利用松材线虫的内寄生真菌Esteya vermicola防治松萎蔫病

Esteya vermicola是首次发现的松材线虫的内寄生真菌。最近从韩国土壤中发现了该菌的一个新菌株。该菌株能产生两种孢子,并能在4~5 d内感染几乎所有测试的松材线虫分离物。最近2年里在韩国进行了该菌株的温室和林间的接种试验,使用了3种方法进行接种,即喷施、注干和将感染的松材线虫接种到松树上。结果证明,该菌在松树幼树中生长并侵染到接种松树中的松材线虫,在松树中也观察到该菌的存在。目前,对该菌的使用方法和施用配方的评价和商品化工作正在展开。     

丢失毒力质粒的小肠结肠炎耶氏菌实验性感染家兔致病机理研究

本文报告应用致病性血清型丢失毒力质粒Ｙ．ｅ菌株４３９－８０Ｖ－及８２－１４０进行家兔体内感染，通过大体病变、组织病变和细胞病变的观察．研究其致病性及致病机理．结果表明：这两株Ｙ．ｅ．菌感染性与致病性明显弱于对照组──致病性血清型带毒力质粒Ｙ．ｅ菌株，其中．用４３９－８０Ｖ－菌株接种的家兔不发生感染与致病．用ＬＡＢ－Ｂ１８２菌株接种的家兔有排菌，肠粘膜上皮溃疡，急性脾炎病变．但无微脓肿及菌落形成．无组织细胞变性坏死．     

蜡蚧轮枝菌对茶蚜的侵染模型

接种4株蜡蚧轮枝菌Lecanicillium,(Verticillium,) lecanii(菌株V07、V08、V23和V27)不同剂量(2x103、2×104、2×105、2 x106和2 x107孢子- mL-1)孢子悬浮液到茶蚜Toxoptera aurcntii室内种群,观察茶蚜种群在24℃和100% RH培养条件下的感染和发病情况,得到蜡蚧轮枝菌侵染茶蚜的发病指数,用Gompertz模型拟合了病情指数和作用时间及初始接种剂量之间的动态关系.结果表明:表观侵染速率与初始接种浓度相关,同一菌株侵染速率随初始接种孢子浓度的增大而增大.初始接种剂量为2×107孢子.mL-1时,菌株V07对烟粉虱的侵染速率最快.     

不同血清型禽霍乱巴氏杆菌免疫的研究Ⅰ.不同方法制备免疫原的免疫保护试验

应用禽多杀性巴氏杆菌C48- 1菌株 (血清型为A∶1 ) ,分别通过接种人工培养基、含动物血液人工培养基、发育禽胚、感染易感鸡等途径 ,获得相应菌培养物后 ,分别制备成灭活免疫原 ,进行了对鸡免疫接种后的感染保护试验。结果初步表明 ,应用接种发育禽胚及感染鸡制备的相应菌培养物 ,其菌体发育及制备免疫原后免疫接种鸡的感染保护效果 ,均优于人工培养基的相应培养物 ,为免疫原的有效制备提供了技术资料及方法     

西昌某奶牛场乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

目的 为了确定导致西昌市某奶牛场引起乳房炎的病原。方法 无菌采集患病奶牛乳样2份进行细菌分离培养、形态学观察、生化鉴定、溶血酵素基因（khe基因）和16S rRNA基因鉴定、小鼠致病性试验以及药敏试验。结果 （1）分离到1株菌，该菌为革兰氏阴性的粗短杆菌，形态学观察与生化特性均与肺炎克雷伯菌相符合；（2）khe和16S rRNA基因序列与GenBank中肺炎克雷伯菌的同源性分别为99.6%~99.8%和99.7%~100%，因此，将分离菌确定为肺炎克雷伯菌，并将其命名为XC1分离菌株；（3）小鼠致病性试验结果显示，4只接种小鼠均在接种第3天全部死亡，表明XC1分离菌株具有较强的毒力；（4）药敏试验结果显示，XC1分离菌株对恩诺沙星、诺氟沙星、头孢比肟和头孢他啶高度敏感，对妥布霉素、庆大霉素和新霉素中度敏感，对红霉素、氨苄西林和阿莫西林耐药。结论 该奶牛场发生的乳房炎与肺炎克雷伯菌感染有关，且XC1分离菌株对临床常用的抗生素存在不同程度的耐药性。     

