pH对坛紫菜丝状体光合速率和无机碳利用的短时效应

为了评估保种丝状体在长期碱化(高pH/低[CO_2])后,其CO_2浓缩机制(CO_2concentrating mechanism,CCM)能否快速响应CO_2浓度([CO_2])的变化,分析了丝状体的无机碳吸收利用途径对低pH/高[CO_2]的响应规律。结果表明:丝状体CCM的主要组分是胞外碳酸酐酶(CA)、胞内CA和HCO_3~-转运蛋白。在保种条件(pH=9)下,胞外CA对净光合速率的贡献达到80%;而在正常海水(pH=8)中,胞外CA和HCO_3~-转运蛋白对光合作用的贡献分别为45%和31%,二者差异不明显;当pH值降低到8时光合速率显著增加了74%,胞内CA的贡献显著增加。随着pH值的下降,CCM和光合固碳相关基因都受到显著抑制。本研究表明,即使经过长时间的高pH培养,坛紫菜丝状体依然能快速地在生理和分子水平响应低pH/高[CO_2]。     

坛紫菜（Porphyra haitanensis）SRAP分子标记体系的构建及种质材料的遗传分析

利用正交设计对影响坛紫菜SRAP标记分析的5个因素（模板DNA,Mg^2＋,Taq酶,引物,dNTP浓度）在4个水平上进行优化,筛选出各反应因素的最佳水平,建立了坛紫菜SRAP标记分析的最佳反应体系．然后利用该体系对15个坛紫菜种质材料进行了遗传多样性分析,筛选出15对可以扩增出清晰稳定条带的引物组合,共获得244个位点,其中184个位点具有多态性,占75．4％．15个供试材料间的平均遗传距离为0．2904,有效等位基因数为1．3758,期望杂合度为0．2303,Shannon多样性指数为0．3559．应用非加权成组配对法（UPGMA）对它们进行了聚类分析．结果表明供试的坛紫菜种质材料间存在着较高的遗传多样性,这为后续的坛紫菜遗传育种提供了丰富的遗传变异信息．     

南美白对虾摄食、生长及存活与温度的关系

不同水温及水温渐变、突变对南美白虾的摄食、生长、存活以及胃蛋白酶的活力有一定的影响。在水温逐渐变化下,南美白对虾忍受的高温极限为41℃,低温极限为4℃,虽然南美白对虾对水温的适应性较广（6－39℃）,但其存活、摄食及生长的适宜水温为18－35℃,最适水温为30－33℃,水温18℃以下时,摄食量减少,存活率降低,水温9℃时侧卧,当水温为18－30℃,日温变化在6℃以内时,南美白对虾在48h内全部存活,且保持正常的摄食能力和较强的活力。     

坛紫菜新品系WO144-3的主要经济性状分析

］对杂交选育的坛紫菜新品系(WO144-3)的生长性状、耐高温性能、叶绿素含量、藻胆蛋白含量等指标进行了测定,并与一个野生型品系(WT)进行了对比分析。结果表明:1)经过20 d培养,WO144-3品系叶状体长度从4 cm增加到138 cm,平均日增长率为17.59%,是WT品系的1.92倍;叶状体厚度为(17.41±0.33)μm,约为WT品系的70%。培养开始时,WO144-3品系长宽比约为WT品系的2倍,20 d后增加到5倍。但WO144-3品系的平均日增重率与WT品系没有显著差异。2)在30 ℃高水温培养10 d后,WO144-3品系叶状体的长度是WT品系的1.70倍;此外,高温处理对WO144-3品系的Fv/Fm没有显著影响,而WT品系的显著降低了59%。3)WO144-3品系的藻胆蛋白、藻红蛋白和藻蓝蛋白的含量分别为WT品系的2.05、2.74和1.42倍,但在叶绿素a和别藻蓝蛋白的含量上两品系没有显著差异。由此可得出:WO144-3是一个窄/薄叶品系,具有生长速度快、耐受高温胁迫、藻胆蛋白含量高等优点,具备应用于生产的潜力。     

