用RAPD技术分析烟草与曼陀罗体细胞杂种

利用RAPD技术对普通烟草(Nicotiana tabacum L.cv Xanthi nc)和毛曼陀罗(Datura innoxia Mill)原生质体融合获得的体细胞杂种进行了分析.使用了9个10-mer随机引物对7个体细胞杂种和双亲进行RAPD指纹图谱分析,从7个杂种的9组DNA指纹图谱上共得到570条扩增带,其中与烟草特征谱带相同的带数占了67.8%,与双亲共有的谱带相同的带数为24.6%,而与曼陀罗特征谱带相同的带数仅有2.8%.由此可见,杂种组织倾向于排除毛曼陀罗的DNA,融合体是一个高度不对称的体细胞杂种.此外,杂种中还出现了双亲没有的谱带(新带占4.8%).     

分子标记RAPD在被子植物分类上的应用

RAPD是一项基于PCR技术的DNA分子水平上的多态性检测技术,该项技术的应用和诸多优点极大地促进了植物分类学的发展.文中简述了近年来RAPD技术在品种鉴定、种属亲缘关系探讨、传统分类地位的验证、新分类理论依据的提出以及构建遗传图谱等被子植物分类领域的应用和取得的进展.     

用流式细胞仪和RAPD快速鉴定柑橘体细胞杂种

利用流式细胞仪和随机扩增多态DNA（RAPD）方法对获得的3例柑橘体细胞杂种进行鉴定,结果表明,两者相结合可快速有效地鉴定体细胞杂种．所检测的3个组合共9株再生植株,有8株是四倍体体细胞杂种,1株为二倍体叶肉亲本型杂种．体细胞杂种一般表现为具有双亲的特征带,且综合双亲的所有带,但在部分杂种中检测到了双亲都没有的新带,也发现有丢失亲本的特征带或共有带的现象,说明融合后染色体发生了重组和交换;有的引物只检测到叶肉亲本的特征带,根据柑橘叶肉细胞无论单独培养还是共培养均不能再生的事实,可推测其为体细胞杂种或二倍体叶肉亲本型胞质杂种．对这两种方法相结合用于体细胞杂种鉴定的可行性进行了讨论．     

水稻光温敏雄性不育基因连锁标记的分离与鉴定

两系法杂交稻是一种利用水稻杂种优势的重要途径，主要依据水稻光温敏雄性不育系在不同条件下的育性转换用于配制杂交种．以培矮64S(PTGMS)与明恢63杂种自交的F2代为供试材料，采用随机放大多态性DNA(RAPD)技术分离与培矮64S的PTGMS基因连锁的分子标记．在F2代2个分别代表可育和不育的群体以及亲本株系中，采用100个RAPD引物扩放基因组DNA筛选多态性DNA片段．RAPD引物S8产生的DNA片段中，除重复顺序外，有一个长度为0．85kb片段为单拷贝．分子杂交表明，这一单拷贝标记与培矮64S的PTGMS基因连锁．     

利用RAPD方法鉴定西瓜杂种纯度的研究

以不同西瓜杂交种及亲本自交系为材料，研究利用RAPD技术鉴定西瓜杂种的纯度及种质。结果表明：在反应条件适合、引物选择正确的情况下，RAPD技术完全适合于西瓜杂交种纯度的早期鉴定及种质鉴定。同时发现，引物OPD16及OPA07适合种内鉴定，而引物OPA10、OPA13、OPH18可用于杂种纯度鉴定。同时，对利用同工酶技术和RAPD技术在进行西瓜杂交种鉴定过程中的优缺点进行了分析与讨论。     

胡卢巴基因组DNA提取及RAPD引物筛选

以胡卢巴叶片为材料,利用改良CTAB法提取基因组DNA并进行质量检测和含量测定,在优化RAPD反应体系的基础上,对100条RAPD随机引物进行了筛选.结果表明,采用改良CTAB法能从胡卢巴叶片中提取到高质量的DNA,可以用于RAPD分析;从100条随机引物中筛选出了16条显示胡卢巴遗传差异的多态性引物,为胡卢巴遗传多样性研究提供分子依据.     

