用人工海水培养坛紫菜营养细胞的研究

用人工海水代替天然海水进行坛紫菜叶状体营养细胞培养试验，研究了不同配方及不同纯度ＮａＣｌ配制的人工海水的培养效果。结果表明，坛紫菜叶状体营养细胞能够在完全由无机盐组成的人工海水培养液中正常地分裂、发育与再生，在正常Ｃａ浓度下，细胞发育与再生的情况与在天然海水中完全一样，存活率也基本相似。配制人工海水时，可以用食用细盐代替分析纯ＮａＣｌ，培养效果没有明显差别；但用粗盐替代时细胞存活率降低。Ｃａ浓度显著影响单离细胞的存活率和发育情况，降低培养液Ｃａ浓度至标准海水的１／４时，细胞存活率明显降低，再生形成精子囊和丝状体的数量大大减少，其结果显著提高了细胞培养中叶状体的得率，但不增加正常苗的数量。本文的结果表明，用人工海水代替天然海水进行紫菜细胞和原生质体培养是完全可行的。文中讨论了用人工海水培养紫菜细胞的优点和意义。     

坛紫菜的细胞发育研究

报道了坛紫菜离体单细胞的培养结果．实验表明，单离细胞能在琼脂固体培养基上良好地存活、分裂和再生．正常的体细胞能再生为正常苗、畸形苗、壳孢子以及较多的细胞团等；固体培养下有些细胞团能长成类愈伤组织；一些单离细胞能直接成为壳孢子囊枝；成熟的细胞团和类愈伤组织还能释放出小孢子．     

光照对坛紫菜生长和无机碳利用的影响

］以坛紫菜Z-61品系为研究材料,分析坛紫菜叶状体和丝状体在三种光强（10,50,500 μmol·m-2·s-1）下的应答。发现:1）坛紫菜叶状体和丝状体的光系统 Ⅱ 最大量子产量及叶绿素a和藻红蛋白的含量都随光强增加而降低,但净光合速率、最大光合速率、胞外碳酸酐酶活性和总碳酸酐酶活性则随光强增加而增加。2）当光强从10 μmol·m-2·s-1增加到500 μmol·m-2·s-1时,坛紫菜叶状体的生长速率约增加77%;丝状体的生长速率先增加后降低,在光强500 μmol·m-2·s-1下达到最低,比在10 μmol·m-2·s-1下显著下降了约90%。3）在三种光强下,坛紫菜叶状体的最大光合速率、光系统 Ⅱ 最大量子产量和生长速率都大幅高于丝状体。这些结果表明:坛紫菜的光系统 Ⅱ、光合作用与生长对光强的应答并不完全一致;叶状体比丝状体更适应高光,这可能是长期进化的结果;光强可以改变坛紫菜对无机碳的吸收。     

紫外线辐射坛紫菜离体细胞的初步试验

报道紫外线辐射离体培养的坛紫菜叶状体细胞，对细胞存活率，分裂和发育再生情况进行观察的结果。试验显示，坛紫菜离体细胞对紫外线辐射比较敏感，试验中使用的各种紫外线辐射量对离体细胞都有伤害致死作用，随着辐射量加大，细胞存活率下降，紫外线辐射还具有抑制细胞分裂，诱发与增加再生苗形态变异的作用。根据试验结果，认为紫外线是一种有效的诱变因子，还讨论诱变处理方法及适宜的辐射量。     

MNNG(N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍)诱变坛紫菜原生质体的初步研究

运用化学诱变剂MNNG(N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍)处理坛紫菜(Porphyra haitanensis)原生质体,观察不同剂量的诱变剂对体细胞生长分裂速度和发育分化方向的影响.结果显示:不同剂量的MNNG(7.5～120.0 μg·cm-3)对坛紫菜体细胞的生长都有明显的抑制作用,而且会影响坛紫菜体细胞的发育分化方向.7.5 μg·cm-3、15.0 μg·cm-3诱变处理组向畸形细胞团和丝状体发育;30.0 μg·cm-3和60.0 μg·cm-3诱变处理组向团型叶片发育;120.0μg·cm-3诱变处理组后期多发育为正常型叶片.同时在体细胞培养过程中发现一种与条斑紫菜(Porphyra yezoensis)单孢子结构功能相似的类单孢子细胞.     