光照对坛紫菜生长和无机碳利用的影响

］以坛紫菜Z-61品系为研究材料,分析坛紫菜叶状体和丝状体在三种光强（10,50,500 μmol·m-2·s-1）下的应答。发现:1）坛紫菜叶状体和丝状体的光系统 Ⅱ 最大量子产量及叶绿素a和藻红蛋白的含量都随光强增加而降低,但净光合速率、最大光合速率、胞外碳酸酐酶活性和总碳酸酐酶活性则随光强增加而增加。2）当光强从10 μmol·m-2·s-1增加到500 μmol·m-2·s-1时,坛紫菜叶状体的生长速率约增加77%;丝状体的生长速率先增加后降低,在光强500 μmol·m-2·s-1下达到最低,比在10 μmol·m-2·s-1下显著下降了约90%。3）在三种光强下,坛紫菜叶状体的最大光合速率、光系统 Ⅱ 最大量子产量和生长速率都大幅高于丝状体。这些结果表明:坛紫菜的光系统 Ⅱ、光合作用与生长对光强的应答并不完全一致;叶状体比丝状体更适应高光,这可能是长期进化的结果;光强可以改变坛紫菜对无机碳的吸收。     

低盐胁迫对坛紫菜（Pyropia haitanensis）离子转运的影响

从离子实时动态转运的角度出发,分析坛紫菜应答低盐胁迫的策略。研究结果表明:1）坛紫菜在正常状态下吸收K+、Na+以维持自身稳态;在低盐胁迫下,坛紫菜藻体的Na+显著外排,以积极应对外界低渗环境,同时,藻体的K+虽然有一定流失,但显著低于高盐胁迫条件下的K+外排幅度,使坛紫菜能够维持较高的K+/Na+,从而保证坛紫菜可以适应盐度5的环境条件。2）加入Na+/H+逆向转运蛋白抑制剂阿米洛利后,并不能显著抑制坛紫菜藻体Na+的外排,表明低盐胁迫下藻体并不是通过质膜质子泵驱动Na+/H+逆向转运蛋白将Na+排出藻体,可能通过非选择性阳离子通道外排Na+至细胞外。3）加入质膜质子泵抑制剂钒酸钠后,藻体K+的流速并没有受钒酸钠影响,初步说明低盐胁迫下坛紫菜K+的流失并不是通过去极化激活的外向通道来完成。这从离子动态的角度证明了低盐胁迫下坛紫菜排钠保钾的方式和应答高盐胁迫时存在明显区别。     

坛紫菜耐低氮磷品系选育的研究

在含氮量仅为海区的1/100、含磷量仅为海区的1/15的低氮、磷环境下,对人工选育和建立纯系的坛紫菜褐绿色、红棕色品系3代叶状体(F1、F2、F3)的耐受力情况及生长情况进行研究,发现2个品系的藻体均具有极强的耐低氮、磷能力:1)褐绿色藻体在低氮、磷环境下培养21 d才停止生长,叶片无成熟现象,仅轻微的腐烂和萎缩.3～4 cm长的藻体培养7～9 d时的长度日生长量是对照组的4.73倍,鲜重日增重率是对照组的5.29倍;培养18～21 d时的长度日生长量为(0.86±0.27)cm,鲜重日增重率为(5.32±0.21)%.褐绿色品系F3代的平均长度比对照组长28.7 cm.2)红棕色藻体在相同条件下培养15 d后停止生长,叶片无成熟、腐烂和萎缩,3代叶状体在低氮、磷甚至无氮、磷环境下的耐受力和生长状况均比较稳定且有所提高,遗传性状比较稳定.3～4 cm长的红棕色藻体在低氮、磷环境下培养7～9 d时的长度日生长量是对照组的4 95倍,鲜重日增重率是对照组的3.58倍;培养13～15 d时藻体的长度日生长量为(1.92±0.53)cm,鲜重日增重率为(13.61±0.46)%.F3代的平均长度比对照组长23.16 cm.3)通过选育可以看出褐绿色品系比较耐低氮、磷,该品系可以较好地解决养殖过程中低氮、磷环境对于紫菜养殖所造成的危害,缓解由于养殖密度过大而造成的病害发生和减产、减收现象.     