应用RAPD和同工酶遗传标记鉴别彭泽鲫中的克隆

应用随机扩增多态性DNA(RAPD)和同工酶检测技术检测分析了18尾彭泽鲫，从样品鳍条提取基因组DNA，水平式淀粉凝胶电泳法检测同工酶，结果显示，肝脏GPI、肌肉GPI和肝脏EST3种同工酶均有变异出现，3种同工酶组合后可将实验鱼划分为遗传组成各不相同的8种克隆，6种引物PCR扩增的RAPD电泳图谱与同工酶的划分结果一致。     

葡萄抗霜霉病基因RAPD标记的序列分析

用WizardDNAClean upSystem纯化葡萄抗霜霉病基因RAPD遗传标记OPO 0 6 - 150 0片段 ,用T easyVector克隆RAPD标记 ,采用自动荧光DNA测序仪 (型号ABI 377DNASe quencer)测定了该DNA片段的核苷酸组成及其排列顺序 .来自中国野葡萄的RAPD标记OPO 0 6- 150 0从左右两端各测了 586bp和 4 52bp .对两端序列的酶切位点进行了分析 .根据两端序列可以设计专一PCR扩增引物作为合成抗霜霉病检测探针的基础 ,用于检测葡萄抗病育种和抗病品种的霜霉病抗性 .     

随机扩增多态性DNA技术在生命科学炽的应用

DNA分子标记是DNA水平上遗传变异的直接反映,随机扩增多态性DNA（RAPD）技术,是新发展起来的一种DNA分子标记方法。文中详细阐述了RAPD技术的原理,进一步与限制性片段长度多态性（Restriction FragmentLength Polmorphism,RFLP)技术相比,得出它具有快速,简便和对材料要求不高等特点,最后讨论了RAPD技术在生命科学研究中各个方面的广泛应用,包括种基因组的分子谱图建、系统进化发育以及基因定位研究等。     

海滨锦葵杂交后代的RAPD分析

报道了海滨锦葵植物基因组DNA的提取方法、RAPD(随机扩增多态性)-PCR(聚合酶链式反应)反应程序及RAPD标记对海滨锦葵两对组合亲本及其杂交后代进行的分子鉴定.初筛出的38个引物中有20个(52.6%)能在J2×J1组合亲本间扩增出31条特征带,初筛出的32个引物中有8个能在J3×J4组合亲本间扩增出12条特征带.组合J2×J1的8个杂交后代用OPB15引物扩增后均表现出父本J2的特征带,是真杂种;组合J3×J4的28个后代用引物OPB15扩增后,表现父本特征带的F1代个体数为24个,为真杂种,其余4个为假杂种.     

红花性状标记杂交棉新品种鲁05H9 SSR指纹图谱构建及应用

利用SSR分子标记技术对红花标记杂交棉新品种鲁05H9及其亲本材料进行多态性检测,从多态性高、重复性好的98对SSR核心引物中筛选出12对在双亲间具有多态性的引物、在F1中表现为杂合带的共显性标记。利用该12对引物构建了鲁05H9及其亲本的SSR指纹图谱。利用核心引物组合扩增的方法,可以鉴定鲁05H9的真实性和纯度,对于品种保护、纯度鉴定及杂交种推广具有极其重要的意义。     

复播油葵F_1 和F_2 代的比较研究

通过对目前在新疆推广的 3个复播油葵F1、F2 代的主要农艺性状、种子性状、生理生化性状以及经济性状的比较研究 ,结果表明 ,F1、F2 代之间差异不明显 ,但F2 代的净产值比F1代高 ,说明在生产中种植F2 代仍有利可图。     

几种番茄品种基因组DNA的相似指数初步分析

用４种随机引物（１０ｂｐ）,对普通番茄５个品种的基因组ＤＮＡ进行了ＰＣＲ扩增,并对其ＲＡＰＤ带谱进行了统计处理,发现不同随机引物扩增出来的ＲＡＰＤ标记所表现的相似指数有所不同,综合考虑,普通番茄种内不同品种同ＤＮＡ多态性保持了较高的稳定性。     

基于RAPD的藏马鸡亲缘关系的研究

为了测定7只笼养藏马鸡的亲缘关系,利用随机扩增多态DNA技术对7个个体进行了分析.选用53个10bp的随机引物对每只藏马鸡的基因组DNA进行扩增,获得14个有效引物,并得到226个扩增片段.根据聚类分析所得到的树状图,确定了7只藏马鸡的亲缘关系,证明RAPD可以用来鉴定亲缘关系.     

