病理学监测在实验动物质量评价中的地位

摘要: 目的从病理学角度评价啮齿类实验动物的健康情况,为实验动物质量评价提供依据。方法采集不同等级啮齿类实验动物的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠和小肠,经10% 中性福尔马林固定液固定,通过石蜡切片、HE 染色、PAS 染色、冰冻切片、油红O 染色后于显微镜下观察。结果虽然被检测动物的微生物学、寄生虫学和遗传学等指标都能达到或符合国家质量标准,但是病理学监测中都能观察到不同程度的组织病理学损伤,主要出现在肝脏、肺脏和肾脏,有时也发生在心脏、消化道和淋巴器官等。结论该结果说明,虽然啮齿类实验动物符合国家微生物学等标准,但仍有部分实验动物处于亚健康状态。病理学监测在实验动物质量评价中有着不可替代的重要作用。相关监管部门应该尽快制定实验动物病理学诊断的国家及地方标准,完善实验动物质量监测体系。     

小白鼠组织标本快速脱水、透明、浸蜡法的探索

在病理科研工作中,小白鼠组织石蜡切片的应用十分广泛.为了更好地适应科研工作的需要,笔者对小白鼠组织的快速脱水、透明、浸蜡,作了一些探索.现在加以总结,以与广大病理技术工作者交流. 笔者认为,小白鼠组织与其他动物组织切片的制作过程虽然基本相同,但由于小白鼠的组织较为柔软和细小,含水较多,而纤维组织又较少,所以制片时,必须适当调整制片程序,把握好各个步骤的时间,才能制出较优质的切片.     

2012年秋季北京地区啮齿类实验动物健康状况的病理学调查和分析

随着现代科技的发展,实验动物在多方面起着越来越重要的作用。2012年10月,本实验室参与了北京市实验动物管理办公室组织的北京市啮齿类实验动物健康状况调查。采集心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠进行组织病理学观察,通过石蜡切片HE染色、冰冻切片油红O染色、PAS染色等方法对啮齿类实验动物的健康状况进行鉴定。结果显示,部分动物肝脏表现出不同程度的肝细胞肿胀、轻度肺脏病变,少数表现出肾脏管型、肾小囊腔蛋白样物质渗出和大肠寄生虫感染,但是啮齿类实验动物总体水平属健康状况。以上病变的出现可能与动物的生存环境、饲料营养成分和运输处死过程中的应激有关。     

银屑病样皮损的组织病理研究

用咪喹莫特诱发小鼠出现银屑病样改变,通过优化病理切片技术对皮损进行组织病理学研究.在Balb/c小鼠背部皮肤涂抹咪喹莫特7天,诱发银屑病样皮损,对其进行PASI评分,分析皮损程度;取皮损组织,制作石蜡病理切片,对浸蜡、脱水、染色等步骤进行温度、时长的优化,比较传统切片染色和优化方法对Baker组织病理学评分的影响.模型组小鼠涂抹咪喹莫特7天后出现红斑、鳞屑和皮肤增厚等银屑病样改变;镜下观察组织切片,发现其表皮增厚,角化不全,出现Munro小脓肿,棘层肥大等银屑病样病理变化.经本实验室常规方法处理的切片,组织不完整,结构不易分辨,影响组织病理学评分,从而影响对该动物疾病模型的鉴定;经改进处理后的切片,组织完整,结构清晰,染色均匀,能进行直观观察并准确评分,从而能准确鉴定银屑病疾病模型是否正确建立,为新药的临床前研究奠定基础.本实验成功制备银屑病样动物模型,通过切片和染色方法的改进获得较高质量的皮损组织石蜡切片,提高了疾病动物模型成功建立的鉴定标准,也为进一步的银屑病新药研究奠定了良好的基础.     

