对M_2代的突变频率进行了研究。实验结果表明:极低温同常温比较,在20—30千伦照射量范围内,大部分性状的突变率有所降低。若分别以其LD_(50)(半致死剂量)为基准进行比较,即在辐射损伤相同的情况下,极低温却导致突变率的显著提高。由此推断,在极低温下照射能够有效地保存射线直接作用对遗传物质所诱发的变异。     

小剂量60Coγ线照射诱导体外培养小鼠骨髓细胞凋亡研究

目的：研究小剂量^60Coγ线照射对体外培养小鼠骨髓细胞的影响。方法：以1ng/ml rh GM-CSF和5ng/ml rh IL-3作为造血生长因子，维持骨髓细胞存活，然后用小剂量^60Coγ线照射，动态观察骨髓细胞凋亡情况，同时设立未照射小鼠骨髓细胞作对照。结果：实验观察到照射后6h，透射电镜显示细胞皱缩，细胞膜空泡化，核固缩，呈典型的细胞凋亡特征；DNA裂解百分率照后6h各时点逐渐升高，第20h达高峰，之后逐渐下降，照后6－26h，实验组与对照组DNA裂解率有显著性差异（P＜0．01）；DNA琼脂糖疑胶电泳呈特征性梯状图谱，片段大小为180bp或其倍数。结论：小剂量^60Coγ射线可诱导体外培养骨髓细胞凋亡。     

γ—射线对动物在高架T迷津上的习得行为的影响

本文是研究V一射线对动物在高架T迷津上的习得行为的影响。V一射线有极强的穿透能力。动物受到一定剂量的照射线后,行为受到影响。本实验结果表明:给大白鼠照射400—rad v射线后,动物在高架T迷津上的习得行为有影响,但不明显,而动物的奔跑动机影响强烈;照射后习得行为有一恢复过程,一般3到5天。