Identification of RAPD marker linked with fertility-restoring gene of cytoplasmic male sterile lines in upland cotton

Bulked segregant analysis was employed to construct two mixed DNA pools to screen the RAPd marker linked with the fertility-restoring gene(Rf _i) of upland cotton. A total of 425 arbitrary 10-mer oligonucleotide primers were screened on two DNA pools, bulked male fertile and sterile DNAs isolated from BC₃ segregating population of (0-613-2R X Simian No. 3). Three primers produced repeatable polymorphisms between the paired bulks and their parents. DNA was extracted and amplified with these three primers for 92 plants of (Zhong 12A-1 × 0-613-2R)F₂. Based on the male fertility scoring and RAPD amplification, it is found that one RAPD marker fragment designated OPV-15₃₀₀ was linked with the fertility-restoring gene (Rf₁) with a recombination value of 13.0±2.57%.     

非特异性PCR产物的分离和扩增

在PCR（polymerase chain reaction)扩增产物的非特异性电泳带位置上及弥散状背景的一定间隔位置上，分别以切胶分离相应分子量的DNA分子作为模板，用产生这些非特异性DNA分子的一种引物在通用PCR条件下进行PCR扩增，仅在切胶的相应位置出现DNA分子量同样大小的电泳条带。阐述了这种模板DNA分子形成和出现非特异性电泳带与弥散状背景之间的关系。     

抗番茄青枯病内生拮抗细菌的筛选及室内防效测定

从健康番茄体内分离到了93株内生细菌。采用含菌平板抑菌圈测定法，筛选出了3株对番茄青枯菌具有较强拮抗力的细菌菌株ZB—1、ZB-2和ZB-6。温室盆栽防病试验结果表明，内生细菌菌株ZB-6对植株进行预处理后，番茄青枯病防病效果可达63—65％，说明该菌株对番茄青枯病发生具有较好预防效果。     

茶树杂交种金观音与黄观音的选育及应用

选配铁观音（♀）与黄金桂（♂）杂交,从F1中分离单株,经20多年的试验研究与生产示范,育成综合性状优异的杂交种金观音（又名茗科1号）、黄观音,先后通过省级与国家级品种审定．两个杂交种适制鸟龙茶与绿茶,制优率高,黄观音亦适制红茶、白茶．花香明显,品质优异,超过黄金桂,香气与制优率均比铁观音高．茶多酚、氨基酸等生化成分和萜烯醇类及其氧化物、酯类、内酯类、酮类等乌龙茶香气特征成分含量丰富,金观音、黄观音的遗传性状分男ll趋向母本与父本．超亲优势强,产量高,比双亲平均增产20％至60％以上,扦插繁殖力、抗性与适应性强,超过双亲．开采期早,与黄金桂同期,分别比铁观音提早13d与10d左右．适宜在福鼎大白茶的适栽区域推广．     

Leray—Schauder度的一种推广及不动点和固有值

设Χ是实Banach空间,dimΧ=∞,Ω(?)Χ是有界开集,F:(?)→Χ全连续,f=I-F,p∈Χ\kf((?)Ω),k∈R且k>O.我们定义d_L(kf,Ω,p)=d_(LS)(f,Ω,(1/k)p).于是d_L具有Leray-Schauder度的基本性质.应用这个拓扑度可以推广Schauder不动点定理和Rothe不动点定理.并且我们得到固有值存在定理:设F:(?)→Χ全连续,O∈(?),F(0)=0.假设S(?)(?)是非空闭集,使得inf{||x-y|| |x∈X\S,y∈(?)F(S)}>0,则F有无穷多个固有值.     

Molecular markers linked to Rsa resistant to soybean mosaic virus

Soybean mosaic virus (SMV) is a severe disease in worldwide soybean production. A cross was made between Kefeng No. 1 with broad spectrum resistance to SMV and Nannong 1138–2, a susceptible cultivar. The inheritance of resistance to SMV strain Sa prevailing in southern China was analyzed. Results of x² test from inoculation experiment on parents F1, F2 and F3 lines showed that the resistance to strain Sa was controlled by a single dominant gene Rsa. BSA method was adopted and 900 random 10-mer primers were used to amplify total DNA from resistant pool and susceptible pool in order to obtain polymorphic bands in two bulks. 16 primers could generate polymorphic bands, of which OPW-05 and OPAS-06 could generate the most stable RAPD patterns. RAPD markers OPW-05₆₆₀ and OPAS-06₁₈₀₀ were found to be linked to Rsa. Their order and genetic distance were OPAS-06₁₈₀₀22.2cM Rsa10.1 cM OPW-05₆₆₀. Southern blotting showed that both OPAS-06₁₈₀₀ and 0PW-05₆₆₀ were low copy DNA in genomic DNA. 0PW-05₆₆₀ has been converted into an RFLP marker successfully. Additionally, pK644H, an RFLP marker, has been identified to be linked to 0PW-05₆₆₀, and their genetic distance was 37.4 cM.