坛紫菜单性组织培养的性逆转研究

为了进一步研究坛紫菜的单性组织发育特征并验证其可能存在的单性生殖途径,本文对坛紫菜雌、雄营养细胞、组织发育过程中两性生殖组织的形成和繁殖特征以及两种单性遗传来源的子代叶状体的性别发育特征进行观察研究.结果表明,单性营养细胞和组织能够通过性逆转产生两性生殖组织并形成丝状体,该繁殖方式不属于单性生殖.单性遗传来源的子代叶状...     

秋水仙碱与EMS处理坛紫菜离体细胞的初步观察

报道用不同浓度秋水仙碱与EMS（甲基磺酸乙酯）处理坛紫菜离体细胞,对处理后细胞的存活率、分裂和发育再生情况进行观察的结果。试验表明,秋水仙碱处理可显著抑制高体细胞分裂,促进再生藻体生长假根、增加有根苗比例,延缓再生藻体发育成熟与衰亡：浓度≥5×10-3时对离体细胞产生显著地致死和致再生藻体畸形作用。EMS处理也有一定的促进离体细胞再生苗生长假根作用,对细胞分裂抑制作用不明显,也未观察到明显的致畸变或致突变作用。较高浓度EMS处理（2×10-3处理2小时或4×10-3处理1小时）引起细胞急性中毒和严重死亡。     

坛紫菜自由丝状体发育的诱导试验

应用不同来源及不同培养状态的坛紫菜自由丝状体,进行了初步的发育诱导试验.结果表明:可以在室内诱导紫菜自由丝状体的发育,使处于不同生长状态的坛紫菜自由丝状体从营养藻丝转化为孢子囊枝,转化的速度与原来的生长状态有关.不同的品系的自由丝状体在相同的诱导条件下,表现的结果是不一样的,应用于栽培生产的自由丝状体容易形成孢子囊枝.温度是诱导自由丝状体发育的重要因素.PO43--p的添加量为20～30 mg/L范围内,自由丝状体出现孢子囊枝的时间接近,当PO3-4-P的添加量超过40 mg/L或少于20 mg-L以后,对自由丝状体的发育不利.     

培养条件对坛紫菜(Porphyra haitanensis)(Rhodophyta)自由丝状体超低温保存的影响

通过培养条件对坛紫菜(Porphyra haitanensis T．J．Chang et B．F．Zheng)自由丝状俸超低温保存的影响的研究，结果表明：不同培养条件，存活率不同；生长旺盛的丝状体存活率较低；经抗寒锻炼的丝状体有一定的存活率；在适于形成膨大藻丝的条件下，丝状体存活率最高，可达60％以上．     

磺化乙丙三元胶固体中离子相互作用的研究

合成了分别含Ｌｉ￣＋，Ｎａ￣＋，Ｋ￣＋和Ｍｇ￣（２＋），Ｃａ￣（２＋），Ｂａ￣（２＋）的６种乙丙三元胶（ＥＰＤＭ）磺酸盐离聚体，溶解性试验反映出固体中存在聚集引起的离子交联，红外光谱表明金属离子与的相互作用为Ｌｉ￣＋＞Ｎａ￣＋＞Ｋ￣＋和Ｍｇ￣（２＋）＞Ｃａ￣（２＋）＞Ｂａ￣（２＋）及Ｍ￣（２＋）＞Ｍ￣＋，通过动态力学分析，讨论了离聚体中离子相互作用对离子聚集和橡胶平台区温度范围的影响规律。     