2018年5月北京市啮齿类实验动物质量抽查的病理检测

目的 2018年5月本实验室对北京地区22家实验动物机构送检的400只啮齿类实验动物进行病理检测。根据检测结果对实验动物的饲养管理提出合理建议。方法 采取心脏、肝脏、肾脏、肺脏、脾脏、大肠、小肠,制成石蜡切片或冰冻切片,经H.E.染色、PAS染色或油红O染色后置于光学显微镜观察,采集数码图像,记录结果。结果大鼠、小鼠、豚鼠有少数病例表现为肝细胞肿胀,肺脏、心脏局灶性炎性细胞浸润,大肠出现疑似球虫感染的病变;地鼠组织脏器均未见明显异常。结论 本次病理学抽检中的实验动物基本为健康状态,但需要加强和改善饲养管理条件。     

2012年春北京抽检的啮齿类实验动物健康状况的病理学调查和分析

2012年5月本实验室对北京16家实验动物单位的啮齿类实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠进行组织病理学观察,通过石蜡切片HE染色、冰冻切片油红O染色、PAS染色等方法对啮齿类实验动物的健康状况进行鉴定。结果显示,绝大多数啮齿类实验动物为健康状态,部分非健康动物主要有肝脏脂肪变性、轻度肺脏病变、心脏颗粒变性和肾脏蛋白管型。这可能与饲养环境、饲料状况以及采样运输的应激有关,通过加强饲养管理可以使这种情况改善。     

正交试验设计探索小鼠不同组织冰冻切片的优化制备方法

摘要:目的 针对小鼠各种常规组织,优化冰冻切片的实验条件。 方法 选择固定、脱水方法,切片温度及切片厚度,三因素、三水平设计正交实验,经组织处理、包埋、冰冻切片、HE 染色后,按照冰冻切片质量标准评分,经 SPSS21. 0 软件分析,得到小鼠各常规组织冰冻切片制备的优化条件。 结果 不同固定脱水程序的差异有统计学意义,肝脏组织最佳切片条件为固定后脱水,切片厚度控制在 5 μm,-18 ℃ 切片;肌肉、心、脾、脑、肾、主动脉组织最佳切片条件为不固定、不脱水,切片厚度控制在 5 μm,-18 ℃ 切片。 结论 应用正交试验设计和分析,可以高效、快速而经济的获得小鼠各常规组织冰冻切片优化实验条件,减少了实验动物的使用数量及试验次数,提高了实验动物的利用率和实验的准确性。     

一种制作高质量动物组织石蜡切片的方法

石蜡切片是组织学和病理学制片技术中最为常用的方法,广泛应用于临床诊断和科研教学中。石蜡切片制作步骤繁琐,影响因素众多,且不同组织类型具有不同的特点,每个操作环节的失误都将影响切片的最终质量。详细介绍了辽宁师大生科院实验室经过长期实践和改进后的动物组织石蜡切片制作方法。从石蜡的选择与处理、动物组织取材与固定、透明浸蜡与包埋、切片和烤片、HE染色几个方面探讨了石蜡切片制作过程中的经验或改进措施,具有一定的参考价值。     

实验动物病理学检测与实施成果

摘要:实验动物是生物医药发展不可或缺的重要基石与工具,实验动物质量密切关系到科学实验结果的可靠性、准确性及相关产品使用的安全性。 因此,对实验动物质量进行严格的控制势在必行。 病理学是动物疾病诊断的“ 金标准” 。 因此,病理学检查是实验动物质量控制不可或缺的技术手段,通过临床病理学、大体病理学和组织病理学的检查,能够对实验动物的健康状况有一个系统而全面的认识,也为规范实验动物管理和保障实验动物质量提供重要的依据。     

维医证候异常黑胆质动物模型微循环状态的改变

为探讨异常黑胆质证候动物模型微循环状态的改变,选择健康ICR雄性小鼠30只,分为模型组和正常对照组,每组15只。正常对照组和模型组造模后的实验动物眼球放血处死,并迅速取出舌和前右侧趾,一部分采用石蜡切片苏木精-伊红(HE)染色,光学显微镜下进行组织学观察;另一部分采用透射电镜观察细胞超微结构改变。采用对比研究的方法观察和比较两组实验动物微循环状态的改变。结果显示,与正常对照组相比,模型组小鼠舌和甲床组织病理学有明显地改变和细胞器损伤。光镜下观察,模型组蕈壮乳头和上皮下结缔组织内微血管扩张、淤血,血管周围偶见少量炎性细胞;甲床真皮浅层血管与骨髓内血管扩张、充血。电镜下观察,模型组毛细血管管腔狭窄,呈不规则状,管壁粗糙,内皮细胞异染色质增多;甲床毛细血管内皮细胞异染色质明显增多。由此得出结论:异常黑胆质的产生过程中机体有微循环状态的改变。     