青春双歧杆菌和乳链球菌混合发酵的研究

对人体有益的肠道菌（青春双歧杆菌ＢＡ菌株和乳链球菌ＳＬ菌株）的双菌混合发酵进行了研究，选择了双菌混合发酵的最佳碳源，发酵周期，以及混合发酵的两种菌接种量的比例，在常温下保存３００ｄ，活菌体在１×１０６个／ｍＬ左右．并采用双菌混合发酵产物对小鼠进行了急性毒性测定，观察其对小鼠免疫器官重量的影响．     

空心莲子草致病菌分离、鉴定及其致病效果研究

从自然发病的空心莲子草中分离出9 种菌株,经鉴定菌株B、D 分别为不同的链格孢菌,菌株C 为粉孢菌,菌株F 为尖孢镰刀菌,菌株G 为串珠镰刀菌,菌株E、I 为未知真菌,A、H 均为细菌.将分离得到的菌株接种到健康的空心莲子草上,结果表明,在供试的9 个菌株中,菌株F（尖孢镰刀菌）对空心莲子草有较强的抑制作用,其次为菌株B（链格孢菌）,接种9d 后的病情指数分别为46.69%和17.33%.     

骆驼消化道内喹啉降解菌的分离、筛选及降解能力

骆驼能够采食其他动物不能够食用的具有强烈气味的有毒植物,而不影响其正常生理代谢.研究发现骆驼采食的植物毒素与喹啉等杂环化合物具有相似的化学结构,所以研究骆驼体内是否存在潜在的杂环化合物降解菌具有重要意义.研究采集3头骆驼消化道内容物(瘤胃和肠道),以喹啉为唯一碳源和氮源进行5代富集培养.通过高通量测序技术对消化道内容物和5代富集培养微生物分离、筛选的菌株进行了16S r DNA PCR扩增与测序分析.从第5代富集培养液中共分离获得降解喹啉的菌17株,其中优势微生物是芽孢杆菌属的菌和苍白杆菌属,分别占到77.78%和17.60%.实验中2株降解菌K3、K38分别在132 h内降解喹啉66.79%和66.20%,显示较强的降解能力.选取菌株K3进行4因素、3水平正交实验.结果表明,温度对实验结果影响最大,其次是接种量,再次为初始pH,最后是碳源.菌株K3的最佳实验条件是温度37℃,接种量15%,初始pH 7.0,碳源5 g.     

外生菌根菌对核桃的浸染技术研究

为探索外生菌根菌浸染对核桃根系的影响,找出最佳浸染技术方案,采用浸染温度、湿度等方面的调控对比实验研究了美味牛肝菌、紫色马勃、鸡油菌等外生菌根菌对核桃浸染的根际菌根形成及菌根感染强度的影响。研究结果表明,美味牛肝菌接种组苗木的菌根感染强度(M%)为47.34%,紫色马勃接种组苗木的菌根感染强度(M%)为48.54%,鸡油菌接种组苗木的菌根感染强度(M%)为48.73%;当温度为24℃,相对湿度为70%时,菌根感染强度最大为48.6%。     

蜡样芽孢杆菌NJSZ-13菌株诱导马尾松抗松材线虫病研究

【目的】蜡样芽孢杆菌NJSZ-13是1株能杀死松材线虫的松树内生细菌,研究该菌株能否诱导马尾松抗松材线虫病,为进一步开发利用该菌株抗松材线虫病提供理论依据。【方法】通过对2年生马尾松苗根部施用NJSZ-13菌株菌悬液和灭活的菌悬液后4 d再接种松材线虫,以观察不同处理的病情发展。测定该菌诱导处理后4天内和接种松材线虫AMA3虫株后28天内马尾松体内防御相关酶活性的变化。【结果】接种松材线虫后42 d,菌悬液和灭活菌悬液处理诱导马尾松抗松材线虫病的效果达54%和33%,且发病时间延迟。接种NJSZ-13菌株后,马尾松体内丙二醛(MDA)含量减少,过氧化氢酶(CAT)活性降低,而过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和多酚氧化酶(PPO)活性均显著高于对照;接种松材线虫后,菌悬液和灭活菌悬液处理的马尾松这5种酶活性明显高于未接种菌株的马尾松苗。总体上,菌悬液处理比灭活菌悬液处理的马尾松防御相关酶活性变化显著。【结论】蜡样芽孢杆菌NJSZ-13菌株能诱导马尾松抗松材线虫病,并且菌悬液的诱抗效果最佳。     