坛紫菜色素突变体产生原因的初步研究

以6种不同颜色的坛紫菜(Pyropia haitanensis)品系为研究材料,通过生理指标测定和转录组测试分析,对坛紫菜色素突变体产生的原因进行初步研究。根据色度值将6个品系划分为红黄组和绿组,其中:红黄组包括3个色素突变品系(红色、橘色和紫色)和1个野生品系,绿组包括2个色素突变品系(棕绿色和翠绿色)。进一步研究发现:1)红黄组品系的平均藻红蛋白(PE)含量比绿组高1倍,但两组藻体在藻蓝蛋白(PC)和别藻蓝蛋白(APC)含量上没有显著差异。2)红黄组藻体的平均叶绿素(Chl a)含量比绿组低35%,这导致红黄组藻体的PE/Chl a含量比绿组高1.7倍。3)红黄组藻体藻胆蛋白合成关键基因血红素氧化酶(HMOX1)和铁氧还蛋白氧化还原酶(HY2)的表达水平高于绿组。4)两组内不同品系间在色素合成关键基因的表达上具有显著差异。其中,叶绿素和藻胆蛋白合成的关键基因hemA的表达水平上调,促进更多色素的合成;叶绿素合成关键基因Mg-鳌合酶亚基和CHLG表达水平上调,调控藻体合成更多Chl a,使得藻体呈绿色;而HMOX1和HY2明显上调,促进血红素合成胆绿素,最终提高PE含量,使藻体偏红色。以上结果说明,坛紫菜藻胆蛋白和叶绿素合成通路中关键基因的差异表达可能导致藻体PE/Chl a含量比的不同,进而产生不同颜色的突变体。     

坛紫菜藻胆蛋白及叶绿素a的测定与分析

研究了不同色泽坛紫菜在不同培养温度条件下含藻胆蛋白及其叶绿素a量的差异,以及样品前处理过程中各因素(研磨、光照、被测定藻体的量等)对测定结果的影响.实验结果表明:1)不同色泽的坛紫菜叶状体在正常培养条件下,含藻胆蛋白和叶绿素a的量各不相同,其中褐红色型藻体的藻胆蛋白和叶绿素a的质量比最高,分别达114.87 mg/g和8.83 mg/g;绿色型藻体的藻胆蛋白的质量比最低(55.39 mg/g);桔红色型藻体的叶绿素a的质量比最低(4.58 mg/g).2)不同温度下培养的坛紫菜,其4种色素的含量存在一定的差异.在本实验条件下,随着培养温度的升高,坛紫菜色素含量也随之增加.3)在影响测定结果的各因素中,对坛紫菜4种色素含量的测定结果影响最大的是研磨,其次为光照.     

中国龙虾早期叶状幼体形态发生的观察

本实验通过投喂卤虫无节幼体和贻贝性腺对中国龙虾早期叶状幼体进行培育，早期叶状幼体是指初孵叶状幼体至叶状幼体的第5步足开始形成，共完成了6次蜕皮。第1次蜕皮的叶状幼体没有眼柄，第3颚足及第、、第2步足外肢分别具有3、5、5对羽状刚毛；第2次蜕皮后的叶状幼体开始出现眼柄及第4步足呈乳头状突起，第1、第2步足外肢具有6对羽状刚毛；第3次蜕皮后的叶状幼体第3步足外肢发育比较成熟并产生3对羽状刚毛，第3颚足及第1、第2步足外肢分别具有4、7、7对羽状刚毛；第4次蜕皮后的叶状幼体第1触角亚末端开始出现2根长刚毛，第1鄂足顶部刚毛消失，第3颚足及第1、第2、第3步足外肢分别具有4、8、8、4对羽状刚毛；第5次蜕皮后的叶状幼体第3噪声足及第1、第2、第3步足外肢分别具有5、9、9、5对羽状刚毛；第6次蜕皮的叶状幼体第5步足开始出现乳头状突起，并对叶状幼体1至6次蜕皮后的叶状幼体形态特征进行了详细的描述。