2014年春季北京地区啮齿类实验动物健康状况的病理学调查和分析

目的 2014年5月本实验室对北京市14家单位的啮齿类实验动物的健康状况进行病理学调查。方法采集啮齿类实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠后经10%福尔马林固定,通过石蜡切片H.E.染色、冰冻切片油红O染色、PAS染色于显微镜下观察。结果绝大多数实验用鼠为健康状态,仅部分非健康动物出现不同程度的肝细胞肿胀(32.6%)、轻度肺脏病变(24%)、肾脏蛋白样渗出物和管型(13.2%)。本次抽检结果与前两年抽检结果相比较,肝脏脂肪染色阳性率(6.2%)低于2013年春秋季的17.1%和6.25%,以及2012年春秋季的26.7%和14.8%,有降低的趋势。值得引起注意的是,肾脏病变从2010年春季在小鼠(2%)和2011年春季在大鼠(20%)中偶发,发展至今,已经在小鼠(6%)、大鼠(12%)和豚鼠(20%)中普遍存在,从偶发病变发展成为常发病变,应加强防范。结论本次调查结果表明北京地区啮齿类实验动物基本为健康状态,少数动物出现组织病理学变化可能与饲养环境、饲料营养成分以及运输、处死时的应激有关,宜提高饲养管理水平和避免应激来加以改善。     

犬睾丸原发性特有肿瘤的病理学观察与分析

摘要: 目的对三类犬睾丸原发性特有肿瘤进行病理学诊断和分析,探讨犬睾丸原发性肿瘤的病理学特点,为诊断睾丸原发性肿瘤提供资料。方法中国农业大学国家动物海绵状脑病实验室收集来自动物医院的临床犬睾丸肿物病例,从2013 年至2015 年共35 例,制成切片,HE 染色,根据病理学特征进行诊断与鉴别诊断、比较肿瘤细胞形态特征、根据组织学特点鉴别细胞起源,总结三类肿瘤的病理学特点和鉴别诊断要点。结果观察比较犬精原细胞瘤、支持细胞瘤、间质细胞瘤的组织病理学特征,总结犬睾丸肿瘤的临床特征,为今后该类肿瘤的诊断与鉴别诊断提供有效资料。结论精原细胞瘤、支持细胞瘤和间质细胞瘤为睾丸常见的原发性肿瘤,常见于老年犬,恶性睾丸肿瘤的发病率低。由于肿瘤细胞来源不同,呈现出不同的组织病理学特征。     

2011年秋季实验用鼠健康状况的病理学调查和分析

2011年10月本实验室对14家实验动物单位的实验用鼠进行了病理学抽检。主要内容是对实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠进行取材,通过甲醛固定,石蜡切片HE染色、冰冻切片油红O染色、PAS染色等方法对实验用鼠的健康状况进行鉴定。结果显示,绝大多数实验用鼠为健康状态,而非健康动物主要以肝脏脂肪变性和轻度肺脏病变为主。这可能与饲养环境和饲料有关,通过加强饲养管理可以使这种情况得到改善。     

实验动物机构标识系统的比较研究

本文介绍目前实验动物生产、科研工作中使用的实验动物机构标识系统,着重分析了啮齿类动物及灵长类动物各种标识方法的优缺点以及机构设施标识的主要内容,为实际工作中实验动物及机构标识方法的选择提供参考。随着科技的发展,以无线射频技术(RFID)为基础的新型标识技术,必将在实验动物领域中广泛应用;应综合考虑各方面要素对机构标识进行系统性设置。     

我国实验动物科学普及的迫切性和实现路径

实验动物科技发展水平是衡量一个国家或一个科研单位科学研究水平的重要标志，实验动物作为“活的精密仪器”,在国家生物安全及生物医药创新乃至生命科学的发展中发挥了重要的作用。由于多种原因，早些年实验动物科普工作未能得到有效的宣传，但近年来，在“非典”“新冠”等重大传染病防治与疫苗技术攻关过程中，实验动物逐步被更多公众所认识，对实验动物科学的了解达到了一个新高度，实验动物科普工作、实验动物科研工作得到了前所未有的重视，实验动物的科普也获得了前所未有的需求。     