水拉恩氏菌JZ-GX1及其诱变菌株对马尾松苗的促生效应

水拉恩氏菌(Rahnella aquatilis)JZ-GX1及其诱变菌株JZ-GX1-2和JZ-GX1-10能够有效降解植酸盐。笔者将水拉恩氏菌JZ-GX1及其优良突变菌株接种于马尾松实生苗,研究其对马尾松实生苗生长的影响,分别于接种60、120、180 d后测定并比较各接种实生苗的光合参数和叶绿素含量,以及接种前和接种180 d后马尾松苗的苗高和地径生长量。结果表明:接种菌剂对马尾松苗净光合速率(Pn)、PSⅡ实际的光化学量子效率(Ф_PSⅡ)和叶绿素含量,以及马尾松苗高和地径的生长促进作用,其中诱变菌株JZ-GX1-2的促进作用最佳,其次是诱变菌株JZ-GX-10,再者是经筛选获得的野生型菌株JZ-GX1。试验结果表明水拉恩氏菌JZ-GX1及其诱变菌株JZ-GX1-2和JZ-GX1-10可用于进一步开展田间试验和野外造林试验。     

重金属胁迫下土壤微生物促进蕈菌菌丝生长的研究

对两株具有重金属活化能力的微生物粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens） M6和粘质红酵母（Rhodotorula mucilaginosa）K1的植物促生长特性做了分析：M6和K1均产吲哚乙酸（IAA）、铁载体并具有溶磷能力,但不能利用ACC（1氨基环丙烷1羧酸）作为唯一氮源生长.种子根伸长实验表明：M6和K1均不能促进小白菜种子发芽和根伸长,相反,50mg/L Cd和Zn培养条件下,接种菌株K1对小白菜种子生长有显著抑制作用.蕈菌菌丝生长实验表明：接种M6菌株于金福菇菌丝边缘,可促使菌丝生长更为浓密;接种K1菌株,可提高菌丝生长速度;此外,接种菌株还可缓解重金属对蕈菌菌丝生长的胁迫效应.     

土壤拮抗细菌对茄病镰孢菌的抑制作用和防治研究

:从云南、贵州、河北、吉林、黑龙江、北京、天津等地采集土样 2 8个 ,采用常规平板稀释法分离获得的细菌菌株 4 14个。以茄病镰孢菌为主要靶标菌 ,对分离菌株进行抑菌测定 ,筛选出强拮抗菌13株 ,并用附着在茄子、番茄等上 9种病原菌对其进行拮抗作用测定 ,发现所获拮抗细菌具有广谱抗性。筛选出具广谱拮抗作用的生防菌株 B0 73、B153,其发酵液中活菌在温室内人工接种条件下进行温室接种防病试验 ,对茄病镰孢菌防治效果分别达 71.1%和 6 1.8% ,并兼具治疗作用     

硅酸盐细菌解钾能力研究

对分离到的两株硅酸盐细菌的解钾能力进行了测定，其中BM—BD菌株具有较强的解钾能力，接种该茵的摇瓶培养液中，水溶性钾含量为5．6μg/mL，比不接菌对照增加了47．4％，大于解钾模式菌株ACCC10013的解钾能力．对BM—BD菌株进一步试验表明：该菌株在发酵罐培养条件下也能将云母中的矿物钾释放出来，接种培养108h后，培养液中的水溶性钾增加了34％。     

酸盐细菌解钾能力研究

对分离到的两株硅酸盐细菌的解钾能力进行了测定,其中BM-BD菌株具有较强的解钾能力,接种该菌的摇瓶培养液中,水溶性钾含量为5.6 μg/mL,比不接菌对照增加了47.4 %,大于解钾模式菌株ACCC10013的解钾能力.对BM-BD菌株进一步试验表明该菌株在发酵罐培养条件下也能将云母中的矿物钾释放出来,接种培养108 h后,培养液中的水溶性钾增加了34%.     

低温好氧反硝化菌的选育以及脱氮性能

通过接种某污水处理厂循环活性污泥工艺(cyclic sludge system, CASS)反应池出口活性污泥到培养基,经过对污泥驯化从中分离出1株低温好氧反硝化菌IL-2,温度4℃.对IL-2菌进行常规的生理生化鉴定和16S rDNA测序,鉴定出IL-2菌为Pseudomonas属.考察了不同C/N质量浓度比、温度、溶解氧、接种量、处理时间对菌株IL-2反硝化脱氮效果的研究.随着C/N质量浓度比、处理时间、溶解氧的不断增加,菌株IL-2的脱氮效果逐渐增强;随着温度和接种量的不断增加,菌株IL-2的脱氮效果先逐渐增强后减弱.该菌株在初始硝态氮质量浓度为20 mg/L,C/N质量浓度比为10,温度为4℃,溶解氧为3.5 mg/L,接种量所占体积为30%,处理10 h的条件下硝态氮的去除效果最好,为95.95%.该菌株主要适用于冬季温度较低的市政污水的处理.     

