荧光光谱技术及其在癌肿瘤诊断中的应用

分析荧光产生的物理机制，说明生物组织自体荧光光谱能够反映肿瘤组织的特异性，可以作为组织诊断的依据．介绍荧光光谱技术在肿瘤诊断中的具体应用，并对癌组织中的发光物质和应用中注意事项作些探讨。     

肿瘤组织自体荧光光谱测量与分析

以波长为４８８ｎｍ的Ａｒ＾＋激光为激发源，采用高分辨的光谱测试系统测量了鼠肿瘤组织的光诱导自体荧光光谱，并与同一肌体正常组织测量值进行了比较，结果表明肿瘤组织的光谱强度低于正常值，且在５４０ｎｍ，５８０ｎｍ附近存在吸收峰。     

激光诱导荧光在肿瘤诊断中的应用

介绍了利用激光诱导生物组织的自体荧光和药物荧光光谱技术在肿瘤诊断中的应用，并对这两种方法进行比较和讨论，在此基础上提出了它们今后的发展方向。     

胃癌的自体荧光特征谱

利用激光诱导荧光法（laser-induced auto fluorescence,LIAF)选择多种波长测试和比较了胃癌和胃正常组织标本，得到区分癌变组织与正常组织的最佳激发波长；选取光谱特征差异最显著的波段425－475nm，采用形状识别技术分析31例胃癌及胃正常组织的自体荧光光谱曲线，经去噪声，曲线拟合，求区间最大曲率，最终以区间最大曲率的理想平均值作为区分阈值标准，获得高达93．5％的敏感性和100％的特异性，为临床实用奠定了基础。     

自体荧光—喇曼光谱技术用于癌症诊断的研究

进行了癌症及正常人血清的自体荧光－共振喇曼光谱实验研究。研究结果表明，癌症患者血清喇曼谱与正常人有明显的差异，并确认这是由于正常人血清中β－胡萝卜素含量明显高于癌症患者所致。故血清喇曼光谱测试可以作为癌症诊断的一个可靠手段。     

荧光光谱法快速定位恶性肿瘤

报告一种快速定位恶性肿瘤的新方法:把氩离子激光器、光学多道分析仪、纤维光学元件和内窥镜组合,用于临床的激光激发荧光光谱检测,在计算机上直接显示出表征组织恶变特异性的数据点,提高诊断的准确性,能连续快速搜索成片可疑区,应用这项技术对30只Lewis肺癌小鼠和对21例体表、腔管表恶性肿瘤病人实施自体荧光光谱或血卟啉荧光光谱的检测,结果均能快速地区分出恶变区和正常区。     

光敏剂PpIX的组织荧光光谱校准方法

以PpIX光敏剂的生物组织荧光光谱定量检测为目的,采用蒙特卡罗(MC)方法模拟不同组织的荧光光谱和漫反射光谱,并给出荧光光谱和漫反射光谱的校准方法.通过自主搭建组织荧光光纤检测系统,分别对3种组织光学模拟液中的光敏剂荧光进行实验测试和光谱校准.得出3种组织光学模拟液的原始荧光光谱离散系数为28%,经过构建的算法校准后,离散系数减小到3%.结果表明此方法能有效提高组织模拟液的荧光光谱测量准确性.     

荧光猝灭法测定铕

研究了不同条件下Eu^3 与色氨酸的荧光光谱性质，实验发现Eu^3 对色氨酸的自体荧光具有显著的猝灭作用，结果表明，在pH 10．6的三酸缓冲介质中，色氨酸的荧光猝灭程度与Eu^3 浓度呈良好的线性关系，据此建立了荧光猝灭法测定Eu^3 的新方法．该方法用于样品测定，操作简便、重现性好、灵敏度高．     

上皮组织的深度分辨非线性光谱成像技术

基于多光子激发自体荧光和谐波信号的非线性光谱分辨成像技术，将多光子显微镜和光谱测量技术的优点集于一身，它可以同时获得组织内在成分的微结构和光谱特性．利用LSM510META激光扫描显微镜系统和深度分辨非线性光谱成像技术，对活体小鼠皮肤的微结构和光谱特性进行了研究．实验结果表明，深度非线性光谱分辨成像技术能够识别活体小鼠上皮组织的细胞层和基质层结构，能够监测上皮细胞的NADH、细胞内间质黄素蛋白、基质层的胶原蛋白、毛干中的角蛋白和黑色素等不同组织成分的发射光谱．实验观察部位的小鼠皮肤的HE染色、胶原纤维和弹力纤维特殊染色的结果也证明了利用深度分辨非线性光谱成像技术获得结果的准确性．随着微型、便捷的多光子显微镜系统的出现，深度分辨非线性光谱成像技术能够对上皮肿瘤组织的早期直接、实时、客观、无损地探测、诊断和监测提供可能，将在临床医学应用中具有重大意义和实用价值．     