坛紫菜耐低盐品系的选育及经济性状的比较

对人工选育的褐绿色、翠绿色、红棕色坛紫菜F1、F2、F3代叶状体在低盐(盐度为15、10)培养条件下的生长和品质进行了研究.结果显示:3种色泽坛紫菜在盐度为15、10的条件下培养20 d,均无成熟、腐烂现象发生,藻体长度增长、鲜重增长和总藻胆蛋白含量均高于野生型坛紫菜(对照组).红棕色F1代叶状体与褐绿色、翠绿色藻体及对照组相比,具有明显的耐低盐能力;通过体细胞克隆和单性生殖获得的红棕色F2、F3代叶状体,在盐度为15、10的条件下,长度增长和鲜重增长较F1代叶状体稳定;红棕色F2代叶状体,在盐度为5的条件下培养20 d,藻体色泽鲜艳,无成熟、腐烂现象发生,生长良好;3～4 cm长的红棕色F3代叶状体,在盐度为5的低盐环境中培养20 d后,平均长度为(46.66±8.68)cm,比对照组长11.89 cm,总藻胆蛋白质量比(干品)达(76.52±3.80)mg*g-1.由此可见,在盐度为10左右生长良好、性状稳定的耐低盐品系,可为坛紫菜向河口区或低盐水域扩大栽培提供有用的种质.     

坛紫菜转鲎素基因的初步研究

以坛紫菜为材料,利用电穿孔法将构建的含有鲎素基因tachyplesin I 的同源重组表达载体pSV40-HR-MAR-tachyplesin I 导入坛紫菜叶状体体细胞.并通过PCR、Southern杂交等分子生物学检测方法对导入后的细胞进行检测,结果表明构建的以坛紫菜18S rDNA的460、1 200 bp的序列作为外源基因3'端和5'端同源重组序列,同时以家蚕的MARs序列作为增强表达序列的同源重组表达载体导入坛紫菜叶状体体细胞后,鲎素基因tachyplesin I 能整合到坛紫菜叶状体体细胞内.通过Northern点杂交检测的结果表明,鲎素基因能在坛紫菜体细胞内瞬时表达.本研究构建的鲎素基因同源重组表达载体可用于相关大型海藻的转基因研究中.     

坛紫菜(Porphyra haitanensis)自由丝状体的胶囊化冰冻保存

在适宜孢子囊枝发育的条件下培养坛紫菜自由丝状体,用３％褐藻酸钙包埋（胶囊化）制成胶球,经脱水后直接投入液氮中冰冻保存,结果表明,胶囊化的坛紫菜丝状体在１０h的脱水过程中可保持约９０％的存活率,当胶球含水量下降至４２．９５－１６．６％时,冰冻保存在活率可达６５％左右,与常规的两步法冰保存比,胶囊化方法可大大简化操作程序,是保存坛紫菜自由丝状体的一种较为理想的方法,在藻类种质保存中有广阔应用前景 。     

漫话紫菜

紫菜(Porpohyra)是海洋中的低等植物,属于红藻门、红藻纲、红毛菜目、红毛菜科.据不完全统计,全世界约有紫菜70余种,仅日本就有30余种.我国辽宁、河北、山东、江苏、浙江、福建、广东、海南沿海都有生长,共10余种,其中有食用价值的为条斑紫菜(P. yezoensis)、坛紫菜(P. haitanensis)、绉紫菜(P. crispata)、甘紫菜(P. tenera)、长紫菜(P.dentata)和边紫菜(P·marginata)等.条斑紫菜和坛紫菜又是我国当前主要的栽培对象.福建、浙江多栽培坛紫菜,而山东、辽宁、江苏则为条斑紫菜.紫菜藻体一般呈深紫红色或黄绿色,多数由一层细胞、少数由两层细胞组成膜状的叶状体.叶状体可分固着器、柄和叶片三个部分.固着器由基部细胞伸出无色的根丝集合而成,集合根丝     