加州鲈诺卡菌病病原的分离与鉴定

 加州鲈是我国南方的重要经济鱼类养殖品种,但近年病害问题十分突出。诺卡菌已成为危害加州鲈健康养殖的重要病原,目前对该病原菌的分离鉴定及种属类型的研究尚未见报道。国内首次从患病加州鲈体内分离得到诺卡菌,并最终确定了其病原种类是鰤鱼诺卡菌Nocardia seriolea。从患病加州鲈内分离到菌株NH090627,镜检发现该菌为革兰氏阳性的分支状杆菌。生理生化鉴定结果表明分离菌株与诺卡菌属Nocardia细菌的基本特征相符。回归感染试验证实菌株NH090627即为引起此次加州鲈结节病的病原菌。对该菌株的16S rDNA进行了扩增和序列分析发现,该菌株与诺卡菌属细菌的亲缘关系较近,且与鰤鱼诺氏菌N. seriolea JCM 3360的16S rDNA 序列同源性最高,达到99.9%。综合上述试验结果,我们将加州鲈结节病的病原菌鉴定为鰤鱼诺卡菌。为了指导该病的防控,还对该病原菌做了一系列药敏试验,结果显示,该菌株对氯霉素、链霉素、卡那霉素、四环素等抗生素敏感,但对磺胺类和氨苄青霉素有耐药性。     

小肠结肠炎耶氏菌实验性感染家兔的大体病变观察

本文报告应用小肠结肠炎耶氏菌以６×１０￣８的细菌数，经静脉注射家兔的大体病变观察。实验结果表明，致病性血清型带毒力质粒小肠结肠炎那氏菌Ｇ１５１（血清型０：９）和ＬＡＢ－Ｂ１８２（血清型０：３）引起家兔严重感染及病变：排菌、食欲和体重减轻，肠、肝、脾组织脓肿和溃疡形成，ＬＡＢ－Ｂ１８２菌株引起家兔肝和肠组织局灶性坏死。致病性血清型丢失毒力质粒的小肠结肠炎那氏茵茵株４３９－８０Ｖ￣－（血清型０：９）和８２－１４０（血清型０：８）不引起家兔明显的感染及病变：不排菌或排菌时间短，腹腔脏器组织无大体病变或病变极其轻微。     

松材线虫携带细菌的致病性

用松材线虫携带的3种细菌（菌株Njh,菌株Njt和菌株Njw)和2种线虫（松材线虫和拟松材线虫）为接种体，以黑松愈伤组织和黑松无菌苗为接种对象，分别用无菌线虫单独接种，细菌单独接种，细菌和无菌松材线虫混合接种，细菌和无菌的拟松材线虫混合接种等，测定对黑松愈伤组织和黑松无菌苗的致病能力，接种试验结果表明，单独用无菌松材线虫或松松材线虫接种，均不能使黑松愈伤组织褐变和无菌黑松苗枯萎，而用无菌线虫与上述3种细菌分别混合接种均能使黑松无菌苗发生枯萎及愈伤组织严重褐变，其中线虫和菌株Njh，线虫和菌株Njt致萎活性很强，线虫和菌株Njw致萎活性较弱，在自然界致病力弱的拟松材线虫与细菌混合接种同样能引起松苗严重萎蔫及愈伤组织褐变，实验室条件下，人工接种幼苗病害的发生与松材线虫携带的细菌密切相关，而与线虫的在关系不大，松材线虫所携带的细菌在这一病害过程中起至关重要的作用。     

蜡状芽孢杆菌对番茄青枯雷尔氏菌致病性的影响

青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）从其致病性上可分为能使植株发病的强致病力菌株和不能使植株发病的弱致病力菌株．利用蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）与致病性稳定的青枯雷尔氏菌强致病力菌株进行共培养，处理后的青枯雷尔氏菌在TTC平板上表现为弱毒株的菌落特征，出现了致弱现象．经过16S rDNA基因序列测定，证明了用蜡状芽孢杆菌处理前后的菌株为青枯雷尔氏菌，并非是其它的污染菌株，通过回接番茄盆栽苗发现致弱前的青枯雷尔氏菌能有效引起番茄发生青枯病，而致弱后的菌株丧失致病力．不能引起番茄发病，