恶性肿瘤特征自体荧光的来源以及在诊断中的应用

利用激光激发恶性肿瘤器官产生的自体荧光谱,显示出在630nm和690nm附近有特征峰。利用这种特征荧光峰可以作为诊断恶性肿瘤的手段之一。已经对一百例以上病员作了临床诊断。与病理切片比较,符合率达89%。光谱研究表明,这种荧光特征峰可能来自人体内聚集于肿瘤区的内源性卟啉化合物。     

三种癌裸鼠移植瘤肝脾转移的比较研究

摘要: 目的利用人卵巢癌、胃癌、结肠癌裸鼠移植瘤动物模型观察比较肝脾转移情况。方法分别将人卵巢癌、 胃癌、结肠癌实体瘤移植到裸鼠皮下,在建立人卵巢癌、胃癌、结肠癌裸鼠实体瘤模型的基础上,观察裸鼠实体瘤生 长速度、存活时间及肝脾转移病理形态学变化。结果人卵巢癌、胃癌、结肠癌实体瘤移植到裸鼠皮下,移植成瘤 率、肝转移率皆为100% ; 卵巢癌脾转移100% ; 胃癌脾转移62. 5% ; 结肠癌脾转移75% 。人卵巢癌裸鼠实体瘤生 长速度高于胃癌、结肠癌裸鼠实体瘤,且肝脾转移快,存活时间短; 三种癌裸鼠移植瘤肝脾转移病理形态均有差异。 结论建立的人卵巢癌、胃癌、结肠癌裸鼠移植瘤肝脾转移完整地再现了人卵巢癌、胃癌、结肠癌患者肝脾转移的 临床过程,为探讨人卵巢癌、胃癌、结肠癌肝脾转移生物学机制和抗转移提供参考,三种癌裸鼠移植瘤肝脾转移癌 均有差异。     

p63在胃癌组织中的表达

目的:探讨抑癌基因p53蛋白家族成员p63蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达情况.方法:回顾性分析41例胃癌及37例癌旁组织,利用组织微阵列技术,构建88点组织阵列,并采用免疫组织化学技术S-P法检测该阵列中p63蛋白在胃癌及其癌旁组织中表达情况.结果:①p63蛋白定位于细胞核,呈弥漫分布的棕黄色颗粒;②胃癌组织中,p63蛋白表达于核大间变细胞中;p63蛋白在高分化型胃癌中阳性表达率为5.9%,在低分化型胃癌中的阳性表达率为41.7%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);③p63蛋白在胃癌癌旁组织中无表达,在胃癌中的阳性表达率为24.4%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:①p63蛋白的高表达可能参与了胃癌的发生;②p63与胃癌的分化程度有关,并可能参与了胃癌细胞的分化.     

MSP58基因在肝癌中的表达分析

探讨MSP58基因在人类肝癌肿瘤组织及肝癌细胞系中的表达情况,应用半定量RT-PCR和Western blot方法分别检测MSP58在肝癌细胞系及肝癌肿瘤组织中的mRNA水平及蛋白水平的表达.两种肝癌细胞系HHCC、HepG2,22例肝癌癌区组织,13例正常肝组织作为对照.结果在两种肝癌细胞系中MSP58 mRNA水平和蛋白水平都有明显表达;在22例肝癌肿瘤组织中,不同级别的人肝癌肿瘤标本中mRNA及蛋白均有MSP58表达,并且MSP58的表达量随着人肝癌肿瘤恶性病理级别的增高而增高;13例正常肝组织无表达.MSP58在肝癌肿瘤组织和肝癌细胞系中均有表达,说明其可能对肝癌肿瘤的发生或发展有重要作用.     

甲状腺癌组织端粒酶激活与p16基因失活的关系

目的探讨甲状腺癌细胞增殖、分化与端粒酶激活及抑癌基因p16失活（缺失突变）之间可能存在的关系。方法应用TRAP、多重PCR、免疫组化法检测42例甲状腺癌与16例癌旁组织端粒酶活性、P16基因外显子2缺失、P16蛋白表达。结果甲状腺癌组端粒酶活性90．48％,高于癌旁组织（P〈0．01）;甲状腺癌p16基因外显子2纯合缺失率28．57％,相应癌旁组未检出（P〈0．01）;甲状腺癌P16蛋白表达缺失率40．48％,高于癌旁组（P〈0．05）;甲状腺癌P16蛋白表达缺失率高于p16基因外显子2缺失率。结论端粒酶激活与p16基因失活以及P16蛋白表达下调可能是甲状腺癌变过程中的重要分子事件,甲状腺癌中p16基因失活可能是端粒酶激活的一种途径。     