高温胁迫对条斑紫菜丝状体的生长和生理影响

在不同温度条件下培养条斑紫菜丝状体,观察丝状体生长状态并测定其叶绿素含量、可溶性蛋白含量、POD活性、丙二醛含量和可溶性糖含量随时间的动态变化情况.结果表明,在温度低于24℃条件下,条斑紫菜丝状体各生理指标与对照相比没有明显变化.24℃时,丝状体生长状态良好,POD活性在培养初期有所下降,36 h活性有所提高;在28、30℃条件下,培养超过12 h后,叶绿素含量明显下降,丝状体变成棕红色,培养后期细胞内容物外溢,出现死亡.可溶性蛋白、丙二醛、可溶性糖含量呈现先上升后下降的趋势.POD活性低于对照组.该研究结果为进一步揭示紫菜抗高温分子机制和培育抗高温紫菜新品种提供了一定参考.     

白菜型油菜原生质体培养的研究

以白菜型油菜为材料,从5日龄无菌苗的子叶和下胚轴游离原生质体,在DPD培养基中作浅层培养,密度为1×10~5个/ml。接种后48小时出现第一次分裂,6天后发生第二次分裂。此时,子叶原生质体停止发育,下胚轴原生质体可持续分裂。约一个月,形成大细胞团,转入固体培养基后可发育成愈伤组织。     

雷蒙特红豆草下胚轴愈伤组织原生质体再生植株

雷蒙特红豆草１０ｄ龄无菌苗的焉胚轴切段在附加２，４－Ｄ和ＫＴ各１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，取培养３周后形成的愈伤组织进行酶解可获得大量原生质体。原生质体在修改的ＫＭ８Ｐ液体培养基中培养，第１０ｄ开始分裂，２周后形成小细胞团，４周时发育成大细胞团。第７周将小愈伤组织转于含０．５％琼指糖的固体培养基上，它们可以旺盛生长，成为有根、芽分化的胚性愈伤组织，转于分化培养基上发育成苗的小植株。无根苗     

激光光散射及荧光光谱法研究金属离子对牛磺胆酸钠胶团性质的影响

采用激光光散射的方法，研究了Ｃａ￣（２＋）、Ｌａ￣（３＋）、Ｅｕ￣（３＋）存在下，ＮａＴＣ胶团及其与胆固醇、卵磷脂形成的混合胶团平均流体力学半径变化，发现金属离子能使胶团长大，并对胶团的结构及对胆固醇的增溶性有影响。以芘为荧光探针，研究了Ｃａ￣（２＋）、Ｌａ￣（３＋）离子对胶团内部微极性的影响，及通过Ｅｕ￣（３＋）的荧光光谱表征其配位场特征，证明金属离子与胆盐胶团间相互作用发生在胶团的表面。     

Ca^2＋对酿酒酵母与粟酒裂殖酵母细胞增殖的影响

ＳＤ培养基中外加不同浓度的Ｃａ＾２＋可促进酿酒酵母与粟酒裂殖酵母细胞的增殖,但在促进增殖方式上存在明显差异。随ＳＤ培养基中外Ｃａ＾＋浓度增加,酿酒酵母到达稳定期的细胞终浓度也越高;而粟酒裂殖酵母生长到达稳定期细胞终浓度随Ｃａ＾２＋浓度增加而增加的效应不明显。同时ＳＤ培养其中外加Ｃａ＾２＋对酿酒酵母的促进作用主要是通过加快生长对数明细胞分裂速度;对粟酒裂殖酵母主要是靠缩短生长延滞期来促进增殖。     

水稻悬浮细胞的固体表面培养及植株再生

报道了水稻根部悬浮细胞固体表面培养的试验结果。由水稻种子根部细胞诱导的愈伤组织,经两次继代培养后进行液体悬浮培养。除培养基成分外,愈伤组织的分裂活性及生理状态,是影响悬浮细胞迅速增殖的重要因素之一.在固体培养基表面培养悬浮细胞,对细胞团的出现和增殖有显著效果.再生小愈伤组织在再分化前进行一次固体继代培养,对再生愈伤组织的增殖和分化有明显的促进作用.