胸导管结扎对胰淀肽沉积及胰岛激素和糖代谢的影响

采用腹部结扎大鼠胸导管,建立胰淋巴瘀滞动物模型,观察实验动物胰组织结构的变化和胰淀肽沉积情况,探讨胰淋巴瘀滞对胰岛激素和糖代谢的影响.30只10月龄SD大鼠随机分为实验组和对照组;造模后6个月取胰组织标本,经石蜡包埋和切片,常规HE和刚果红染色,冰冻切片胰淀肽免疫组织化学染色后光镜观察;在胸导管结扎前、后及实验动物处死前,分别取静脉血测血糖、胰岛素和C-肽.结果显示:1)实验组动物胰组织切片的HE和刚果红染色光镜观察显示,胰腺小叶和胰岛的组织间隙明显增宽,而且胰岛普遍表现为朱红色刚果红着色现象;2)胰淀肽免疫组织化学染色切片的光镜观察表明,在实验组动物的胰岛及其周围,普遍呈现胰淀肽免疫反应强阳性棕褐色着色反应;3)实验组大鼠术后血糖明显升高,血清胰岛素水平下降,与对照组相比差异显著,然而C-肽水平的变化不明显.胰组织结构的变化提示,结扎胸导管可导致胰淋巴引流障碍、胰腺内脂肪堆积、胰岛及其周围胰淀肽沉积、胰岛细胞功能受损、血中胰岛素浓度下降和血糖水平升高.     

稀有鮈鲫的组织学切片制作和苏木精-伊红染色

目的目前鲜有专门针对稀有鮈鲫这种新型实验动物进行组织切片制作方法的研究,故我们对此进行了实践、摸索以建立一完整的组织学切片制作流程供参考交流。方法对正常生活状态下的健康稀有鮈鲫采用Bouin`s固定液固定,并用脱钙液软化骨骼后进行修块,组织块经梯度酒精脱水、松油醇透明之后,按照标准流程制成石蜡切片,HE染色后封片用显微镜观察。结果切片主要采取横断面和矢状面作为观察方位,并使用显微拍摄装备摄取了结构分明的各系统组织脏器的组织学照片。结论本文所述的方法经过多次探索和实践,制得的组织切片镜检结果清晰,质量稳定,可作为以稀有鮈鲫等小型硬骨鱼为实验动物的切片制作提供一些可行的建议。     

2017年10月北京市啮齿类实验动物的病理检测

目的 通过检测北京市啮齿类实验动物的病理变化,为北京市实验动物质量监控及改进提供依据。方法 对送检的400只啮齿类实验动物,其中包括180只小鼠、80只大鼠、120只豚鼠及20只金黄地鼠,采集心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠,制成石蜡切片后进行HE染色,对镜检肝细胞肿胀的样品又分别进行了PAS染色和冰冻切片油红O染色,并于显微镜下观察。结果 此次进行实验动物质量的抽检,检出病变主要为小鼠、大鼠、豚鼠均出现不同程度的肝脏细胞肿胀,并均有糖原沉积病变检出,脂肪变性在豚鼠检出;此外小鼠及金黄地鼠,尤其是部分金黄地鼠出现明显肝脏坏死及炎性细胞浸润;小鼠和豚鼠的心脏发生增生性炎;小鼠肾脏炎性细胞浸润。结论 本次抽检的啮齿类实验动物基本健康,部分啮齿类动物的饲养管理仍需加强,本监测结果可为科研实验的准确性提供可靠有效的依据。     

实验动物学科教育的启示和SPF级动物实验室的建成应用

1996年春天,江西省药物研究所药理室科研人员6人,全部参加了江西省实验动物管委会和省科委联合组织的关于实验动物资格教育的培训班。我们原来只知道用动物做实验,对实验动物的有关知识是全然不知的。通过学习班学习,我们才了解到实验动物这门学科还有许多未知的领域。我们开始懂得了实验动物有质量分级,动物实验设施与环境也有严格的管理要求。我们回顾自己的科研工作,发现原来在科研中遇到的问题有很大一部份是由于实验动物本身的质量所造成的,正如在学习班时老师所讲的:“实验动物是一把尺,尺本身就不准确,量出来的长度是不可能准的”。…     

实验动物在生物技术药物生产中的应用

在生物技术药物的研制、开发、生产和质量检验过程中 ,都离不开实验动物。实验动物作为研究材料和药物质量控制中“活的测试仪器” ,起到了其他手段不可替代的作用 ;而且 ,整体实验动物或动物组织细胞还用作药物生产的“工厂”和原材料 ,在生物技术药物事业发展和保证人民健康方面发挥着重要作用。1　利用动物细胞、组织或鸡胚作为生产基质　　生物制品是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料 ,制备用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。在中国生物…