宫颈鳞癌组织中COX-2、P53蛋白的表达和意义

探讨宫颈癌、原位癌及正常宫颈组织中COX-2和P53蛋白的表达及意义。采用免疫组化Envision法检测宫颈癌组织46例、原位癌24例、正常宫颈组织15例中COX-2和P53的表达水平。宫颈癌组织中的COX-2和P53表达明显高于原位癌和正常宫颈组织,差异有统计学意义（x2=15．782,P〈0．01;x2=9．051,P〈0．05）,COX-2和P53在宫颈鳞癌Ⅰ～Ⅱ期和宫颈鳞癌Ⅲ期中和宫颈癌高分化和中低分化间差异没有统计学意义（P〉0．05）,COX-2和P53表达在有、无淋巴结转移间差异有统计学意义（P〈0．05）。COX-2和P53的表达与宫颈癌的发生、发展以及预后密切相关。     

化疗药环磷酰胺对癌细胞的细胞周期影响和诱导凋亡作用的研究

目的　研究化疗药环磷酰胺对癌细胞的细胞周期、DI值、PI值等某些生物学特性的影响及其诱导癌细胞凋亡的作用。方法　用BALB/c小鼠 ,荷腹水性肝癌 ,经腹腔给药CTX后 ,抽取腹水癌细胞进行形态学观察和流式细胞光度分析研究。结果　在环磷酰胺的作用下 ,癌细胞发生了凋亡 ,形态上观察到了许多凋亡细胞和凋亡小体 ;流式细胞光度分析发现 ,药物作用后 ,细胞周期发生了巨大变化 ,大多数癌细胞被阻断在G2M期 ,而G1期癌细胞明显减少 (P <0 0 5～P <0 0 1) ;同时 ,给药组癌细胞的DNA值和PI值亦明显增高 (P <0 0 5～P <0 0 1)。结论　环磷酰胺能够诱导癌细胞凋亡 ,而且对癌细胞的细胞周期一般规律有较大的干扰。分析认为这对癌症临床治疗会有一定启示。     

Systematic identification of genomic markers of drug sensitivity in cancer cells

Clinical responses to anticancer therapies are often restricted to a subset of patients. In some cases, mutated cancer genes are potent biomarkers for responses to targeted agents. Here, to uncover new biomarkers of sensitivity and resistance to cancer therapeutics, we screened a panel of several hundred cancer cell lines--which represent much of the tissue-type and genetic diversity of human cancers--with 130 drugs under clinical and preclinical investigation. In aggregate, we found that mutated cancer genes were associated with cellular response to most currently available cancer drugs. Classic oncogene addiction paradigms were modified by additional tissue-specific or expression biomarkers, and some frequently mutated genes were associated with sensitivity to a broad range of therapeutic agents. Unexpected relationships were revealed, including the marked sensitivity of Ewing's sarcoma cells harbouring the EWS (also known as EWSR1)-FLI1 gene translocation to poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibitors. By linking drug activity to the functional complexity of cancer genomes, systematic pharmacogenomic profiling in cancer cell lines provides a powerful biomarker discovery platform to guide rational cancer therapeutic strategies.     

结肠癌并梗阻的诊治

本文就1978～1988年间收治40例结肠癌并梗阻患者的诊断与治疗进行探讨。在诊断方面,本文分析了结肠癌梗阻的临床特点,提出钡灌肠造影检查是确诊结肠癌梗阻的主要措施。本文认为对结肠癌所致梗阻均应尽量施行Ⅰ期切除肿瘤,根据全身和局部条件决定Ⅰ期吻合或造瘘。本组40例,Ⅰ期切除25例,无手术死亡,Ⅰ期吻合21例,无吻合口瘘并发症,取得了满意的效果。本文还对结肠癌梗阻穿孔的治疗作了讨论。     

胃癌中p53基因失活及其蛋白产物的免疫组化分析

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂我及免疫组化等方法同步研究２５例胃癌标本的ｐ５３基因突变，杂合性丢失及蛋白持表达，在２２例胃癌中同时获得有关ｐ５３基因突变和杂合性丢失的检测结果，被检出ｐ５３基因突变的５例胃癌中，２例伴有杂合性丢失，３例仅有ｐ５３基因突变。     

肝癌瘤苗在DENA诱发Wistar大鼠肝癌过程中阻断作用的研究

肝癌瘤苗用体外冷冻方法制备．并应用于ＤＥＮＡ诱发原发性肝癌Ｗｉｓｔａｒ大鼠。结果显示：该瘤苗能提高Ｗｉｓｔａｒ大鼠的细胞免疫和体液免疫功能．并能阻断由ＤＥＮＡ诱发的Ｗｉｓｔａｒ大鼠原发性肝癌。